波蘭豬場中首次檢測到豬圓環病毒3型

何小莉，曾智勇，梁海英 （編譯）

（貴州大學動物科學學院，貴州 貴陽 550025）

豬圓環病毒系圓環病毒科圓環病毒屬成員，為二十面體對稱結構，無囊膜，單股負鏈DNA，基因大小約2 000 bp，是現在已知最小的能自主復制的病毒之一。迄今為止，兩種豬圓環病毒（PCV）已被人們廣泛研究，PCV1對豬沒有致病性，PCV2是PCV相關疾病的主要致病因子。2016年，Phan等從美國不同地區的哺乳仔豬、9～10周齡患有心肌炎或呼吸系統疾病的育肥豬中檢測出一種新型的豬圓環病毒，并命名為PCV3。Palinski等（2016年）從患有豬皮炎腎炎綜合征、繁殖障礙組織樣品中，也先后檢測到PCV3，并對2010年至2016年期間的48例豬皮炎腎病綜合征、271例豬呼吸系統疾病、34例的口腔液或鼻拭子的病例樣本進行檢測，結果顯示有45例為PCV3陽性。在中國，Shen等（2017年）從患有呼吸系統疾病并伴有高熱(＞40 ℃)的仔豬中檢測到PCV3，而PCV2、PRRSV（繁殖與呼吸綜合征病毒）和PRV（豬偽狂犬病毒）檢測結果均為陰性。Ku等（2017年）在中國的35個豬場中發現有24個豬場存在PCV3的感染，推測是引起繁殖障礙的重要原因。早在2009年，Li等曾從加利福尼亞州的商品豬樣本中檢測到類PCV3樣序列。上述結果表明PCV3已廣泛存在，但所有關于PCV3檢測的報道都集中在未知病因的病例上。目前為止，歐洲尚無PCV3的相關報道。

試驗隨機選取了2014～2017年期間-20 ℃保存的源自波蘭5個省，共14個常規豬場的3～20周齡豬血清樣本共1 050份，按周齡分組后，每個組選取8～10個血清樣品，每個組中取4～6個血樣合為1份，所有組共184份。同時，從其中12個豬場中，再分別隨機抽取10～20頭母豬血液樣品，每個豬場按每5個血樣合為1份，共32份。分別提取每份樣本核酸，對樣本進行PCV3 ORF2的實時PCR檢測，Ct值≤37判斷為陽性，再將Ct值最小的樣本進行靶向PCV3 ORF2的PCR檢測，將獲得的基因組序列應用Lasergene 14.0進行比對。

在上述調查豬場中PCV3的總體陽性率為85.7%（12/14），在單個豬場中，PCV3陽性率在5.9%～65%之間不等。在檢測的184份豬血清中，共46份PCV3檢測為陽性；母豬血液陽性率為29%（9/31），斷奶仔豬和育肥豬的陽性率分別為26.1%（12/46）和28.0%（33/118）。除此之外，在所檢測的12個豬場中有6個豬場母豬檢測到了PCV3；從源于10個豬場的20份斷奶仔豬樣品中，僅1份樣品實時PCR檢測為陽性。

將來自SU豬場的育肥豬的血清進行PCV3 ORF2的PCR擴增及測序，大小為359 bp，對應PCV3基因組序列位置為1 629～1 987。將序列進行比對，與此前報道的PCV3 29160（登錄號：KT869077）和PCV3-US/SD2016（登錄號：KX966193）的同源性分別為97.5%和99.7%。

14個豬場血清中PCV3的檢測結果表明，該病毒廣泛流行于波蘭各豬場中，可能在歐洲的其他地方也廣泛存在。然而，尚無法判斷豬只的健康狀況與PCV3的流行有何直接聯系。在所檢測的豬場中，名為KS和PR的豬場PCV3的陽性率分別高達64.3%和65%，而名為RO豬場的PCV3陽性率僅為5.9%。導致這些差異的原因，可能與豬場的管理制度、生物安全體系和衛生管理水平有關，同時不排除人畜共患這一傳播途徑的可能。

根據本次研究結果表明，3～4周齡的仔豬較少感染PCV3，說明母源抗體可能發揮了一定的保護作用。PCV3感染大多發生于斷奶后，所檢測的14個豬場中，斷奶仔豬抗原陽性率為26.1%，育肥豬抗原陽性率為28%。在KS豬場（剛發生繁殖障礙不久），PCV3在3～16周齡豬群中感染比例較大，但是，源自母豬血液樣品的實時PCR檢測結果卻均為陰性。

本次研究結果表明波蘭豬場存在PCV3感染，而且非常普遍，同時這是歐洲第1例關于PCV3感染豬的報道。目前還未發現因PCV3導致的急性病例，但并不能排除這些亞臨床感染會對豬只健康造成影響。PCV3病原檢測的發現和進一步研究是有挑戰性的，所以更需要專注于具有不同臨床體征患病動物監測，以檢測其他已知或潛在的病原體，以期對新病毒的遺傳多樣性展開分析。