舞花姜根總皂苷的提取工藝及其抗氧化活性

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(1.貴州省山地環境信息系統與生態環境保護重點實驗室/國家喀斯特石漠化防治工程技術研究中心，貴州師范大學,貴州貴陽 550001;2.貴州省藥物質量控制及評價技術工程實驗室,貴州師范大學,貴州貴陽 550001;3.貴州師范大學天然藥物質量控制研究中心,貴州貴陽 550001)

舞花姜(GlobbaracemosaSmith)為姜科舞花姜屬多年草本植物,主要分布于四川、貴州、廣西、廣東、湖南、江西、福建等中國南部及西南部各省,在貴州主要分布在綏陽縣、三都縣、都勻市、務川縣、錦屏縣、黎平縣、臺江縣、江口縣、荔波縣、凱里市和三穗縣等地,主要生長在山谷密林的溝邊或潮濕的河邊[1-2]，其性味氣微、味淡、微甘[3]。據文獻報道,舞花姜的根與果實在民間均有藥用歷史,它具有健胃,消炎功效,主要用于治療胃炎、消化不良、急慢性腎炎等[4]。

目前對舞花姜的研究主要集中于化學成分的分析[5],主要有木栓酮、β谷甾醇、半乳糖醇、3-羥基-豆甾-5-烯-7-酮、豆甾-5-烯-7-酮、α-蒎烯、β-蒎烯、芳樟醇、γ-松油烯、莰烯、橙花叔醇、檸檬烯、乙酸龍腦酯等多種有效成分。其中,木栓酮屬于五環三萜類化合物,已有研究證實木栓酮有抗腫瘤活性,同時也可作為一種化療藥物,治療腫瘤性疾病[6];α-蒎烯還有抗腫瘤、抗真菌、抗過敏及改善潰瘍的功效[7];β-蒎烯有較強的抗炎,祛痰和抗真菌作用[8]。芳樟醇除了可用作食用香精以及工業生產中的重要中間體,還具有鎮痛、抗焦慮、鎮靜睡眠、抗炎、抗腫瘤、抗菌等藥理活性[9];乙酸龍腦酯具有鎮痛抗炎等藥理作用[10-11]。因此,舞花姜作為一種藥用歷史的草本植物,具有潛在的藥用價值和開發前景。但目前,對于舞花姜根總皂苷的提取工藝及其抗氧化活性研究的報道尚未發現。本實驗采用響應面法優化舞花姜根總皂苷的最佳提取工藝[12-13],并用 DPPH和ABTS研究舞花姜根總皂苷的抗氧化活性,同時測定了13個不同產地的舞花姜根總皂苷含量及抗氧化活性,為舞花姜藥材的開發利用及質量評價提供一定的參考依據。

1 材料與方法

1.1材料與儀器

供試品 采集于貴州的13個縣市,經貴陽中醫學院孫慶文教授鑒定為姜科舞花姜屬舞花姜GlobbaracemosaSmith的全草。將采集的新鮮舞花姜樣品,將其根、莖、葉分離并陰干；齊墩果酸對照品 批號為GZDD-0043,貴州迪大生物有限公司;DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼) 批號為217-591-8,日本東京化成工業株式會社;ABTS(2,2-聯氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽) 批號為30931-67-0,北京百靈威科技有限公司;無水乙醇、甲醇、正丁醇、高氯酸、冰醋酸、香草醛等 均為分析純。

Spectra Max Plus 384酶標儀 美國Molecular Device公司;XS 105十萬分之一分析天平、AL 204萬分之一分析天平 梅特勒-托利多儀器上海有限公司;DFY-200高速萬能粉碎機 溫嶺市林大機械有限公司;R-200旋轉蒸發儀 瑞士BUCHI公司;電熱恒溫水浴鍋 天津市泰斯特儀器有限公司;Eppendorf research plus微量移液器 德國Eppendorf 公司;TD5M低速離心機 長沙邁佳森儀器設備有限公司。

1.2實驗方法

1.2.1 舞花姜根總皂苷的提取方法 準確稱取舞花姜根樣品1.00 g,加料液比為1∶25 (g/mL)的甲醇溶液,超聲提取50 min,過濾,離心,取上清液10 mL,揮干甲醇,用20 mL水溶解,再用水飽和的正丁醇萃取2次(每次20 mL),棄去水液,合并正丁醇液后揮干,殘渣用甲醇溶解并定容至10 mL容量瓶中,作為舞花姜根提取液。

1.2.2 標準曲線的繪制 準確稱取一定量的齊墩果酸對照品,用甲醇配制成0.1836 mg/mL的標準溶液。分別吸取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1 mL對照品溶液于具塞試管中,揮干溶劑,分別加入0.2 mL 5%香草醛-冰醋酸,再加入0.8 mL高氯酸,搖勻后,在75 ℃水浴鍋中顯色,25 min后迅速取出放入冰水中,冷卻至室溫取出,加入5 mL冰醋酸,搖勻,用同樣方法設置甲醇空白為參比,各平行三份。在550 nm處測定吸光度(A550 nm),以對照品溶液的濃度(mg/mL)為橫坐標,吸光度A為縱坐標,繪制齊墩果酸標準曲線,計算回歸方程。

1.2.3 最大吸收波長的確定 分別吸取一定量的樣品溶液及對照品溶液,按1.2.2項下的顯色方法進行操作,操作完畢后利用酶標儀在400～700 nm波長下進行全波長掃描,以確定提取液的最大吸收波長。

1.2.4 總皂苷的含量測定 準確吸取0.6 mL舞花姜根提取液溶液于10 mL具塞試管中,在70 ℃恒溫水浴鍋上蒸干,按1.2.2項下的顯色方法進行顯色,顯色完畢后將混合溶液引入一個ELISA板,于550 nm波長處測定樣品的吸光度(A550 nm),各平行三份,用同樣方法設置甲醇空白為參比,采用齊墩果酸為對照品,根據所得標準曲線算出舞花姜根提取液的總皂苷含量,單位為:mg/g。

式中:C1為對照品齊墩果酸的濃度(mg/mL);A2為樣品的吸光度;n為供試品溶液的稀釋倍數;V為樣品溶液加入量的體積(mL);M為舞花姜根粉末質量(g);A1為對照品的吸光度。

1.2.5 舞花姜根總皂苷的提取的單因素實驗 采用1.2.1項下的方法提取舞花姜根總皂苷,以舞花姜根總皂苷含量為指標,分別以不同的甲醇濃度、料液比、樣品粒度、超聲功率、超聲時間、提取次數作為單因素,考察各因素對舞花姜根總皂苷含量的影響,每組實驗重復三次。

1.2.5.1 甲醇濃度的影響 在料液比1∶25 (g/mL),超聲時間50 min,提取1次,超聲功率300 W,樣品粒度40目條件下,探討甲醇濃度(20%、40%、60%、80%、100%)對舞花姜根總皂苷含量的影響。

1.2.5.2 料液比的影響 在超聲時間50 min,提取1次,超聲功率300 W,甲醇濃度100%,樣品粒度40目條件下,探討料液比(1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30 g/mL)對舞花姜根總皂苷含量的影響。

1.2.5.3 樣品粒度的影響 在料液比1∶25 (g/mL),超聲時間50 min,提取1次,超聲功率300 W,甲醇濃度100%條件下,探討樣品粒度(20、40、60、80、100目)對舞花姜根總皂苷含量的影響。

1.2.5.4 超聲功率的影響 在料液比1∶25 (g/mL),超聲時間50 min,提取1次,甲醇濃度100%,樣品粒度40目條件下,探討超聲功率(120、180、240、300 W)對舞花姜根總皂苷含量的影響。

1.2.5.5 超聲時間的影響 在料液比1∶25 (g/mL),提取1次,超聲功率300W,甲醇濃度100%,樣品粒度40目條件下,探討超聲時間(20、30、40、50、60 min)對舞花姜根總皂苷含量的影響。

1.2.5.6 提取次數的影響 在料液比1∶25 (g/mL),超聲時間50 min,超聲功率300W,甲醇濃度100%,樣品粒度40目條件下,探討提取次數(1、2、3次)對舞花姜根總皂苷含量的影響。

1.2.6 響應面優化實驗設計 在單因素實驗基礎上,利用響應面分析法進行提取工藝條件的優化[14],選取料液比(A)、樣品粒度(B)和超聲提取時間(C)三個因素作為自變量,以總皂苷的含量作為響應值(Y)。根據 Box-Behnken Design(BBD)實驗設計原理制定因素水平表(見表1)。

表1 響應面設計因素水平表Table 1 Variables and levels in the response surface design

1.2.7 舞花姜根總皂苷抗氧化活性研究

1.2.7.1 VC對照品溶液的制備 準確稱取VC對照品10.01 mg,用水溶解定容到10 mL容量瓶中,配制成1.01 mg/mL的樣品液。

1.2.7.2 ABTS+·自由基清除能力的測定方法 實驗測定方法參照文獻[15-16]并略作修改,具體為:準確稱取ABTS 19.25 mg和K2S2O733.50 mg,分別用無水乙醇和蒸餾水溶解,定容到25 mL容量瓶中,使ABTS+·和K2S2O7最后濃度分別為0.77 mg/mL和1.34 mg/mL,按1∶1比例混合,在室溫避光條件下放置12 h,形成ABTS+·儲備液。使用無水乙醇將儲備液ABTS+·稀釋,使其在734 nm處的吸光度值為0.80±0.02。取0.6 mL ABTS+·溶液加入到0.2 mL不同濃度的樣品溶液中,搖勻,在室溫下放置7 min。將混合溶液引入一個ELISA板,VC作為空白對照,于734 nm波長處測定吸光度(A734 nm),各平行三份。將以上測得數據代入下列公式計算ABTS+·自由基清除率。

SA(清除率,%)=[1-(A樣品- A空白)/A對照]× 100

式中:A樣品:樣品溶液與ABTS+·溶液反應的吸光度值;A對照:甲醇與ABTS+·的吸光度值;A空白:甲醇與樣品溶液的吸光度值。

1.2.7.3 不同產地舞花姜根提取液對ABTS+·自由基清除能力的測定 取0.6 mL ABTS+·溶液加入到0.2 mL一定濃度的舞花姜根提取液中,搖勻,在室溫下放置7 min。將混合溶液引入一個ELISA板,VC作為空白對照,于734 nm波長處測定吸光度(A734 nm),各平行三份,按1.2.7.2項下的方法計算舞花姜根總皂苷對ABTS+·自由基清除率。

1.2.7.4 DPPH自由基清除能力的測定方法 參照文獻[17-19]并略作修改,具體為:準確稱取 DPPH 10.50 mg,用無水乙醇定容于100 mL容量瓶,配制0.105 mg/mL的溶液。取0.4 mL不同濃度的樣品溶液與0.4 mL 0.105 mg/mL DPPH工作液混合,室溫下反應40 min后,將混合溶液引入一個ELISA板,VC作為空白對照,在517 nm處測定吸光度值(A517 nm),各平行三份,將以上測得數據代入下列公式計算DPPH自由基清除率。

SA(清除率,%)=[1-(A樣品-A空白)/A對照]× 100

式中:A樣品:樣品溶液與DPPH溶液反應的吸光度值;A對照:甲醇與DPPH溶液的吸光度值;A空白:甲醇與樣品溶液的吸光度值。

1.2.7.5 不同產地舞花姜根提取液對DPPH自由基清除能力的測定 取一定濃度的舞花姜根提取液與0.4 mL 0.105 mg/mL DPPH工作液混合,室溫下反應40 min后,將混合溶液引入一個ELISA板,VC作為空白對照,在517 nm處測定吸光度值(A517 nm),各平行三份,按1.2.7.4項下的方法計算舞花姜根總皂苷對DPPH自由基清除率。

1.3數據統計分析

利用Design-Expert 8.0.6軟件分析及Microsoft Excel(Office 2016)程序對實驗結果進行分析。

2 結果與分析

2.1標準曲線的繪制

以齊墩果酸標準溶液濃度(mg/mL)為橫坐標,其吸光度A為縱坐標,繪制標準曲線,計算得齊墩果酸標準曲線回歸方程為:y=20.111X+0.0448,R2=0.9994(n=8),對照品在0.0061～0.0336 mg/mL濃度范圍內與吸光度呈現良好的線性關系。

2.2最大吸收波長的確定

舞花姜根提取液和齊墩果酸對照品溶液的最大吸收波長如圖1和圖2所示,結果可知,齊墩果酸對照品溶液和舞花姜根提取液在550 nm處均有最大吸收,故確定550 nm為最大吸收波長。

圖1 齊墩果酸紫外-可見吸收光譜圖Fig.1 UV-Visible Spectrum of the oleanolic acid

圖2 樣品溶液紫外-可見吸收光譜圖Fig.2 UV-visible spectrum of the sample solution

2.3單因素實驗結果與分析

2.3.1 甲醇濃度的影響 結果如圖3所示,隨著甲醇濃度的增加,提取總皂苷含量也在增大,當甲醇濃度為100%時,提取效果最好。這可能由于舞花姜根的主要成分是萜類和甾體皂苷元類物質,極性較小,較低濃度的甲醇極性太大,不利于總皂苷的溶出。故選用100%的甲醇做提取溶劑。

圖3 溶劑濃度的考察Fig.3 The study of solvent concentration

2.3.2 料液比的影響 結果如圖4所示,隨著料液比從1∶10到1∶30 g/mL 時,總皂苷含量呈現先下降后上升的趨勢,但從1∶25到1∶30 g/mL 時,總皂苷含量呈現下降趨勢。這可能是由于在一定范圍內增加提取液的體積可以增加接觸面積,使得更多的總皂苷被提取出來,但是提取液的體積繼續增大會使總皂苷的提取達到飽和,同時提取液的揮發量會增大,導致提取量趨于平穩或降低。考慮到提取溶劑體積過大會增加成本,體積過小總皂苷提取不完全,導致原料浪費,故選擇1∶25 (g/mL)作為提取舞花姜根總皂苷的最佳料液比。因此,在Box-Behnken軟件設計中選擇1∶20、1∶25、1∶30 g/mL進行響應面實驗。

圖4 不同料液比的考察Fig.4 The study of different solid-liquid ratio

2.3.3 樣品粒度的影響 物料的粒度大小要適當,聲波在穿透過程中,能量會隨著穿透距離的增大而發生衰減,如果粒度過大,料層過厚,會使物料粒子能量吸收不均,作用效果不均衡,可能會導致得率降低。結果如圖5所示,原料粒徑的大小對總皂苷的影響明顯,隨著粒徑的減小,總皂苷含量先增大后減小,在40目時達到最高。這是因為隨著粒徑逐漸減小,雜質逐漸被分出,原料可以和溶劑充分混合,使得總皂苷含量明顯增加,但是粒徑進一步減小,提取液粘度增加,不利于總皂苷的溶出。在40目時提取效果最好,總皂苷含量最大。因此,在Box-Behnken軟件設計中選擇20、40、60目進行響應面實驗。

圖5 樣品粒度的考察Fig.5 The study of the particle sizes of sample

2.3.4 超聲功率的影響 結果如圖6所示,隨著功率的增大,樣品總皂苷含量出現交替上升,在功率為300 W時,提取的總皂苷的含量最大。這是因為功率不斷增大加大植物細胞內部的溫度,分子熱運動加快,有利于總皂苷的提取。故選擇300 W為本實驗的提取功率。

圖6 提取功率的考察Fig.6 The study of extracting power

2.3.5 超聲時間的影響 結果如圖7所示,在提取時間從20到50 min之間時,提取樣品的總皂苷含量逐漸上升,在50 min時,超聲提取樣品的總皂苷含量最大,但50 min過后,總皂苷含量呈現迅速下降。這可能是因長時間的超聲提取溶劑揮發或總皂苷受溫度的影響部分分解所致,所以超時提取時間不宜過長,故50 min為最佳提取時間。因此,在Box-Behnken軟件設計中選擇40、50、60 min進行響應面實驗。

圖7 超聲提取時間的考察Fig.7 The study of ultrasonic extraction time

2.3.6 超聲次數的影響 結果如圖8所示,隨著提取次數的增加,提取的總皂苷量也隨之增加,當總提取次數在2～3次范圍時,舞花姜根總皂苷含量曲線基本趨于平坦,無顯著性差異,所以為了從節省資源、降低能耗、成本等角度考慮,故選擇提取次數為2次。

圖8 超聲提取次數的考察Fig.8 The study of ultrasonic extraction times

2.4響應面實驗結果與分析

在單因素實驗結果的基礎上,根據Box-Benhnken設計原理,以料液比(A)、樣品粒度(B)和超聲提取時間(C)3個因素為自變量,舞花姜根總皂苷含量為響應值,采用響應面法進行三因素三水平的響應面分析,研究各因素對舞花姜根總皂苷含量影響的顯著性和各因素的最佳組合,一共包括17組實驗方案,實驗設計方案及實驗結果見表2。

表3 響應面二次回歸模型與回歸系數方差分析結果Table 3 Significance test results for the coefficients of quadratic polynomial regression models

注:* 表示顯著水平(p<0.05);** 表示極顯著水平(p<0.01)。

表2 響應面實驗設計與結果Table 2 Response surface Box-Behnken designarrangement and experimental results

2.4.1 方差分析及二次多元回歸模型的擬合 結合表2結果,利用 Design-Expert 8.0.6統計軟件對表 2數據進行多項式回歸分析,得到舞花姜根總皂苷含量 Y對單因素料液比(A)、樣品粒度(B)和超聲提取時間(C)的相應的二次方程模型。Y=10.63+0.99A+0.38B+0.36C-0.23AB-0.15AC-0.37BC-0.95A2-2.16B2-1.56C2。

對上述回歸模型進行方差分析,并對模型系數進行顯著性檢驗,結果見表3。該回歸方程描述各因素與響應值之間的關系時,因變量和所有自變量之間的線性關系顯著,回歸模型的相關系數R2=0.9776,p<0.01,表示回歸模型高度顯著;失擬項p=0.2998>0.05不顯著,說明該回歸模型能夠很好的擬合實驗結果。R2=0.9776,說明總皂苷含量的變化有97.76%是由提取因素造成。因此,該回歸方程可以很好地反映舞花姜根總皂苷含量與提取因素之間的真實關系,即可通過該方程確定最優提取工藝條件。從回歸模型系數顯著性檢驗結果中可以看出,模型中一次項A、B、C均極顯著,其中A,B最為顯著,表明在所選因素中料液比(A)、樣品粒度(B)對舞花姜根總皂苷含量影響最大;交互作用AB、BC極顯著,AC交互作用顯著,二次項系數A2、B2、C2也極顯著。在所選取的各因素水平范圍內,A、B、C這三因素對舞花姜根總皂苷的含量影響最大的是料液比和樣品粒度,其次是超聲提取時間。

圖9 料液比、超聲提取時間和樣品粒度對總皂苷含量交互影響的響應面圖和等高線圖Fig.9 Response surface and contour plots of the ratio of liquid to material,ultrasonic extraction time and particle sizes of sample to total saponins content

2.4.2 各因素交互作用的響應面分析 圖9分別為料液比(A)、樣品粒度(B)和超聲提取時間(C)三因素交互作用對舞花姜根總皂苷含量的響應曲面圖。當超聲提取時間一定時,料液比,樣品粒度對舞花姜根總皂苷含量的交互影響如A圖所示。可以看出,當料液比一定時,隨著樣品粒度的增加,總皂苷含量呈現先增加后降低的趨勢。當樣品粒度低于約40目時,總皂苷的含量隨著樣品目數的增大而增大;而當樣品粒度一定時,總皂苷含量也有顯著的變化,也呈現先增加后降低的趨勢。當樣品粒度一定時,提取時間與料液比對舞花姜根總苷含量的交互影響如C圖所示。可以看出,當料液比一定時,隨著提取時間的增加,總皂苷含量先增后減;當提取時間一定時,總皂苷含量隨著料液比的增大呈先增后緩慢下降的趨勢;當料液比一定時,樣品粒度與提取時間對舞花姜根總皂苷含量的交互影響如E圖所示。可以看出,樣品粒度一定時,隨著提取時間的增加,舞花姜根總皂苷含量呈現上升趨勢,在50 min附近達到最大值后下降;當提取時間一定時,總皂苷含量隨樣品粒度的增大先增加后降低。因此表明,在一定程度上增加樣品粒度并控制提取時間約50 min,能夠提高總皂苷含量。

2.4.3 最佳工藝參數的確定與模型驗證 通過舞花姜根總皂苷含量的二次多項數學模型由軟件分析得到舞花姜根總皂苷的最佳提取工藝條件為:料液比為1∶27.62 (g/mL),樣品粒度37.5目,提取時間51.05 min,總皂苷含量為10.93 mg/g。考慮操作的可行性,對最佳提取條件進行修正,料液比為1∶30 (g/mL),樣品粒度40目,超聲提取時間51 min,采用修正后的條件對所建模型進行驗證實驗,結果顯示舞花姜根總皂苷含量為10.88 mg/g(n=3),RSD為0.45%,證明利用響應面分析法得到的舞花姜根總皂苷含量的提取工藝參數真實可靠,具有實用價值。

2.5舞花姜根總皂苷的抗氧化活性研究

2.5.1 ABTS+·自由基清除能力的測定 從圖10可知,當舞花姜根提取液濃度在2.25～22.25 mg/mL之間時,ABTS+·自由基的清除率與舞花姜根提取液的質量濃度呈現正相關關系,當樣品濃度為22.25 mg/mL時,舞花姜根提取液對ABTS+·自由基清除率為48.97%±0.62%。

圖10 舞花姜根提取物對ABTS自由基的清除能力Fig.10 The scavenging ability of Globba racemosaSmith roots extract on ABTS free radical

2.5.2 不同產地舞花姜根提取物對ABTS+·自由基清除能力的測定 由圖11可知,不同產地舞花姜根的總皂苷含量越高,相應的對ABTS+·自由基的清除能力越強,說明了舞花姜根提取物對ABTS+·自由基的清除能力與總皂苷的含量成正比關系。

圖11 不同產地舞花姜根提取物對ABTS自由基的清除能力和總皂苷含量關系Fig.11 Relationship between scavenging ability ofGlobba racemosa Smith roots extract from differenthabitats ABTS free radicaland total saponins content

2.5.3 DPPH自由基清除能力的測定 由圖12可知當舞花姜根提取液濃度在2.25～22.25 mg/mL之間時,DPPH自由基的清除率與舞花姜根提取液的質量濃度呈現正相關關系,當樣品濃度為22.25 mg/mL時,舞花姜根提取液對DPPH自由基的清除率為73.02%±1.59%。

圖12 舞花姜根提取物對DPPH自由基的清除能力Fig.12 The scavenging ability of Globba racemosa Smithroots extract on DPPH free radical

2.5.4 不同產地舞花姜根提取物對DPPH自由基清除能力的測定 由圖13可知,不同產地舞花姜根的總皂苷含量越高,相應的對DPPH自由基的清除能力越強,說明了舞花姜根提取物對DPPH自由基的清除能力與總皂苷的含量成正比關系。

圖13 不同產地舞花姜根提取物對DPPH自由基的清除能力和總皂苷含量關系Fig.13 Relationship between scavenging ability ofGlobba racemosa Smith roots extract from differenthabitats DPPH free radicaland total saponins content

2.6不同產地舞花姜根總皂苷含量測定

在最佳提取條件下,于550 nm波長處測定吸光度值,以相應的提取溶劑作為參比,測定13個不同產地,不同采摘期舞花姜根總皂苷含量,具體見表4。

從表4中可以看出,各產地樣品總皂苷含量在4.73～16.92 mg/g之間。來自三都縣和天柱縣的含量較高,尤其以三都縣的含量最高,達到16.92 mg/g,來自貴州荔波縣的含量最低,只有4.73 mg/g,可以從表中明顯地看出不同產地的樣品總皂苷含量存在較大差異。

3 結論

本研究結果表明,各單因素對舞花姜根總皂苷的含量影響最大的是料液比和樣品粒度,其次是超聲提取時間;交互影響中,樣品粒度和提取時間的交互作用較明顯;根據回歸方程得到最佳提取工藝為:超聲功率300 W、超聲提取時間51 min、樣品粒度40目、甲醇濃度100%、料液比1∶30 (g/mL)、提取2次。在此條件下,舞花姜根總皂苷含量可達10.88 mg/g,RSD為0.45%。所優化的提取條件穩定可靠,簡單快捷,可用于舞花姜根總皂苷含量的測定,這為舞花姜藥材的質量控制和深度開發與利用提供了一定的科學依據。

本實驗采用DPPH自由基清除能力和ABTS+·自由基清除能力并研究其抗氧化活性。結果可知,在一定范圍內,樣品的濃度與其抗氧化能力呈正相關,同時也比較了不同產地的舞花姜根總皂苷含量及總皂苷含量對DPPH自由基和ABTS+·自由基的清除能力,得出不同產地的樣品總皂苷含量存在較大差異且表現出不同程度的抗氧化活性,且抗氧化活性與舞花姜根中總皂苷含量成正比關系,驗證了其抗氧化能力與總皂苷含量有關。

[1]中國科學院中國植物志編輯委員會. 中國植物志[M].北京:科學出版社,1981,16(2):65-65.

[2]張秀實. 貴州植物志(第四卷)[M].成都:四川民族出版社,1989,696-697.

[3]喬春峰,徐璐珊,王崢濤. 舞花姜性狀及組織顯微鑒定[J].中藥材,2001,24(4):249-250.

[4]云南省藥材公司. 云南中藥資源名錄[M]. 北京:科學出版社,1993,660-660.

[5]喬春峰,徐璐珊,沈月毛,等. 舞花姜的化學成分[J]. 化學研究與應用,1999,11(5):575-576.

[6]何蘭,岳祥軍,陳耀祖,等. 木栓酮化學結構修飾及其抗炎活性[J].應用化學,1996,13(5):67-73.

[7]朱福鴻,張萃,魏鳳香,等.α-蒎烯藥理及應用研究概況[J]. 藥物化學,2015,3(3):23-28.

[8]李冬妹,伍成厚. 美花紅千層揮發油的化學成分分析[J]. 順德職業技術學院學報,2013,l1(3):16-18.

[9]姜冬梅,朱源,余江南,等.芳樟醇藥理作用及制劑研究進展[J].中國中藥雜志,2015,40(18):3530-3533.

[10]代澤琴,周鎂,黃秀平,等.寬葉纈草根揮發油中乙酸龍腦酯的含量測定[J].安徽農業科學,2013,41(16):7112-7113.

[11]陳萍,張吉波,王建剛,等.東北刺人參根揮發油的 GC-MS 分析[J].中藥材,2016,39(4):799-801.

[12]趙光遠,許艷華,陳美麗,等.石榴渣多酚提取及抗氧化活性研究[J].食品工業科技,2017,38(5):228-232.

[13]巫興東,趙超,周欣,等. 流蘇石斛多糖提取工藝及不同產地體外抗氧化活性研究[J].廣東農業科學,2014(21):97-101.

[14]陳源,楊道富,范麗華,等. 響應面法優化微波提取茂谷橘橙皮總黃酮工藝[J].中國食品學報,2013,13(4):80-86.

[15]黃雨洋,王振宇.紅松樹皮多酚的提取工藝及其抗氧化活性的研究[J].食品工業科技,2014,35(6):171-177.

[16]吳林秀,胡榮康,陳藝煊,等.竹蓀中多酚提取工藝優化及其抗氧化活性研究[J].食品工業科技,2017,38(7):203-207.

[17]Olamide E Adebiyi,Funsho O Olayemi,Tan Ning-Hua,et al.Invitroantioxidant activity total phenolic and flavonoid contents of ethanol extract of stem and leaf of Grewia carpinifolia[J].Beni-Suef University Journal of Basic and Applied Sciences,2017,6(1):10-14.

[18]Yongjun Kan,Tiqiang Chen,Yanbin Wub,et al.Antioxidant activity of polysaccharide extracted from Ganoderma lucidum using response surface methodology[J].International Journal of Biological Macromolecules,2015,72:151-157.

[19]李鉉軍,崔勝云. 抗壞血酸清除DPPH自由基的作用機理[J].食品科學,2011,32(1):86-90.