非小細胞肺癌胸腔積液細胞塊與組織學ALK檢測的效果對比

徐東來

（撫順礦務局總醫院病理科，遼寧 撫順 113008）

當前，我國對于肺癌的治療方法多樣并日漸成熟，在臨床的應用實踐中，多針對絡氨酸激酶抑制劑和淋巴瘤激酶進行組合的基因檢測[1]，其檢測的類型多樣，有各類的組織學樣本，脫落的細胞和血液的清樣等。同時，很多患者在年齡、身體狀態等方面存在著一定的不同，其樣本存在諸多差異，對于肺癌的個體化檢測來說無法較好的保證樣本的可靠性。當前細胞蠟塊的技術研究數量較多，很多的報道中明確提出，可以將細胞蠟塊應用在分子的檢測之中，但是具體的醫院實踐治療很少有相關的案例。本文對脫落細胞形成的細胞塊在肺癌患者中和熒光的原位進行雜交檢測，現將相關的應用價值報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇本院病理科從2017年1月至2017年12月經過病理組織學診斷患有非小細胞腺癌患者或者同時體內的細胞快被診斷成為癌癥或者疑惑癌癥的患者共計100例。根據細胞樣本的來源不同，主要為胸腔積液。另外，組織塊的樣本具體包括經過胸膜的活體檢驗和手術檢驗等，將組織學的診斷結果作為金標準，分析其中的疾病組成，其中100例患者中鱗癌患者18例，肺腺癌患者79例，其他肺癌類型的患者3例。100例患者中，男性54例，女性46例，年齡為42～46歲，中位年齡為44歲。

1.2 檢測方法

1.2.1 細胞塊制備：將新鮮的胸腔積液放置在4 ℃的冰箱中靜置處理，并收集底部的沉淀液，將其放置在離心管中，轉速為2500 r/min。進行離心處理3 min，后加入10 mL福爾馬林，以同樣的離心處理方式得到棄掉上清液，最后放入95%的乙醇進行處理，處理之后棄掉上清液。將以上的沉淀物質放置在擦鏡紙上，收集患者體內的常規組織，并進行脫水處理，最終制成石蠟塊。

1.2.2 IHC方法：其中的免疫組化ALK抗體從北京的中杉公司，其中的試劑盒選擇福州的邁新制藥有限公司，進行DAB染色處理。

1.3 結果判定：5%的腫瘤細胞呈現顆粒狀的分布，其中強著色被判定為（+++），超過5%的腫瘤細胞呈現中度細胞質著色現象（+-+），超過5%的腫瘤著色現象向相對較為微弱，細胞無顯著的著色現象，臨床判定為ALK IGC（0）。

2 結 果

在被測試的所有樣本中，其中（+++）和（++），（+）的共計28例，陽性率為28.00%。細胞塊測試后免疫結果顯示為（+-+）和（++）還有（+）的患者共計13例，陽性率為13.00%。以上兩組的組織塊和融合基因在熒光位置上的雜交結果均呈現陽性特點，其與免疫組化的結果明顯相同。

3 討 論

國外的研究中，在2號染色體的斷臂位置形成了動物的微管相關性蛋白，其與簡便性的淋巴瘤激酶等構成融合基因，其研究已經成為了醫學界的重大突破。IHC是進行ALK蛋白表達檢驗的一種較為可靠的方法[3]，國外的研究中明確指出ALK D5F3中敏感度超強，已經達到了98%的特異性，其各種斷裂方式和拷貝數量等已經成為了當前靶向治療嚴重性的重要依據，但是使用ALK D5F3方式需要相對較高的成本，對患者的收費相對較高，并不適用于臨床的廣泛推廣，當前階段，對于疾病的診斷多是使用IHC進行預審核篩選，其中的陽性患者在進行FISH的檢驗。在本次調查研究中（+++）和（++），（+）的FISH的結果均為陽性，在細胞蠟塊中，固定單個細胞的過程中會盡可能的保持抗原原有的活性，同時，細胞中蠟塊中的惡性腫瘤成分經過集聚之后，其內容和類型較為單一，直接為FISH和IHC等提供了一定的抗原標本。

綜上所述，對于惡性腫瘤來說，其原發灶和轉移灶之間存在著相對較大的差異，原發灶細胞的基因狀態和體液脫落細胞的基因狀態之間存在一定的異質性，但是經過腫瘤的基因檢測發現，其陽性率顯著低于組織學的樣本，最終的結果較為可信。對于晚期的非小細胞肺癌的患者來說，已經成為了一種較為可靠地檢測方式。傳統的細胞保留方式不夠成熟，無法長期有效的保存處理，伴隨著細胞蠟塊技術的發明，已經解決了細胞的長期保留難題，并能夠通過重復的切塊，最終為整體的實驗創造了較好的條件，很多無法獲取組織學樣本的中晚期肺癌患者可以進行全面有效的肺癌分子檢測，該種方式具有較強的臨床價值。