血清高遷移率族蛋白B1水平與老年2型糖尿病腎病的相關性

蘇 靜 陳 琰 王愛平 石 雪 鄭雪菲 王彥君

(吉林大學第二醫院內分泌科，吉林 長春 130041)

糖尿病相關并發癥糖尿病腎病(DN)是導致終末期腎臟疾病(ESCD)的最常見原因，約占我國ESCD患者發病原因的16.4%〔1〕。研究表明，高血糖引起的炎癥過程和代謝異常是導致DN的關鍵，也是促使DN發展為ESCD的主要驅動力〔2〕。炎性反應通路在DN的發展過程中起較為重要的作用，其中白細胞介素(IL)-1、IL-6、IL-18和腫瘤壞死因子(TNF)等是參與其發病的主要炎性因子〔3〕。而高遷移率族蛋白(HMG)B1作為一種非組蛋白染色體結合蛋白，參與多種生物過程，包括轉錄、DNA修復、分化和發育〔4〕，并且在各種腎臟疾病的發生發展中起重要作用。本研究旨在探討HMGB1在DN發生發展中的作用。

1 資料與方法

1.1研究對象 收集2016年2～12月就診于吉林大學第二醫院內分泌科門診年齡≥60歲的2型糖尿病(T2DM)患者或住院患者100例，分為單純T2DM組和DN組各50例，T2DM組男30例，女20例，平均年齡(61.28±0.86)歲，體質指數(BMI)(22.46±3.04)kg/m2；DN組男27例，女23例，平均年齡(72.68±7.58)歲，BMI(21.98±3.49)kg/m2。同期在醫院進行健康體檢的無糖尿病家族史的健康者50例為對照組，男25例，女25例，平均年齡(63.48±2.66)歲，BMI(22.00±2.37)kg/m2。均簽署知情同意書。3組一般資料比較無統計學差異(P>0.05)，具有可比性。納入標準：(1)符合1999年世界衛生組織(WHO)制定的T2DM診斷標準〔空腹血糖(FPG)≥7.0 mmol/L和(或)餐后2 h血糖≥11.1 mmol/L〕及分型標準；(2)無DN診斷依據〔24 h尿白蛋白定量(24 h UPQ)<30 mg，肌酐<104 μmol/L，無腎小球濾過率(eGFR)降低等〕和糖尿病其他并發癥。排除標準：①其他類型糖尿病；②合并嚴重感染；③嚴重心功能不全；④合并糖尿病急性并發癥；⑤1個月內服用腎毒性藥物；⑥合并泌尿系統疾病。

收集所有入選的T2DM患者完整的臨床病例資料，包括年齡、性別、身高、體重，BMI=體重(kg)/身高(m2)，eGFR(男)=186×血肌酐-1.154×年齡-0.203×1.233，eGFR(女)=186×血肌酐-1.154×年齡-0.203×1.233×0.742)。

1.2研究方法 入組患者夜間禁食至少8～10 h后于次日清晨采集空腹靜脈血，常溫靜置2 h后，3 000 r/min 離心10 min，分離上層血清，然后采用全自動生化分析儀檢測FPG、糖化血紅蛋白(HbA1c)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平，采用酶聯免疫吸附(ELISA)法檢測血清中HMGB1、IL-6、TNF-α的濃度，ELISA試劑盒購自美國Sigma-Aldrich公司。

1.3統計學方法 應用SPSS17.0軟件進行方差分析、t檢驗。

2 結 果

3組HDL-C、LDL-C水平無明顯差異(P>0.05)。與對照組相比，T2DM組與DN組FPG、HbA1c、TG、TC、eGFR、HMGB1、IL-6、TNF-α水平差異均有統計學意義(P<0.01)。T2DM組與DN組FPG、HbA1c、TG、TC水平無明顯差異(P>0.05)；eGFR、HMGB1、IL-6、TNF-α水平差異有統計學意義(P<0.01)。見表1。

表1 3組一般資料比較

與對照組比較：1)P<0.01；與T2DM組比較：2)P<0.01

3 討 論

HMGB1為一種晚期炎癥因子，通常存在于真核細胞的細胞核中，但當機體受到感染和損傷時，體內多種炎性細胞活化并主動分泌HMGB1至細胞外，壞死細胞被動釋放HMGB1至細胞外，可作為有效的促炎細胞因子通過與多種細胞表面受體，包括晚期糖基化終末產物受體(RAGE)和toll樣受體(TLRs)如TLR2、TLR4或TLR9結合發揮作用，參與炎癥的發生、發展的過程。隨著DN的進展，腎小球和腎小管上皮細胞核中的HMGB1分泌至細胞外液。本研究進一步證實HMGB1在DN的發生發展中起重要作用。

IL-6作為一種重要的免疫調節因子，能夠激活細胞表面的信號組件。DN患者腎組織活檢的結果首次證實IL-6 mRNA存在于腎小球和腎間質中，同時其在血清和尿液中的水平也被證實，本研究結果與之相符。即便血清和尿中的IL-6是DN患者的候選檢測指標，但是無論有沒有DN，IL-6都與身體脂肪含量和胰島素抵抗高度相關。因此，檢測腎小管標志物和尿中炎性因子排泄水平可以直接反映DN患者腎臟內部炎癥情況。

TNF是一種主要由單核細胞和巨噬細胞分泌的多功能促炎細胞因子，在脂質代謝、凝血和內皮生物學等方面發揮一定作用。TNF在類風濕關節炎的發病機制中起關鍵作用，抗TNF治療在抑制由CD4+CD25-T細胞產生的促炎細胞因子方面具有顯著的治療作用。此外，TNF也產生于脂肪細胞和巨噬細胞中，并且與炎癥和肥胖引起的胰島素抵抗密切相關。在鏈脲佐菌素(STZ)誘導的大鼠糖尿病模型中，可檢測到TNF在尿液和腎臟組織中表達增加，并且注射英利昔單抗(infliximab)通過抑制TNF的活性，可以減少尿白蛋白的排泄。在人類中，已經證明了血清TNF水平升高和腎組織的結構變化有關〔4，5〕。總之，抗炎性因子治療有助于延緩DN的進展，但其療效有待進一步研究。

1Lin ZH.Nephrology in China〔J〕.Nat Rev Nephrol，2013；9(9)：523-8.

2Cooper ME.Diabetes：treating diabetic nephropathy-still an unresolved issue〔J〕.Nat Rev Endocrinol，2012；8(9)：515-6.

3Muthuppalaniappan VM.Diabetic nephropathy〔J〕.Medicine，2015；43(9)：520-5.

4Navarro-Gonzalez JF，Mora-Fernandez C，de Fuentes M，etal.I-nflammatory molecules and pathways in the pathogenesis of diabetic nephropathy〔J〕.Nat Rev Nephrol，2011；7(6):327-40.

5Tang DL，Kang R，Livesey KM，etal.High-mobility group box 1 is essential for mitochondrial quality control〔J〕.Cell Metabol，2011；6(13)：701-11.