微生物學檢驗材料采集、保存和運送

賈北寧（遼寧省葫蘆島市南票區畜產品安全監察所 125027）

1 采集

1.1 病料采集的注意事項

病料應該新鮮，有代表性，有一定的數量。從雞的尸體上取材料時，夏天不應遲于6～8h，冬季不應遲于12～24h。

為了進行病原體的分離，病料應盡可能減少污染。因此，在尸體剖檢前，應將尸體浸泡在適宜消毒劑溶液中，既作了皮膚和羽毛的消毒又減少在剖檢時羽毛和皮屑飛揚對病料的污染。

要求在剖開腹腔后，首先取微生物檢查材料，減少病料在空氣中暴露的時間，避免在進行病理學檢查時污染病料。

采集病料要求無菌，所用的器械和容器必須事先滅菌，盡可能以無菌操作采集病料。

病料采集后，如不能立刻進行檢驗，應立即存放在冰箱中。

進行病原微生物檢驗時，應根據疾病的性質不同而采集不同的病料。

1.2 病料的采集方法

1.2.1 組織和實質臟器的采集方法

病料要用無菌操作的方法從新鮮的尸體采集，為避免污染，剖開腹腔后，注意不要損壞腸道。如有細菌分離培養條件，首先以燒紅的鐵片燙烙臟器表面，用接種環（火焰滅菌）自燙烙的部位插入組織中緩緩轉動接種環，取少量組織或液體，作涂片鏡檢或接種在培養基上。培養基可根據不同情況而進行選擇。一般常用鮮血瓊脂平板、普通瓊脂平板、營養肉湯或皰肉培養基，必要時，還用其他特殊培養基。

1.2.2 液體材料的采集方法

血液、膽汁、滲出液和濃汁等，可用滅菌吸管、毛細吸管或注射器經燙烙部位插入，吸取內部液體材料，然后將材料注入滅菌的試管中，塞好棉塞送檢。也可用接種環經消毒的部位插入，提取病料直接接種在培養基上。

1.3 全血的采集方法

全血是指加抗凝劑的血液。用無菌操作，從雞的心臟采血，盛入試管中。根據欲采的血量，在試管中加入適量的抗凝劑（3.8～4%的枸櫞酸鈉0.1ml，可抗1ml血液。也可以在5ml血中加入20%枸櫞酸鈉2～3滴）。

1.4 血清的采集方法

用無菌操作從雞的心臟采血數毫升（一定不要加抗凝劑），放在滅菌的試管中，擺成斜面，待血液凝固，析出血清后，再將血清吸出，置于另一滅菌試管中。

1.5 腸道及腸內容物采集方法

腸道只需要選擇病變最明顯的部分，將其中的內容物取掉，用滅菌水輕輕沖洗，然后放入盛有滅菌的30%甘油鹽水緩沖保存液瓶中送檢。也可將腸管剪開，除去內容物，用燒紅的鐵片輕輕燙烙黏膜表面，將接種環插入黏膜層，取少量材料接種在培養基上。

燒烙腸道表面，用吸管扎穿腸壁，從腸腔內吸取內容物，放入試管中，或者將帶有糞便的腸管兩端結扎，從兩端剪斷送檢。

1.6 皮膚及羽毛的采集方法

皮膚病料要選擇病變最明顯的邊緣部分，采取少許放于滅菌容器中送檢。羽毛也要在病變明顯部分采集，用刀將羽毛及其根部皮屑刮取少許放入滅菌容器中送檢。

1.7 胚胎樣品

選取完整、無腐敗的胚胎送檢。

2 病料運送

涂片要求涂薄而均勻，自然干燥后，為了防止玻片互相磨蹭，玻片之間墊以火柴棍把最上面的一張翻過來，使涂面向下，用小線扎好，最后用紙包好，送檢。

裝在試管和廣口瓶中的病料應密封后裝在冰筒中運送，防止試管和容器翻倒。

運送整個雞的尸體，用浸透適宜消毒液的布包好，裝入塑料袋中。

送檢材料應附說明，包括以下內容：送檢單位，畜主的姓名和畜禽場的地址，畜禽飼養的品種及其數量，被感染的畜禽種類，首發和繼發病例的日期及造成的損失；出現臨床癥狀的畜禽數量、死亡畜禽數量及其年齡，臨床癥狀及其持續時間，死亡情況和時間，基本病理變化，免疫和用用藥情況等；送檢樣品清單和說明，包括病料的種類和數量、保存方法、要求做何種檢測，送檢者的姓名、地址、郵編和電話，送檢日期等。