夏春芳,高 亮,魏 斌,田 甜
(1.伊犁職業(yè)技術學院,新疆伊寧 835000;2.伊犁州動物衛(wèi)生監(jiān)督所,新疆伊寧 835000)
弓形蟲病是由剛地弓形蟲引起的一種人獸共患寄生蟲病。弓形蟲的生活史可以分為腸內(nèi)階段和腸外階段,腸內(nèi)階段只出現(xiàn)于終末宿主體內(nèi),腸外階段可出現(xiàn)于終末宿主和中間宿主體內(nèi)。目前,其終末宿主已證明的有貓及一些野生貓科動物,而其中間宿主種類很多,已報道的有200多種,包括人、犬以及其他哺乳動物和鳥類[1-2]。弓形蟲病可使孕畜流產(chǎn)死胎,人感染后可侵害其神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、心臟、淋巴內(nèi)皮系統(tǒng)等多種器官或系統(tǒng),并造成損傷,甚至造成死亡。孕婦感染后可引起流產(chǎn),胎兒畸形或產(chǎn)出弱智兒。有報道表明,有犬貓接觸史的孕婦弓形蟲感染率明顯高于無犬貓接觸史的孕婦[3]。隨著伊寧市經(jīng)濟快速發(fā)展和人們生活水平不斷提高,寵物犬貓以及流浪犬貓的數(shù)量激增,與寵物相關的人畜共患傳染病越來越受到人們的重視,前來寵物醫(yī)院咨詢以及給犬貓做相關疾病檢測的主人絡繹不絕。為探明伊寧市寵物犬貓及流浪犬貓剛地弓形蟲的感染情況,為伊寧市弓形蟲的防控提供參考依據(jù),筆者于2016年對伊寧市3家寵物醫(yī)院收治病例及某流浪動物收容所隨機抽取的440份犬、貓血清樣品進行檢測,現(xiàn)將檢測結果報道如下。
1.1血清在伊寧市3家寵物醫(yī)院收治病例中隨機抽取犬貓血清樣本240份,其中寵物犬血清樣本200份,每季度抽取50份,4個季度4個不同年齡段各50份;寵物貓血清樣本20份,散養(yǎng)貓血清樣本20份;在伊寧市某流浪動物收容所隨機抽取流浪犬血清樣本200份,每季度抽取50份新接收的流浪犬(表1)。
表1伊寧市犬貓弓形蟲病流行病學調(diào)查血清樣品采集情況
Table1SerumsamplecollectionoftoxoplasmosisofdogsandcatsinYiningCityforepidemiologicalinvestigation

診療機構Medicalinstitutions寵物犬Petdog寵物貓Petcat流浪犬Straydog散養(yǎng)貓Free-rangecat小計Subtotal寵物醫(yī)院APethospitalA6850679寵物醫(yī)院BPethospitalB102807117寵物醫(yī)院CPethospitalC3070744流浪動物收容所Thestrayanimalshelter002000200合計(平均)Total(Mean)2002020020440
1.2試劑動物弓形蟲IgG抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗),珠海經(jīng)濟特區(qū)海泰生物制藥有限公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號:20150506;弓形蟲抗體快速診斷試紙(免疫色譜分析法),韓國安捷公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號:2206DD006。
1.3儀器小型高速冷凍離心機(Beckman Allegra 64),酶標儀(318MC型),電熱恒溫培養(yǎng)箱(DHP-9272B)。以上儀器設備均由伊犁職業(yè)技術學院動物科學系動物疫病檢測中心實驗室提供。
1.4方法使用普通真空采血管于待檢動物前臂頭靜脈或后肢陰靜脈無菌采血1~3 mL,分離血清,-20 ℃保存?zhèn)溆谩?檢測分別按照珠海海泰生物制藥有限公司和韓國安捷公司提供的生產(chǎn)說明書進行操作。
1.5數(shù)據(jù)分析所有數(shù)據(jù)應用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行分析。
2.1不同生活狀態(tài)犬貓弓形蟲酶聯(lián)免疫吸附試驗通過對3家寵物醫(yī)院收治病例的240份犬貓血清樣本及流浪動物收容所采集的200份犬血清樣本進行弓形蟲IgG抗體檢測(酶聯(lián)免疫吸附試驗),440份血清樣本中,陽性數(shù)89例,陽性率20.23%,寵物犬、流浪犬、寵物貓、散養(yǎng)貓陽性率分別為15.50%、24.00%、10.00%、40.00%(表2)。通過配對資料卡方檢驗分析顯示,寵物犬組與流浪犬組之間差異顯著(P<0.05),寵物貓組與散養(yǎng)貓組之間差異顯著(P<0.05),寵物犬組與寵物貓組、流浪犬組與散養(yǎng)貓組之間差異均不顯著(P>0.05)。
表2不同生活狀態(tài)犬貓弓形蟲酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測結果
Table2Theenzyme-linkedimmunosorbentassayresultsoftoxoplasmosisofdogsandcatsindifferentlifestatus

生活狀態(tài)Stateoflife數(shù)量Quantity陽性數(shù)Positivenumber陰性數(shù)Negativenumber陽性率Positiverate∥%寵物犬Petdog2003116915.50流浪犬Straydog2004815224.00寵物貓Petcat2021810.00散養(yǎng)貓Free-rangecat2081240.00合計(平均)Total(Mean)4408935120.23
2.2不同季度犬弓形蟲酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測結果400份犬血清樣本中,每季度抽取樣本各100份(寵物犬與流浪犬各50份),對弓形蟲IgG抗體檢測(酶聯(lián)免疫吸附試驗)結果按季度統(tǒng)計分析得出,第一季度、第二季度、第三季度、第四季度的陽性率分別為14.00%、27.00%、20.00%、18.00%(表3),再通過配對資料卡方檢驗分析顯示,陽性率最低的第一季度與陽性率最高的第二季度差異顯著(P<0.05),其余各組之間差異均不顯著(P>0.05)。

表3 不同季度犬弓形蟲酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測結果
2.3不同年齡段寵物犬弓形蟲酶聯(lián)免疫吸附試驗對200份寵物犬血清樣本的弓形蟲酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測結果按4個不同的年齡段分組進行統(tǒng)計分析得出,隨著年齡增長,陽性率呈逐步升高趨勢,<1歲組、1~3歲組、3~6歲組、>6歲組的陽性率分別為8.00%、10.00%、16.00%、28.00%(表4),再通過配對資料卡方檢驗分析顯示,陽性率最低的<1歲組與陽性率最高的>6歲組之間差異極顯著(P<0.01),1~3歲組與>6歲組之間差異顯著(P<0.05),其余各組之間差異均不顯著(P>0.05)。
表4不同年齡段寵物犬弓形蟲酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測結果
Table4Theenzyme-linkedimmunosorbentassayresultsoftoxoplasmosisofpetdogindifferentagegroups

年齡段Agegroups數(shù)量Quantity陽性數(shù)Positivenumber陰性數(shù)Negativenumber陽性率Positiverate∥%<1歲Lessthan1yearold504468.001~3歲1-3yearsold5054510.003~6歲3-6yearsold5084216.00>6歲Morethan6yearsold50143628.00合計(平均)Total(Mean)2003116915.50
2.4不同檢測方法檢測結果對比對440份犬貓血清樣品進行弓形蟲IgG抗體檢測(酶聯(lián)免疫吸附試驗)的同時,采用目前伊寧市寵物診療機構普遍使用的弓形蟲抗體快速診斷試紙(免疫色譜分析法)進行同步檢測,快速診斷試紙檢出陽性為93例,陽性率21.14%(表5),但通過配對資料卡方檢驗分析顯示,2種檢測方法之間差異性不顯著(P>0.05)。

表5 不同檢測方法檢測結果
(1)通過此次調(diào)查發(fā)現(xiàn),伊寧市犬貓弓形蟲抗體陽性率處于較高水平,440份血清樣品中陽性89例,陽性率高達20.23%,明顯高于張紅超等[4]、鄧波等[5]、謝桂萍等[6]、鄭世英等[7]的相關報道,而與馬依蘭·阿布來提等[8]的報道相近。出現(xiàn)這種情況的原因,一是與新疆獨特的地理因素和氣候環(huán)境有關,二是與飼主科學飼養(yǎng)的觀念意識及犬貓的生活狀態(tài)有關,通過對陽性犬貓的飼主走訪調(diào)查了解到,高達20%走訪飼主認為犬應該吃生肉,大多數(shù)飼主對犬貓的科學飼養(yǎng)常識知之甚少,對犬貓等人畜共患病的認識欠缺,這一點尤其值得相關部門重視。
(2)犬貓弓形蟲感染與其生活狀態(tài)及流動性密切相關,流浪犬、散養(yǎng)貓的陽性率顯著高于寵物犬和寵物貓(P<0.05),這與盧愛桃等[9]、禹海杰等[10]的報道一致。伊犁作為一個牧業(yè)地區(qū),流浪動物與各種家畜接觸機會更多,為弓形蟲的傳播提供了便利,家畜中,豬弓形蟲病例較多,牛、羊和馬對弓形蟲易感而不易發(fā)病,后三者是弓形蟲在動物和人間傳播的重要儲存庫[11]。而寵物犬貓一般生活在樓內(nèi),飲食及環(huán)境相對衛(wèi)生,空間封閉,感染率相對較低。由此可見,相關部門非常有必要制定相關制度,加強寵物市場管理,控制流浪動物數(shù)量。
(3)調(diào)查顯示,隨著犬貓年齡增長,弓形蟲IgG抗體陽性率越高,陽性率最低的<1歲組與陽性率最高的>6歲組之間差異極顯著(P<0.01),1~3歲組與>6歲組之間差異顯著(P<0.05)。這是由于動物體一旦產(chǎn)生弓形蟲IgG抗體之后,可以終生存在于其體內(nèi),另一方面也驗證了隨著動物年齡增長,感染弓形蟲的概率提高這一結論[12]。在季節(jié)性因素方面,第二季度的陽性率最高,與陽性率最低的第一季度度差異顯著(P<0.05),這與鄧波等[5]的報道不符,可能與新疆獨特的地理環(huán)境有關,新疆冬季較長,積雪覆蓋,動物外出機會及外出停留時間短,而第二、第三季度氣候宜人,遛狗頻率和遛狗時間都有所增加。
(4)2種檢測方法的檢測結果并無明顯差異,酶聯(lián)免疫吸附試驗雖然具有特異性和敏感性較好,易于定量,結果客觀等優(yōu)點[5],但是需要更多的儀器設備,不能滿足寵物診療市場尤其是西部欠發(fā)達地區(qū)市場對價格低廉、操作簡單、快捷方便的需求。目前伊寧市多數(shù)寵物診療機構選擇使用的弓形蟲抗體快速診斷試紙(免疫色譜分析法)更適合寵物診療機構作為臨床檢驗使用。
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