食品微生物檢驗中兩種均質(zhì)方法的比較

□ 邱樂波 連云港市質(zhì)量技術(shù)綜合檢驗檢測中心

樣品均質(zhì)是對食品微生物進(jìn)行檢驗過程中的一項重要步驟，與微生物檢出率及檢驗準(zhǔn)確性息息相關(guān)[1]。

1 資料與方法

1.1 菌種

本次研究會使用金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌與黑曲霉三種菌種。

1.2 儀器

本次研究會使用旋刀式均質(zhì)器與拍擊式均質(zhì)器兩種儀器。

1.3 培養(yǎng)基

本次研究會使用瓊脂培養(yǎng)基、瓊脂平板、7.5%氯化鈉肉湯及孟加拉紅培養(yǎng)基四種培養(yǎng)基。

1.4 方法

1.4.1 準(zhǔn)備菌液

本次研究會準(zhǔn)備金黃色葡萄球菌與大腸埃希菌混懸液與黑曲霉菌孢子懸液，測定全部菌液實際濃度并保證各菌液中菌數(shù)含量在50～100 CFU/mL。

1.4.2 制備供試液

1.4.2.1 旋刀式均質(zhì)方法

于無菌條件下以相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)利用無菌秤或無菌刻度吸管將固體樣本25g或液體樣本25mL各取出三份，并將樣本分別放入盛有7.5%氯化鈉肉湯、225mL生理鹽水與水的勻漿杯中，通過對均質(zhì)進(jìn)行旋轉(zhuǎn)后得到1∶10比例的樣品菌液，并對金黃色葡萄球菌、霉菌菌落數(shù)進(jìn)行測定，計算出菌落總數(shù)。操作過程中將旋刀式均質(zhì)器的速度保持在每分鐘8000～10000轉(zhuǎn)，并以樣品實際形態(tài)為依據(jù)設(shè)定旋轉(zhuǎn)時間，以1～5min為宜。利用無菌刻度吸管將三種樣品勻液分別取出1mL，再采取沿管壁緩慢注入的方式將其分別注入盛有7.5%氯化鈉肉湯、9mL生理鹽水與水的無菌試管中，充分搖晃混勻后得到1∶1000比例的稀釋液。

1.4.2.2 拍擊式均質(zhì)方法

于無菌條件下以相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)利用無菌秤或無菌刻度吸管將固體樣本25g或液體樣本25mL各取出三份，將樣本分別放入盛有7.5%氯化鈉肉湯、225mL生理鹽水與水的均質(zhì)袋中，以實際檢測需要為依據(jù)調(diào)節(jié)拍擊式均質(zhì)器的拍擊頻率、拍擊間隙與拍擊時間，以1～10 min為宜，并通過制作得出1∶10比例的樣品勻液，對金黃色葡萄球菌、霉菌菌落術(shù)進(jìn)行測定，計算出菌落總數(shù)。利用無菌刻度吸管將三種樣品勻液分別取出1mL，再采取沿管壁緩慢注入的方式將其分別注入盛有7.5%氯化鈉肉湯、9mL生理鹽水與水的無菌試管中，充分搖晃混勻后得到1∶1000比例的稀釋液。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析方法

以結(jié)果P＜0.05定義為有顯著性差異，用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示計量資料并行t檢驗，用%表示計數(shù)資料并行X2檢驗，所有數(shù)據(jù)皆經(jīng)SPSS19.0軟件進(jìn)行處理。

2 結(jié)果

本次研究共利用兩種均質(zhì)方法測定了5批質(zhì)地、類型與特點各不相同的食品樣品，旋刀式均質(zhì)方法所檢測出的金黃色葡萄球菌、霉菌與菌落總數(shù)分別如下。樣品1：金黃色葡萄球菌＜10、霉菌＜10、菌落總數(shù)45。樣品2：金黃色葡萄球菌＜10、霉菌25、菌落總數(shù)70。樣品3：金黃色葡萄球菌＜10、霉菌40、菌落總數(shù)50。樣品4：金黃色葡萄球菌30、霉菌＜10、菌落總數(shù)＜10。樣品5：金黃色葡萄球菌＜10、霉菌＜10、菌落總數(shù)10。拍擊式均質(zhì)方法所檢測出的金黃色葡萄球菌、霉菌與菌落總數(shù)分別如下。樣品1：金黃色葡萄球菌＜10、霉菌＜10、菌落總數(shù)40。樣品2：金黃色葡萄球菌＜10、霉菌30、菌落總數(shù)65。樣品3：金黃色葡萄球菌＜10、霉菌45、菌落總數(shù)45。樣品4：金黃色葡萄球菌35、霉菌＜10、菌落總數(shù)＜10。樣品5：黃色葡萄球菌＜10、霉菌＜10、菌落總數(shù)＜10。經(jīng)對比后發(fā)現(xiàn)，與旋刀式均質(zhì)方法相比，拍擊式均質(zhì)方法對霉菌項目的檢驗效果更好；與拍擊式均質(zhì)方法相比，旋刀式均質(zhì)方法對金黃色葡萄球菌與菌落總數(shù)的檢驗效果更好，相關(guān)數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析后所得結(jié)果均表示其具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

旋刀式均質(zhì)方法與拍擊式均質(zhì)方法是目前對食品微生物進(jìn)行檢驗的主要方式。其中旋刀式均質(zhì)方法是在無菌均質(zhì)杯中加入一定量檢測樣品與稀釋液，并在一定時間采用一定轉(zhuǎn)速均質(zhì)樣品，從而獲得樣品勻液；拍擊式均質(zhì)則為在無菌均質(zhì)袋中加入一定量檢測樣品與稀釋液，并在一定時間內(nèi)利用拍擊式均質(zhì)器對其進(jìn)行拍打，從而獲得樣品勻液。

本次研究結(jié)果表明，兩種均質(zhì)方法應(yīng)用于食品微生物檢驗過程中，其檢驗結(jié)果存在一定差異（P＜0.05），與張秀琴的研究結(jié)果（食品微生物檢驗中兩種均質(zhì)的效果分析）[2]相符，說明在日常對食品微生物的檢測工作當(dāng)中需依據(jù)待檢食品的質(zhì)地與品種來對均質(zhì)儀器進(jìn)行合理選擇，以有效避免食品中微生物在檢測過程中發(fā)生變化，對檢驗準(zhǔn)確度產(chǎn)生影響。

綜上所述，需根據(jù)被檢測食品的具體質(zhì)地、類型與特點選取合適的均質(zhì)檢驗方式，以有效提升食品微生物的檢驗準(zhǔn)確性。