包蟲病診斷與預防疫苗研究發展

趙霞

（青海省河南縣托葉瑪鄉農牧業技術服務站 811599）

1 包蟲病的診斷技術

包蟲病主要發生在我國西部地區，是影響放牧區農牧人畜的主要疾病，嚴重阻礙了當地畜牧業的發展。包蟲病在感染初期很難被診斷，一旦發現并采取治療時，就已經進入患病后期。包蟲病的中間宿主主要是牛羊等動物，對這些中間宿主進行免疫診斷時，可以采取酶聯免疫吸附實驗，將囊液和粗提原頭節蛋白作為抗原進行檢測，其中粗提原頭節蛋白對檢測的特異性很強，較為敏感。抗原B是由包蟲幼蟲原頭節和包囊合成和分泌的一種高豐富蛋白。這種蛋白免疫原性很強，對包蟲病的識別能力很強，大多數患病者都能被識別，可以有效對疾病宿主的免疫應答反應進行調節。棘球蚴病抗原B在對棘球蚴病進行差異表達的不同發育階段中，具有十個以上的單一基因。根據對不同國家采集到的病理材料進行對比，發現其在棘球蚴病幼蟲以及成蟲階段的每一個基因幾乎都是完全一致的，對比其DNA序列可以看到，棘球蚴病的發育階段是高度保守區。但棘球蚴病抗原B具有顯著的多態性和變異性，對差異PCR的結果進行分析表明，這些基因對于棘球蚴病不同階段的表達是不一樣的，存在一定差異，其中抗原B3可以表達棘球蚴病的所有生活階段。免疫PCR是檢測抗原的一種系統，通過PCR可以將已知DNA片段進行擴增，災后采取常規的檢測方式對PCR產物進行檢測，通常在抗原抗體的復合物上進行DNA片段的標記。PCR檢測法比傳統的酶聯免疫吸附試驗和酶免疫法具有更高的靈敏度。Im-muno-PCR對于一抗和二抗的識別具有極高的靈敏度，多應用于對微量抗原的檢測，對包蟲病的診斷過程中也可對此技術進行借鑒[1]，能有效提升特異性及靈敏程度。

2 包蟲病預防疫苗研究進展

2.1 中間宿主疫苗

中間宿主疫苗有六鉤蚴抗原疫苗及重組蛋白EG95疫苗。六鉤蚴是一種蟲卵，由細粒棘球絳蟲成蟲產生，由于六鉤蚴表面具有特殊的蛋白，能與特異性抗體進行結合，因此，采用六鉤蚴的分泌物或者天然抗原可有效保護羊的棘球蚴病感染問題，其免疫程度高達99%。重組蛋白EG95包含6個轉錄成分，目前已經有研究者對重組EG95蛋白成功克隆和表達。雖然棘球蚴成蟲等蟲體在各個階段具有不同的基因組表達，但重組EG95蛋白能在這些階段中全部表達，說明重組EG95具有很高的生物活性。在中間宿主羊的體內，重組EG95蛋白能引起免疫應答，對包蟲病進行有效的抵抗，并且此種蛋白在中間宿主羊的體內還能有效抑制棘球蚴蟲體的發育。通過新西蘭及澳大利亞進行的實驗數據表明，選用重組EG95蛋白對羊進行免疫保護，可以大大提升羊抗包蟲病的能力，起保護率高于96%，并且在實驗一年后再對羊體內的抗體進行檢測，其保護率依舊在86%以上，說明重組EG95對感染棘球蚴病具有很高的免疫保護作用。

2.2 終末宿主疫苗

在實際生活中，包蟲病的中間宿主要顯著多于終末宿主，比如在同一牧場中，羊數量是犬類的幾十倍甚至上百倍，而且通過對犬類感染棘球蚴病的實驗結果來看，年齡低的犬類比年齡高的犬類身體中棘球蚴成蟲數量要多，表明犬類具有抵抗棘球蚴病的能力，因此，對終末宿主進行免疫，控制包蟲病的病情。

目前主要有蟲體粗抗原疫苗、重組蛋白疫苗等。早期棘球絳蟲的疫苗主要是利用天然的蟲體蛋白作為抗原，采用棘球蚴的原頭節及其他蟲體蛋白對犬類進行免疫處理，發現這些蛋白能有效減少犬類體內的棘球蚴蟲體數量，并且具有抑制蟲體生長的作用。另外采用動感凍干的原頭節或滅活原頭節對犬類進行免疫，也可以有效抑制犬類體內蟲體的生長，減少棘球蚴蟲體的數量。通過PCR技術從棘球蚴蟲體中分離出表達序列，并獲得重組蛋白，將這種蛋白對犬類進行免疫也能抑制蟲體的生長，并且還能影響到蟲卵及胚胎的發育情況，具有很高的保護率。由于包蟲病的流行范圍較廣，想要徹底解決包蟲病的傳播問題還比較艱難[2]，采取終末宿主免疫的方式，能控制棘球蚴蟲卵的產生，從而控制包蟲病的流行。

3 結束語

到目前位置，包蟲病的預防疫苗在在動物實驗中取得良好的保護效果，所以還需要進行大規模實驗，以求早日進行臨床實驗。終末宿主的免疫處理能有效控制棘球絳蟲的傳播，并采取相應的措施進行處理，從而切斷包蟲病的傳播途徑，較少包蟲病的感染及感染率。包蟲病疫苗的發展，能提升動物的免疫能力，減少包蟲病的危害。