高效液相色譜儀與聯用技術在藥物分析及藥物質量控制中的應用

沈瑩 朱晨

（正大青春寶藥業(yè)有限公司研究院 浙江 杭州 310023）

隨著科學技術的發(fā)展，在藥學分析中采用高效液相色譜法對藥物進行分析與質量控制是常用的重要技術。高效液相色譜法是在氣相色譜法的理論基礎上進行改進優(yōu)化的，其基本原理是相同的，主要通過高壓電流將流動相進行輸送，流動相在通過采用微小顆粒作為填充物的固定相是速度更快，故而比氣相色譜更加高效。本文章對采用高效液相色譜法技術聯合其他檢測儀器對藥物進行分析與質量控制進行介紹。

1.與質譜儀檢測結合使用

質譜儀檢測器（MSD），其擁有良好的選擇性、特異性以及極其的靈敏度，因其有超高的靈敏度，可以對藥物進行0.01%至1%含量分析（即微量、痕量分析）。將高效液相色譜儀的高效化、高自動化以及便于操作的特點MSD能夠將物質進行結構定性分析的特點進行結合使用，可以對藥物進行高效率、快速地進行譜指紋圖譜分析，兩種儀器的結合使用可以大幅節(jié)省時間，在糖尿病以及口腔衛(wèi)生等疾病方面有著重要運用地位。將MSD與高效液相色譜儀進行結合使用，極大減輕了操作人員的操作難度，方法簡單，容易上手，對操作人員的要求較低且得出的穩(wěn)定可靠的數據，在相關的監(jiān)管部門、科研機構以及高校實驗室中進行相關藥物的測定提供了較好的設備[1]。

2.與電化學檢測儀結合使用

對具有電活性的物質如二茂鐵、蒽醌、吡啶釕等進行測定時通常采用電化學檢測器（ECD）進行測定。ECD有庫倫檢測器、電導檢測器等，其中 極譜檢測器、庫侖檢測器、安培檢測器這三種被稱為伏安檢測器。ECD對所有具有可以發(fā)生氧化還原反應的物質都可以進行測定，其原理是被檢測物質在經過電極板時發(fā)生氧化還原反應，即電極反應，發(fā)生電子遷移，根據法拉第定律可以算出被測物質濃度。ECD對物質的檢查具有超高的靈敏度，非常適合對物質進行高精確度的測量，但是也是由于其靈敏度高，在檢測時較易于被各種物質干擾，特異性較差，且兩端電極板損耗較快，對流動相的溫度和流速的穩(wěn)定具有較高要求。將ECD與高效液相色譜儀進行結合使用，對具有氧化還原反應的藥物如硫酸阿奇霉素等進行痕量分析，獲得很高的精確結果，對大多數具有氧化還原的藥物都可以進行監(jiān)測，運用非常廣泛。

3.與蒸發(fā)光散射檢測器結合使用

對于沒有發(fā)色團物質如聚合物、脂類等進行檢測時，通常采用蒸發(fā)光散射檢測器ELSD進行測定。由于有些藥物不能將紫外線進行吸收，不能用紫外或者熒光檢測器進行監(jiān)測，而HPLC可以對這些藥物進行監(jiān)測，其原理是將檢測物質氣化成霧溶膠，然后進行檢測而為被蒸發(fā)的物質在光散射池中也被檢測。該檢測方法可以對未知物質或者樣品純度進行檢測，但是其靈敏度不高且操作較為復雜，對操作人員的操作要求較高，這也只HPLC在上個世紀八十年代問世以來普及使用度不高的原因之一[2]。基于該儀器的工作原理，HPLC可以對很多物質如碳水化合物、氨基、脂肪這三大營養(yǎng)物質以及其他大多數衍生物的有機物進行測定。已有研究人員采用HPLC對三七皂苷進行R1的測定，結果令人驚喜。將ELSD與高效液相色譜法進行結合使用，可以對檢測無進行較好的分離檢測，并且結果準確且干擾因素極少，在檢測過程中使用該方法可以較好地縮短檢測時間，有效提高了檢測人員以及科研人員的檢查效率。

4.與示差折光檢測器結合使用

示差檢測器（RID）可以對形成透明介質的物質進行測定。其原理是利用光在不同折射率的穿過時會發(fā)生折射來進行設置的。在對藥物樣品進行檢測時，當流動相與藥物樣品被光經過時發(fā)生折射因而產生不同的折射率，從而可以被儀器檢測出來[3]。由于不同的折射率可以表示出不同的樣品濃度，從而可以將樣品中被檢測物質濃度測試出來，這種檢測儀器不可以進行梯度脫洗，但通常無法進行痕量分析，對洗脫時環(huán)境溫度以及流動相流動時產生的波動敏感度較大。但是其可以對糖類進行快速簡便且準確性較高的檢測出來，并且可以在檢測時對藥物檢測成分進行實時的檢測，在某些檢測過程中是極其重要且必要的。

5.與熒光檢測器結合使用

對能夠產生熒光的化合藥物進行檢測時，通常使用熒光檢測器（FLD）進行檢測。當藥物被紫外光照射后會產生熒光，而熒光檢測器可將其檢測出來，利用該原理對藥物展開檢測。FLD具有高特異性、高靈敏度的特點[4]。FLD可以對大多數的有機物特別是芳香烴及其衍生物進行痕量分析，該儀器也可以對發(fā)生化學反應后能有熒光的反應藥物進行測定。這種儀器與高效液相色譜結合使用時可以對熒光物質快速、準確的進行檢測。

6.結束語

高效液相色譜法與不同的檢測儀聯合使用時會有不同的檢測效果，根據不同的檢測精度要求、檢測人員操作素養(yǎng)、檢測經費、檢測藥物成分的差異等實際情況而采取不同的檢測儀器和高效液相色譜使用。對于某些藥物可以使用多種不同的檢測儀器時，需根據實際情況而采取操作簡便、精度高且花費最少的儀器進行檢測。隨著社會的發(fā)展，針對不同的藥物有著許多不同的檢測方法，不同的研究機構或監(jiān)測部門有不同的檢測標準和要求，結合高效液相色譜法的精度且易于操作的優(yōu)勢與各種儀器相使用，利用兩者的優(yōu)勢進行互補，以此獲得符合相關檢測的標準要求，所得結果更符合實際情況。