工廠化栽培草菇適宜優質高產菌株的篩選與分析

曲玲+任海霞+萬魯長+謝紅艷+郭惠東+沈秀芬+任鵬飛

摘要：山東省草菇栽培面積大，工廠化生產發展較快，但是適宜的優質高產菌株相對缺乏，常規菌株種性退化嚴重。本試驗對初篩的6個草菇菌株以玉米芯為主要栽培基質進行品比優選試驗。結果表明：V1172、VSD-1岀菇較早，產量高，但子實體菌苞較薄，易開傘；V1296、V1295產量較高，長勢好，出菇期集中，子實體菌苞較厚，商品性好；V9715、V選育10產量明顯低于其它菌株，但V選育10子實體菌苞厚，耐儲存。綜合分析比較認為：V1296、V1295表現最佳，適宜山東工廠化栽培推廣。

關鍵詞：草菇；菌株；篩選；高產；商品性

中圖分類號：S646.1+3文獻標識號：A文章編號：1001-4942（2017）12-0029-04

Abstract The cultivated area of Volvaria volvacea in Shandong Province is very large， and its industrialized production is developing fast. However， the good-quality and high-yield strains suitable for industrialized production are relatively lacking， and the characteristics of conventional strains degrade seriously. Six Volvaria volvacea strains selected through preliminary test were further compared with corncob as main cultivation substrate. The results showed that strains V1172 and VSD-1 had the characteristics of earlier sporophore forming and high yield， but thinner biofilm and easily opened pileus. The strains V1296 and V1295 had higher yield， good growth vigor， concentrated fruiting period， thick biofilm and good commercial characteristics. The yield of V9715 and V Xuanyu10 were significantly lower than that of the other strains， and V Xuanyu10 had thicker biofilm， which indicated storage stability. By comprehensive analysis， the strains V1296 and V1295 performed optimal， so they were suitable for industrial cultivation and popularization.

Keywords Volvaria volvacea； Strain； Screening； High yield； Commercial characteristics

草菇（Volvariella volvacea）隸屬真菌門擔子菌綱傘菌目光柄菇科小包腳菇屬，又稱蘭花菇、美味草菇、中國蘑菇。據考證，草菇最早栽培于我國，距今已有200多年歷史。近年來，一些歐美國家也開始栽培，我國草菇生產量居世界首位。草菇不僅味道鮮美，而且營養價值很高，含人體必需的8種氨基酸，以及9.81%～18.4%的纖維素；草菇中核酸含量較高，還含有還原糖和轉化糖，都是人體的必需營養成分。此外，草菇中還含有一種叫做異種蛋白的物質，可以增強機體的抗癌能力，其含氮浸出物嘌呤堿又能抑制癌細胞的生長。因此，草菇是一種營養豐富的“保健食品”。近幾年，國內多家草菇工廠化企業已建成并投入生產，但工廠化配套栽培技術不完善，缺乏工廠化專用菌株。本研究對6個草菇菌株進行栽培，通過對其菌絲體生長階段和子實體生長階段進行比較，篩選適宜工廠化栽培的菌株，以期為工廠化草菇栽培提供菌種選擇依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試菌種為VSD-1、V選育10、V1172、V9715、V1295、V1296共6個草菇菌株，母種分別由福建農林大學菌物研究中心和山東省農業科學院農業資源與環境研究所提供。

母種培養基：加富PDA培養基；

原種培養基配方：玉米芯83%、麩皮10%、石灰5%、石膏2%；

栽培種培養基配方：玉米芯86%、稻草10%、石灰4%。

1.2 試驗方法

試驗設6個處理，每處理3次重復，隨機區組排列。小區面積10 m2，共18個小區。在（30±2）℃、相對濕度65%～70%的條件下岀菇，由多年種植經驗的技術人員進行管理。試驗前已對6個草菇菌種進行活化、復壯、擴大培養，使菌齡在同等水平下參加試驗。

1.2.1 不同草菇菌株菌絲體階段比較 （1）母種階段菌絲生長情況比較。按照供試母種培養基配方制備母種培養基，采用培養皿（90 mm×18 mm）分裝30 mL培養基，121℃滅菌40 min，冷卻后備用，按照常規方法接種、培養，在菌絲生長期間對母種生長情況記錄。（2）原種階段菌絲生長情況比較。干料先混合均勻，再加水調至含水量70%。把配好的料堆成高1.5 m的梯形堆，發酵3 d。按常規方法裝瓶（罐頭瓶），經0.15 MPa高壓滅菌3 h，冷卻后，在無菌條件下對6個草菇菌株進行接種，每個菌株接20瓶。菌絲生長期間對原種進行生長情況的調查與記錄。endprint

1.2.2 不同草菇菌株子實體階段比較 （1）子實體農藝性狀比較。每個處理第一潮菇的子實體采收時，每小區隨機選取子實體，用游標卡尺測量子實體菌苞厚度、大小等。（2）子實體產量比較。記錄每潮菇產量，岀菇結束后統計每個處理總產量。

1.2.3 草菇菌株基因組的SRAP-PCR 通過對6個草菇菌株基因組的SRAP-PCR檢測，清晰了解各品種之間親緣關系，區分有無同種異名現象，對工廠化生產選擇高產菌種起到快捷作用。提取草菇菌株的DNA，用引物（me6、em14）對DNA進行擴增，然后對擴增產物進行電泳檢測和分析。

me6：5′-TGAGTCCAAACCGGTAG-3′； em14：5′-GACTGCGTACGAATTCAG-3′。

2 結果與分析

2.1 不同草菇菌株菌絲體階段比較

2.1.1 母種菌絲生長情況比較 由表1可見，在母種培養基上，V1295、V1296、V9715菌絲生長速度較快，分別為15.0、14.9、14.9 mm/d，V選育10菌絲生長速度最慢，為13.1 mm/d； V選育10菌絲顏色為白色、菌絲濃密度為較濃密、邊緣整齊度為較整齊，明顯不同于其他菌株，其他5個菌株在菌絲顏色、菌絲濃密度、邊緣整齊度上基本無差別。

2.1.2 原種階段菌絲生長情況比較 由表2可見，V1172菌絲長速較快，3 d長速為2.3 cm，VSD-1長勢最慢，僅1.6 cm，除VSD-1外，其他菌株原種菌絲生長速度差異不顯著，但極顯著高于VSD-1。V1172、V9715有厚垣孢子形成，其他供試菌株均不產生厚垣孢子。V9715、V選育10菌絲生長濃密，V1296、V1295、V1172菌絲較稀疏。

2.2 不同草菇菌株子實體階段比較

2.2.1 子實體農藝性狀比較 由表3可以看出，6個草菇菌株生長方式為叢生，菌苞厚度略有差異，VSD-1、V1172菌苞相對較薄，分別為1.1、1.3 mm，V選育10菌苞最厚，為3.0 mm。6個草菇菌株子實體在形狀上略有差異，VSD-1、V1172為錐形，V選育10為球形，V1296、V1295、V9715為橢圓形。VSD-1子實體灰黑色，顏色較深于其他菌株，V1296、V選育10顏色略淺，VSD-1、V1172錐形、菌苞較薄，V選育10球形、菌苞較厚；V1296、V1295、V9715橢圓形、菌苞厚薄中等。

2.2.2 子實體產量比較 由表4可以看出，6個草菇菌株現蕾時間和采收時間差異不大。從子實體產量上看，V1172產量最高，VSD-1、V1296、V1295中等，V9715、V選育10較低。從不同草菇菌株岀菇特性上看，VSD-1、V1172子實體菌苞較薄，易開傘；V1296、V1295、V9715子實體菌苞中等；V選育10子實體菌苞較厚，耐運輸。

2.3.3 不同草菇菌株基因組的SRAP-PCR圖譜比較 用一對引物（me6、em14）對6個草菇菌株的基因組進行擴增，擴增產物通過凝膠電泳檢測，結果（圖1）發現，6個菌株的DNA擴增條帶有10條，分子量分別為2 500、1 800、1 400、1 000、850、500、450、300、200、100 bp。

其中V1295、V1296、V1172的DNA擴增條帶有分子量1 800、1 400、1 000、850、500、450、200、100 bp的條帶；V9715有分子量2 500、1 800、1 400、1 000、850、500、450、200、100 bp的特異性擴增條帶；VSD-1的DNA擴增條帶有分子量450、300、100 bp的條帶；V選育10有分子量450、200、100 bp的特異性擴增條帶。根據每個菌株擴增條帶數目及分子量的大小可看出V1295、V1296、V1172親緣關系較近；V9715比V1295、V1296、V1172多一條2 500 bp的特異性條帶；VSD-1和V選育10都無大分子條帶。凝膠圖像在一定程度上也可以反應草菇樣品的地理來源，V1295、V1296、V1172、V9715為南方菌株，擴增條帶明顯與其他兩個菌株不同。

3 結論

在菌絲體階段，母種菌絲V1295生長速度最快；V1296、V9715沒有差異，生長速度為較快；V選育10菌絲生長速度最慢，但菌絲長勢較好，菌絲白色、較濃密、邊緣較整齊。原種菌絲V1172生長速度最快，V1295、V1296生長速度較快，VSD-1菌絲生長速度最慢，V選育10菌絲生長勢最好。

在子實體階段，VSD-1子實體灰黑色，V1296、V選育10子實體顏色略淺，其他菌株差異不顯著。VSD-1、V1172子實體錐形，V選育10子實體球形，V1296、V1295、V9715均為橢圓形。V1172、VSD-1子實體菌苞較薄，易開傘，V選育10子實體菌苞最厚，耐儲存、耐運輸。V1296、V1295、V9715子實體菌苞厚薄中等。

子實體產量最高的為V1172，其次為VSD-1、V1296、V1295，子實體產量較低的為V9715、V選育10。

6個草菇菌株基因組擴增條帶表明，V1295、V1296、V1172親緣關系較近，VSD-1和V選育10擴增條帶明顯與其他菌株不同。草菇在一定程度上出現了地理分化，在不同地理環境下出現遺傳差異。

工廠化栽培的草菇品種很多，選擇適宜工廠化栽培的草菇品種主要包括高產、抗病性、商品性等方面，其中商品性包括子實體大小、顏色、菇形、是否易開傘等。本研究4月份通過初篩獲得適宜工廠化栽培6個草菇菌株，綜合本次試驗結果，V1295、V1296兩個菌株在商品性等方面優于其他品種，適宜工廠化栽培，有成為高產優質菌株的潛力。

參 考 文 獻：

[1] 曲玲，任海霞，任鵬飛，等.天達V901草菇菌絲生長條件的篩選與優化[J].山東農業科學，2012，44（10）：79-83.

[2] 任海霞，楊鵬，曲玲，等.草菇液體菌種培養條件優化研究[J].山東農業科學，2014，46（1）：58-60.

[3] 萬魯長，曹德賓，曹德強，等.北方地區麥秸復合料有效積溫與草菇生物量關系研究初報[J].山東農業科學，1999（1）12-14.

[4] 郭惠東，張昌愛，單洪濤，等.改良豬糞渣栽培草菇關鍵技術研究[J].山東農業科學，2017，49（7）：74-76，80.

[5] 高益猛，李賽容.反季節栽培草菇技術研究[J].中國食用菌，1996（4）：34-35.

[6] 張偉群，陳慶生.室內床架廢棉栽草菇技術的改進[J].食用菌，1997 （2）：32-33.

[7] 劉春如，楊修立.草菇高產栽培研究[J].中南林學院學報，1997，17（4）：95-96.

[8] 史秀麗.廢菌料栽培草菇高產技術[J].食用菌，1997（3）：21-22.

[9] 楊瑞長，宋士良，蔡令儀，等.大棚食用菌四季栽培模式及高產因子[J].中國農業科學，1994，27（3）：38-43.

[10]高愛華，宮志遠.麥秸栽培草菇的高產技術關鍵[J].食用菌，1994（2）：23-24.

[11]徐明高.薄膜棚栽培草菇高產技術[J].食用菌，1994（4）：31-32.

[12]曹征貴.草菇袋栽高產技術[J].農村經濟與技術，1994（8）：45-46.endprint