免疫組化染色法在對(duì)患者進(jìn)行肝臟穿刺組織病理檢查中的應(yīng)用效果

王平平

（陽(yáng)泉市第一人民醫(yī)院病理科， 山西 陽(yáng)泉 045000）

免疫組化染色法在對(duì)患者進(jìn)行肝臟穿刺組織病理檢查中的應(yīng)用效果

王平平

（陽(yáng)泉市第一人民醫(yī)院病理科， 山西 陽(yáng)泉 045000）

目的：研究免疫組化染色法在對(duì)患者進(jìn)行肝臟穿刺組織病理檢查中的應(yīng)用效果。方法：對(duì)2016年1月至2017年7月期間在陽(yáng)泉市第一人民醫(yī)院接受肝臟穿刺組織病理檢查的120例患者的臨床資料進(jìn)行回顧性研究。根據(jù)組織標(biāo)本染色方式的不同將其分為HE組（n=60）和免疫組化組（n=60）。采用HE染色法對(duì)HE組患者的組織標(biāo)本進(jìn)行染色，采用免疫組化染色法對(duì)免疫組化組患者的組織標(biāo)本進(jìn)行染色。分析總結(jié)兩種染色方式對(duì)組織切片質(zhì)量和檢查結(jié)果的影響。結(jié)果：免疫組化組患者組織切片質(zhì)量的優(yōu)良率、接受病情診斷的準(zhǔn)確率分別為98.3%、96.7%，HE組患者組織切片質(zhì)量的優(yōu)良率、接受病情診斷的準(zhǔn)確率分別為83.3%、80.0%，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：免疫組化染色法在對(duì)患者進(jìn)行肝臟穿刺組織病理檢查中的應(yīng)用效果顯著。

肝臟穿刺組織；病理檢查；免疫組化；HE

病理檢查是目前臨床上診斷惡性腫瘤的主要方式。進(jìn)行病理檢查的操作環(huán)節(jié)較多，在任一環(huán)節(jié)中發(fā)生失誤都將影響檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性。免疫組化染色技術(shù)是一種新型染色技術(shù)。近年來(lái)，免疫組化染色技術(shù)在診斷惡性腫瘤方面得到了廣泛的應(yīng)用。為了研究免疫組化染色法在肝臟穿刺組織病理檢查中的應(yīng)用效果，筆者對(duì)在陽(yáng)泉市第一人民醫(yī)院接受肝臟穿刺組織病理檢查的120例患者的臨床資料進(jìn)行了回顧性研究。

1 資料與方法

1.1 基線資料

選取2016年1月至2017年7月期間在陽(yáng)泉市第一人民醫(yī)院接受肝臟穿刺組織病理檢查的120例患者作為研究對(duì)象。根據(jù)組織標(biāo)本染色方式的不同將其分為HE組（n=60）和免疫組化組（n=60）。HE組患者中有男33例，女27例；其年齡為32～79歲，平均年齡（53.4±9.7）歲；其中有轉(zhuǎn)移性肝癌患者7例，肝血管瘤患者16例，濾泡樹(shù)突細(xì)胞肉瘤患者5例，肝細(xì)胞癌患者32例。免疫組化組患者中有男32例，女28例；其年齡為32～78歲，平均年齡（53.3±9.8）歲；其中有轉(zhuǎn)移性肝癌患者8例，肝血管瘤患者16例，濾泡樹(shù)突細(xì)胞肉瘤患者5例，肝細(xì)胞癌患者31例。兩組患者的基線資料相比，P＞0.05，存在可比性。

1.2 研究對(duì)象的納入標(biāo)準(zhǔn)

疑似患有肝臟惡性腫瘤。2）具有進(jìn)行肝臟穿刺組織病理檢查的指征。3）本人及其家屬均自愿參與本研究，并簽署了知情同意書(shū)。

1.3 研究對(duì)象的排除標(biāo)準(zhǔn)

處于妊娠期或哺乳期。2）患有精神障礙或意識(shí)障礙。

1.4 方法

采用HE染色法對(duì)HE組患者的組織標(biāo)本進(jìn)行染色。染色方法是：1）將患者的肝臟穿刺組織置于4%的中性甲醛組織固定液中進(jìn)行固定，4 h后使用AF液將其浸泡1 h，然后依次使用75%的乙醇溶液、80%的乙醇溶液、90%的乙醇溶液、95%的乙醇溶液、100%的乙醇溶液（Ⅰ）、100%的乙醇溶液（Ⅱ）將其浸泡1 h。2）依次使用二甲苯溶液（Ⅰ）、二甲苯溶液（Ⅱ）將其浸泡30 min。3）對(duì)組織標(biāo)本進(jìn)行浸蠟、包埋、切片處理。4）在60℃的溫度下對(duì)組織切片進(jìn)行烤片2 h，然后對(duì)其進(jìn)行HE染色。5）完成染色后，在光學(xué)顯微鏡下觀測(cè)組織切片。采用免疫組化染色法對(duì)免疫組化組患者的組織標(biāo)本進(jìn)行染色。染色方法是：1）對(duì)組織標(biāo)本進(jìn)行固定、浸泡、浸蠟、包埋、切片處理的方法與HE組相同。2）對(duì)組織切片進(jìn)行脫蠟處理，并將其置入3%的雙氧水中浸泡20 min。3）用PBS緩沖液對(duì)組織切片進(jìn)行沖洗3次以上（沖洗的時(shí)間＞15 min），然后將700 ml的檸檬酸緩沖液（pH為6.0）置入燒杯內(nèi)加熱。4）在檸檬酸緩沖液沸騰后，將組織切片置入燒杯內(nèi)。15 min后將組織切片取出，在常溫下冷卻5 min后，使用PBS緩沖液（pH為7.4）對(duì)其進(jìn)行沖洗3次以上（沖洗的時(shí)間＞15 min）。5）對(duì)組織切片進(jìn)行一抗處理，然后將其置于4℃的冰箱中孵育。在第2 d，將組織切片取出，并再次使用PBS緩沖液（pH為7.4）對(duì)其進(jìn)行沖洗。6）對(duì)組織切片進(jìn)行二抗處理，對(duì)其進(jìn)行常溫孵育10 min，然后使用PBS緩沖液（pH為7.4）對(duì)其進(jìn)行沖洗。7）使用二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色溶液對(duì)組織切片進(jìn)行顯色處理，然后用清水對(duì)其進(jìn)行沖洗。8）用蘇木精對(duì)組織切片進(jìn)行襯染，并使用透明脫水樹(shù)膠對(duì)其進(jìn)行封固。完成染色后，在光學(xué)顯微鏡下觀測(cè)組織切片。

1.5 觀察指標(biāo)

觀察比較兩種染色方式對(duì)組織切片質(zhì)量和檢查結(jié)果的影響[1]。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

用SPSS 19.0軟件處理本文中的數(shù)據(jù)。計(jì)量資料用（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用%表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

免疫組化組患者組織切片質(zhì)量的優(yōu)良率、接受病情診斷的準(zhǔn)確率分別為98.3%、96.7%。HE組患者組織切片質(zhì)量的優(yōu)良率、接受病情診斷的準(zhǔn)確率分別為83.3%、80.0%。免疫組化組患者組織切片質(zhì)量的優(yōu)良率、接受病情診斷的準(zhǔn)確率均高于HE組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見(jiàn)表1。

表1 兩組患者組織切片質(zhì)量的優(yōu)良率、接受病情診斷準(zhǔn)確率的比較[n(%)]

3 討論

以往臨床上常采用HE染色法對(duì)組織切片進(jìn)行染色，但效果一般。免疫組化染色技術(shù)是一種新型染色技術(shù)。近年來(lái)，免疫組化染色技術(shù)在診斷惡性腫瘤方面得到了廣泛的應(yīng)用。相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道指出，采用免疫組化染色法對(duì)組織切片進(jìn)行染色時(shí)不會(huì)出現(xiàn)內(nèi)源性生物素引起的背景染色，從而可顯著提高組織切片的質(zhì)量[2]。本研究的結(jié)果顯示，與HE組患者相比，免疫組化組患者組織切片質(zhì)量的優(yōu)良率、接受病情診斷的準(zhǔn)確率均更高。可見(jiàn)，免疫組化染色法在對(duì)患者進(jìn)行肝臟穿刺組織病理檢查中的應(yīng)用效果較為理想。筆者認(rèn)為，采用免疫組化染色法對(duì)組織切片進(jìn)行染色時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：1）取材。保證取材病灶部位組織的厚薄一致，避免取到壞死、變性的組織。取材后應(yīng)及時(shí)對(duì)組織標(biāo)本進(jìn)行相應(yīng)的保存處理，以免其遭受污染或發(fā)生變質(zhì)。2）固定。及時(shí)對(duì)組織標(biāo)本進(jìn)行固定，以免其發(fā)生自溶[3]。

綜上所述，免疫組化染色法在對(duì)患者進(jìn)行 肝臟穿刺組織病理檢查中的應(yīng)用效果顯著。此法值得在臨床上推廣應(yīng)用。

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