符啟位+王爽+肖春雷+劉勇+李秋潔+羅豐+韓曉燕+孔祥義
摘 要:通過對48份不同西瓜品種開展苗期細菌性果斑病的抗性鑒定,探明不同西瓜品種對細菌性果斑病的抗病性差異,通過室內人工噴霧接種法,篩選出了黑麗人、領秀一號等29份為中抗品種,農人西瓜5號、抗裂花紅玉等12個為中感品種,鄂西瓜、精選華蜜冠龍等7個為感病品種,沒有高抗和免疫材料。
關鍵詞:西瓜;細菌性果斑病;抗性鑒定
中圖分類號:S651 文獻標識碼:A 文章編號:1001-3547(2017)22-0076-04
西瓜[Citrullus lanatus(Thunb.) Matsum. et Nakai],葫蘆科,一年生蔓生藤本植物,全國各地均有栽培。西瓜是世界農業中的重要水果作物,播種面積和產量在十大水果中居第4位。中國是世界西瓜生產大國,西瓜種植面積占世界總面積的 60%以上,產量占 70%以上[1]。近年來,隨著西瓜種植面積的不斷擴大,以及氣候的變化,病害的發生日益嚴重。細菌性果斑病是西(甜)瓜生產上的一種毀滅性病害,可以侵染多種葫蘆科作物,如西瓜、甜瓜、南瓜、黃瓜等,自報道以來已在美國、澳大利亞、巴西、土耳其、日本、泰國、以色列、伊朗、匈牙利、希臘和我國多個省份發生,給當地的西甜瓜種植業造成了嚴重的損失[2]。細菌性果斑病的病原菌為西瓜嗜酸菌(Acidovorax citrulli)[3],屬國際檢疫性有害生物之一,其發生會導致種植的西瓜生產經濟效益嚴重下降。為減輕該病害的為害,選育抗病品種是防治瓜類細菌性果斑病比較理想的方法之一。本試驗通過室內人工噴霧接種法對 48 份不同西瓜品種進行苗期細菌性果斑病抗病性評價,以期為今后選育抗病性品種提供參考依據。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
①供試病原菌菌株 果斑病病原菌分離自海南省陵水縣西瓜發病植株,編號為LSGB。
②供試西瓜品種 供試 48 個西瓜品種主要來自于新疆農人種子科技有限公司、武漢慶發禾盛農業發展有限公司、湖南博達隆科技發展有限公司等15家公司和單位。品種類型為大果有籽,中果有籽和小果有籽3種類型(表1)。
1.2 試驗方法
①幼苗栽培 試驗開展于2017年3月。選取各個供試品種飽滿的種子進行催芽播種,用福爾馬林100倍液浸種90 min,浸種完成后,用清水沖洗干凈,在培養皿底部墊上濾紙保濕,放入28℃恒溫培養箱下進行催芽。選用54孔育苗穴盤和經過消毒后的無土育苗基質進行播種育苗,每個品種播種 54 粒,播種前澆水浸透,將發芽好的種子播入育苗穴盤中,每穴播種1粒種子,播種后放入大棚內正常管理,待幼苗生長至第四片真葉時進行接種。
②接種方法 將LSGB病原菌在LB固體培養基上活化,28℃培養 48 h后挑取單菌落接種于LB液體培養基中,28℃,200 r/min 進行搖培,將菌液濃度調至1×108 CFU/mL,待第4片真葉完全展開后,采取室內人工噴霧法進行接種,每個品種接種54株,接種后套袋保濕48 h,以不接種作為對照,7 d 后病情穩定調查葉片的發病情況,每株調查上、中、下三片葉,按0級、1級、3級、5級、7級、9級分級記錄。
葉片發病情況分級標準如下[4],0 級:無病;1 級:葉片病斑較少,病斑面積占整片葉面積的5%以下;3 級:病斑較多,病斑面積占整個面積的5%~30%;5 級:病斑較多,病斑面積占整個面積的30%~50%;7 級:病斑很多或融合成大斑,病斑面積占整個面積的50%以上,葉片未焦枯死亡;9 級:病斑很多或融合成大斑,病斑面積占整個面積的50%以上,常使葉片焦枯死亡。
按加權平均法計算病情指數,具體公式如下: 病情指數=×100。
抗病性劃分標準如下[5]:采用相對抗病性方法評價其抗病程度,抗病程度分為免疫(I)、高抗(HR)、中抗(MR)、中感(MS)和感病(S)5類,相對抗病指數分別為1.00、0.80~0.99、0.40~0.79、0.20~0.39和0.20以下。
其中,相對抗病指數=1-相對病情指數。相對病情指數=鑒定品種病情指數/對照品種病情指數(其中,病情指數最高者為對照品種)。
2 結果與分析
2.1 接種后西瓜幼苗的主要表現癥狀
LSGB病原菌菌懸液噴霧接種于不同西瓜品種葉片上,西瓜子葉和真葉均可發病,子葉發病時,病斑向四周擴散,出現不規則淡褐斑,邊緣有黃色暈圈,真葉發病時,由接種點向四周形成不規則斑、水浸狀病斑,病斑沿葉脈發展,嚴重時可發展到葉基部,沿葉脈發展到葉基部并形成褐色壞死斑。病斑周圍有黃色暈圈,略呈多角形,多斑融合使得葉片干枯壞死,病葉不脫落。
2.2 不同西瓜品種苗期對細菌性果斑病的抗病性分析
由表 2 可知,供試的 48 個西瓜品種中沒有對細菌性果斑病表現免疫和高抗的品種,表現中抗(平均病情指數在0.40~0.79)的品種有WM1、WM2、WM4、WM5、WM8、WM10、WM11等 29 份,占總數的60.4%;表現中感(平均病情指數在0.20~0.39)的品種有WM3、WM6、WM7、WM9、WM12、WM15等 12 份,占總數的25.0%;表現感病(平均病情指數在0.20以下)的品種有WM16、WM17、WM27、WM32、WM35、WM36、WM40共 7 份,占總數的14.6%,未篩選到免疫和高抗品種。
3 結論與討論
本研究對 48 份西瓜品種鑒定結果表明不同材料之間抗病性存在差異,篩選出了中抗品種 29 份,中感品種 12 份,感病品種 7 份,未篩選獲得免疫和高抗西瓜品種。鄭喜清等[6]通過苗期室內噴霧接種法,對新疆主要的15個哈密瓜品種或品系、2個籽瓜及15個西瓜品種進行苗期抗病性鑒定,待測的所有哈密瓜、籽瓜和西瓜品種或品系在發病程度上雖有明顯的差別,但均不抗病,其平均病情指數都在40以上;西瓜和籽瓜的抗病性較哈密瓜要強;品種的染色體的倍型和生育期與抗病性也沒有明顯的相關性。賈宋楠等[7]通過對 62 份來源于籽用西瓜、國外引進的粘籽西瓜及普通西瓜雜交后代的自交純系進行苗期抗病性鑒定,篩選出了ES84、ES90 等 22 份中抗材料,ES30、ES94 等 22 份中感材料,ES46、ES50 等 18 份高感材料,沒有高抗和免疫材料。劉欣欣等[8]采用室內苗期人工接種鑒定方法,對黑龍江省市售的 16 份西、甜瓜栽培品種和 84 份種質資源進行了細菌性果斑病的抗病性鑒定,結果表明,10 份西瓜栽培品種中新紅寶、京欣 1 號、雙抗大地雷、特大慶紅寶、超豐F1、慶發 7 號等 6 個品種表現為中抗;景豐寶和齊紅西瓜表現為中感;吉福2 號和慶農 1 號表現為感病,未發現高抗和免疫的品種。在生產實踐中,利用抗性強的品種是最經濟、最有效的控病措施,但是迄今并沒有發現對果斑病免疫或高抗的品種。因此,選育對細菌性果斑病的抗病品種顯得尤為重要。
參考文獻
[1] 馬躍.透過國際分析看中國西瓜甜瓜的現狀與未來[J].中國瓜菜,2011,24(2):64-67.
[2] 閻莎莎,王鐵霖,趙廷昌,等.瓜類細菌性果斑病研究進展[J].植物檢疫,2011,25(3):71-76.
[3] Schaad N W, Postnikova E, Sechler A, et al. Reclassification of subspecies of Acidovorax avenae as A. Avenae (Manns 1905) emend. , A. cattleyae (Pavarino, 1911) comb. nov., A. citrulli (Schaad et al, 1978) comb. Nov., and proposal of A. oryzae sp. Nov[J]. Syst Appl Microbiol, 2008, 31(6): 434-446.
[4] Hopkins D L, Thompson C M. Evaluation of Citrullus sp. germplasm for resistance to Acidovorax avenae subsp [J]. Citrulli Plant Disease, 2002, 86: 61-64.
[5] 王繼華,熊麗,瞿素萍,等.香石竹不同品種對鐮刀菌枯萎病的抗性評價[J].植物保護,2005,31(1):34-36.
[6] 鄭喜清.哈密瓜品種對細菌性果斑病抗性指標的研究[D].內蒙古:內蒙古農業大學,2007.
[7] 賈宋楠,王惠林,鄭健,等.籽用西瓜種質資源對細菌性果斑病的抗性鑒定[J].新疆農業科學,2013,50(5):864-869.
[8] 劉欣欣,王文博,潘春清,等.黑龍江西甜瓜栽培品種及種質資源對細菌性果斑病的抗性鑒定[J].中國蔬菜,2014(9):23-26.endprint