增液湯對便秘模型大鼠血清MTL和SS含量的影響

于凡+熊洪艷+梁玲

摘要：目的研究增液湯對便秘模型大鼠血清胃動素（MTL）和生長抑素（SS）含量的影響，在胃腸激素方面探討增液湯治療便秘的作用機制。方法將60只SD大鼠隨機分為正常組、模型組、麻仁膠囊組、增液湯低、中、高劑量組。除正常組外，其余各組復方地芬諾酯混懸液灌胃復制大鼠便秘模型，模型成功后，分別給藥7 d，于第8 d取腹主動脈血，ELISA法檢測血清MTL、SS含量。結果與正常組相比較，模型組MTL含量明顯下降（P<0.05），SS含量明顯增加（P<0.01）。與模型組相比較，麻仁膠囊組可顯著上調MTL含量（P<0.01），并明顯下調其SS含量（P<0.05）。增液湯低、中、高劑量組MTL含量均明顯高于模型組（P<0.05），SS含量均明顯低于模型組（P<0.05，P<0.01）。結論增液湯通過調節血清MTL、SS的含量，以促進胃腸道蠕動，達到治療便秘的目的。增液湯治療便秘的作用機制可能與調控MTL、SS有關。

關鍵詞：增液湯；便秘；胃動素；生長抑素

中圖分類號：R-33文獻標志碼：A文章編號：1007-2349（2017）12-0061-03

【Abstract】Objective： To study the effect of Fluid-increasing Decoction on serum motilin （MTL） and somatostatin （SS） in constipation rats and explore the mechanism of Fluid-increasing Decoction in treating constipation. Methods： 60 SD rats were randomly divided into a normal group， a model group， a Maren capsule group and a Fluid-increasing Decoction groups with low， medium and high dose. Except the normal group， the other groups were intragastrically administrated with diphenoxylate suspension to replicate constipation rat models. After the models were made successfully and respectively given the drug for 7 days， and on the 8th day abdominal aorta blood was taken. ELISA was used to detect the content of serum MTL and SS. Results： Compared with that in the normal group， MTL content in model group decreased significantly （P<0.05） and SS content increased significantly （P<0.01）. Compared with that in the model group， MTL content in Maren capsule group significantly up-regulated （P<0.01）， and its SS content significantly down-regulated （P<0.05）. The MTL contents in Fluid-increasing Decoction groups with low， medium and high dose were significantly higher than those in model group （P<0.05）， and SS content was significantly lower than that in model group （P<0.05， P<0.01）. Conclusion： Fluid-increasing Decoction can regulate the content of serum MTL and SS to promote gastrointestinal motility and achieve the goal of treating constipation. The mechanism of Fluid-increasing Decoction for the treatment of constipation may be related to the regulation of MTL and SS.

【Key words】Fluid-increasing Decoction， constipation， motilin， somatostatin

便秘為臨床常見病，病因復雜，發病機制尚未有統一標準。有關研究[1]已證實，正常人多種胃腸激素參與調節和影響結腸動力，其濃度變化與結腸動力關系密切，而且慢傳輸型便秘患者血中多種胃腸激素水平異常，與結腸動力障礙密切相關。增液湯出自清·吳鞠通的《溫病條辨》，由玄參、生地、麥冬組成，具有增液潤燥之功。本研究通過觀察增液湯對便秘模型大鼠血清MTL、SS含量的影響，探討其作用機制，為其臨床治療便秘提供科學依據。

1材料

1.1動物SPF級SD大鼠，雌雄各半，體重180～220 g，許可證號SCXK（湘）2013-0004。購于湖南斯萊克景達實驗動物有限公司。

1.2藥物及試劑中藥飲片玄參、生地、麥冬購于昆明東方藥業有限公司；麻仁膠囊（湖南樂邦制藥有限公司，國藥準字：Z10880001）；復方地芬諾酯（常州康普藥業有限公司，國藥準字：H32022716）；大鼠血清胃動素ELISA試劑盒（南京森貝伽生物科技有限公司，貨號：SBJ-R0507）；大鼠血清生長抑素ELISA試劑盒（南京森貝伽生物科技有限公司，貨號：SBJ-R0023）。

1.3儀器連續波長酶標儀（美國Epoch公司）；高速離心機1580R（GeneSpeed公司）。

2實驗方法

2.1增液湯水提浸膏制備稱取所需中藥飲片，置于煎煮容器中，按重量比加8倍藥量的清水浸泡1 h，武火煮沸后開始計時，改為文火繼續煎煮40 min后，經三層紗布過濾取汁。第二次和第三次煎煮均分別按重量比加以藥量的6倍水，用相同方法煎煮40 min，以同樣的方法取汁。三次濾液合并，濃縮成1 g含生藥10 g的浸膏，置于4℃冰箱中保存備用。

2.2分組及造模SPF級SD大鼠60只，雌雄各半，隨機分為正常組、模型組、麻仁膠囊組（0.37 g/kg）、增液湯高、中、低劑量組（20.8，10.4，5.2 g/kg），每組10只。

根據文獻[2]報道方法進行大鼠便秘模型的復制，造模前大鼠禁食不禁水16 h，除正常組外，其余各組大鼠給予復方地芬諾酯混懸液10 mg/kg灌胃，每天一次，正常組給予等體積蒸餾水灌胃，連續4周。于造模第2周開始，記錄大鼠體重及排便情況。造模4周后，各治療組大鼠飲食減少，活動減少，大便量少，便粒干硬；正常組精神狀態、二便正常。與正常組相比較，從第2周開始，各治療組大鼠體重及排便粒數均低于正常組，第4周各治療組大鼠體重及排便粒數與正常組比較，差異顯著，確定便秘模型復制成功。

2.3藥物干預模型成功后，進行藥物干預，以成人每日臨床用量作為等效劑量，按照人與實驗動物的等效劑量折算法計算。增液湯以臨床等效量作為中劑量，低劑量：中劑量：高劑量=1：2：4，增液湯各組按照5.2，10.4，20.8 g/kg灌胃不同劑量增液湯，麻仁膠囊組以成人每日臨床用量作為等效劑量，按照人與實驗動物的等效劑量折算法計算，灌胃0.37 g/kg麻仁膠囊混懸液，正常組和模型組灌胃蒸餾水正常飼養，給藥7天。

2.4標本檢測藥物干預7天后，于第8天進行標本采集。大鼠禁食不禁水24h，10%水合氯醛3 mL/kg腹部注射麻醉，迅速剖開大鼠腹腔，充分暴露腹主動脈，取腹主動脈血5 mL，靜置30 min后，離心，3000 r/min，4℃，15 min，離心結束，取血清作為待測標本，存放于-80℃冰箱中待用。后續操作嚴格按照試劑盒說明書進行，檢測大鼠血清MTL、SS的蛋白濃度。

2.5統計方法實驗數據用均數±標準差（x±s）表示，采用SPSS22.0統計軟件對數據進行統計分析，P<0.05差異有統計學意義。

3結果

3.1一般行為表現造模4周，藥物干預1周，由于灌胃操作不當，大鼠死亡5只，收集標本過程中，由于實驗操作不當，大鼠死亡6只。模型組大鼠飲食、活動、大便量均減少，且便粒干硬，正常組精神狀態、二便正常。

3.2增液湯對便秘模型大鼠血清MTL含量的影響與正常組相比較，模型組MTL含量明顯下降（P<0.05）。與模型組相比較，麻仁膠囊組可顯著上調MTL含量（P<0.01）；增液湯低、中、高劑量組MTL含量均明顯升高（P<0.05）。（結果見表1）

4討論

便秘是臨床多發病、常見病，主要表現為排便次數減少、持續排便費力、排便不盡感、糞便干硬等，嚴重影響著患者的生活質量。目前，許多學者[3-7]認為便秘的發生主要與腸神經系統異常、腸神經遞質異常、Cajal間質細胞異常、胃腸激素異常等有關。

增液湯由玄參、生地、麥冬組成，具有滋陰潤燥的功用，主治陽明溫病，津虧便秘證。方中玄參可滋陰潤燥，壯水制火，啟腎水以滋腸燥。生地清熱養陰，壯水生津，以增玄參滋陰潤燥之力；麥冬滋養肺胃陰津以潤腸燥。正如吳鞠通在《溫病條辨·中焦篇》第11條自注云：“此方妙在寓瀉于補，以補藥之體作瀉藥之用，既可攻實，又可防虛。”

復方地芬諾酯為復方制劑，主要包含鹽酸地芬諾酯和硫酸阿托品，二者可通過減弱腸道蠕動，抑制腸道腺體分泌，造成腸內容物通過時間延長，腸道水分減少，從而復制便秘模型。

胃腸激素是由胃腸道內分泌細胞和神經細胞釋放的一類小分子化學物質，廣泛分布于人體內，是調節胃腸運動的重要物質，在便秘的發生發展中也有重要作用。其中MTL可在消化間期刺激胃和小腸的運動，對胃腸道運動起興奮作用，研究顯示[8]結腸MTL水平顯著降低，可引起消化道平滑肌蠕動減弱、張力降低，傳輸時間延長，從而導致便秘的發生。SS則對胃腸運動有一定抑制作用，通過抑制胃腸平滑肌運動，延長腸道內容物通過時間，有研究證實[9]，SS通過影響結腸運動的興奮性而導致便秘。

本實驗采用增液湯干預便秘模型大鼠，研究結果亦表明，增液湯可明顯上調血清MTL含量，下調血清SS含量。本課題前期研究發現增液湯可增加正常大鼠離體腸肌肌張力，縮短實驗動物排便時間，促進排便。結合本實驗研究結果，提示增液湯治療便秘的作用機制可能是通過增加血清MTL含量，減少血清SS含量，以促進胃腸道蠕動，同時增加腸肌肌張力，以促使糞便快速通過腸道，縮短排便時間，從而達到治療便秘的目的。

參考文獻：

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（收稿日期：2017-10-16）