地龍（鮮品）藥材質量標準的擬定

盧琴

摘要：地龍（鮮品）為“復方地龍膠囊”藥品所需用的重要藥材之一。由于中國藥典并未收載“地龍（鮮品）”的質量標準，僅收載了干品的質量標準，因此本文重點描述如何建立“地龍（鮮品）”的質量標準。

關鍵詞：地龍（鮮品）、質量標準

地龍（鮮品）為鉅蚓科動物參環毛蚓Pheretima aspergillum （E. Perrier）、通俗環毛蚓Pheretima vulgaris Chen、威廉環毛蚓Pheretima guillelmi （Michaelsen）或櫛盲環毛蚓Pheretima pectinifera Michaelsen的新鮮全體。前一種習稱“廣地龍”，后三種習稱“滬地龍”。本文從湖北產地采收多個批次的地龍（鮮品），采收后置-20℃冷凍保存，解凍后使用。

【成分】 本品含地龍解熱酶（Lumbrotebrine）、地龍素（Lumbritin）、地龍毒素（Terrestro-Lumbrolysin）、黃嘌呤（Xanthine）、腺嘌呤（Adenine）、鳥嘌呤（Guanine）、膽堿（Choline）、胍（Guanidine）。含水份70-90%，干品含蛋白質50-65%，脂肪10-20%，碳水化合物11-18%和灰分10-23%。其中地龍解熱酶為有效的治療成分。因此，本品標準的建立從性狀、顯微鑒別、薄層鑒別、活性等幾個方面來研究。另外，水分、灰分、重金屬等指標，因鮮品與干品無差異，可直接引用中國藥典中干品的標準。

【樣品情況】 收集樣品共5批，其名稱來源見下表。

【實驗儀器與試劑】

OLYMPUS BH-2 DP-12顯微數碼攝像系統；水為純化水，其余試劑均為分析純。

【性狀】

呈長園柱形，長8～15cm，寬0.5～1.5cm。全體具環節，背部棕褐色至黃褐色，腹部淺黃棕色；第14～16環節為生殖帶，較光亮。第18環節有一對雄生殖孔。雄交配腔能全部翻出，呈花菜狀或陰莖狀。受精囊孔3對，在6/7至8/9環節間。

通過上述性狀觀察判斷，湖北產地的地龍均符合《中國藥典》一部中“滬地龍”中的“通俗環毛蚓Pheretima vulgaris Chen”的描述。

【顯微鑒別/薄層鑒別】

（1）取本品，干燥，粉碎，置顯微鏡下觀察：斜紋肌纖維無色或淡棕色，直徑4～36μm，肌纖維散在或相互絞結成片狀，多稍彎曲，邊緣常不平整。表皮細胞呈棕黃色，細胞界限不明顯，布有暗棕色的色素顆粒，有的顆粒聚集成條狀、網狀。剛毛少見，常碎斷散在，淡棕色或黃棕色，完整者細長，長350-400μm，中部直徑24～50μm，一端平截，另端尾尖，表面光滑，有的表面可見縱裂紋。以上特征為其主要顯微特征，

（2）參考《中國藥典》2010年版一部中，地龍（干品）藥材鑒別（3）。經采用不同的溫濕度條件及不同的薄層板（青島海洋產硅膠G預制薄層板與Merck產高效硅膠G預制薄層板）進行了比較。色譜條件：取本品5g剪碎，加三氯甲烷20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷1ml使溶解，作為供試品溶液。另取地龍對照藥材（中檢院120987-201107）1g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（附錄Ⅵ B）試驗，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一硅膠G板上，以甲苯-丙酮（9：1）為展開劑，展開，取出晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。

小結：不同品牌薄層板在相同的展開條件下，均能顯示出對照藥材位置顏色相一致的主斑點。分別采用供試品不同點樣量（2？l 、5？l）進行比較，點樣5？l，斑點清晰。

【活性測定】 由于地龍內含多種活性酶，為了便于檢測，本文采取其有效成分之一尿激酶作為活性參照檢測。初步擬定按地龍（鮮品）計算，每1g效價應不得少于300尿激酶單位。

（1）標準品溶液的制備 取尿激酶標準品，用0.1%明膠磷酸鹽緩沖液制成濃度為每1ml中含15尿激酶單位的溶液。

（2）供試品溶液的制備 取本品適量，絞碎，稱取50g，加水50ml，37℃水浴保溫勻漿20小時，3000轉/分離心20分鐘，精密量取上清液1ml，置10ml量瓶，加0.1%明膠磷酸鹽緩沖液稀釋至10ml，即得。

（3）測定法 取直徑約10cm表面皿1只，于10℃以下加3ml凝血酶溶液，再加纖維蛋白原溶液14ml，迅速混勻，于室溫水平放置20分鐘待凝結后，分別精密吸取標準品溶液、供試品溶液各10μl，點于上述纖維蛋白原平板上，于37℃保溫5-6小時，取出要用卡尺測量溶圈垂直兩直徑，以溶圈垂直直徑的乘積作為溶圈面積。供試品溶液的溶圈面積應大于標準品溶液的溶圈面積。

結論：經本文研究多批次地龍（鮮品）的研究，可確立滬地龍（鮮品）的質量標準：

參考文獻：

[1]中國藥典2015年版一部

[2]李時珍，本草綱目（校點本），（15），951，人民衛生出版社，1979。

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