湖南省棉花參試品種的枯萎病和黃萎病抗性分析

摘要：為了鑒定湖南省棉花品種的枯萎病和黃萎病抗性情況，于2014～2015年對(duì)參加區(qū)域試驗(yàn)的和育種單位委托鑒定的共33份材料進(jìn)行了枯萎病和黃萎病抗性鑒定。鑒定結(jié)果為：抗枯萎病材料有3份，占鑒定材料的9.1%，高抗枯萎病材料有1份，占3.0%，耐枯萎病材料21份，占63.6%，感枯萎病材料8份，占24.3%；抗黃萎病材料有2份，占鑒定材料的6.1%；高抗黃萎病材料2份，占6.1%；耐黃萎病材料14份，占42.4%；感黃萎病材料15份，占45.4%。比較枯萎病和黃萎病平均病指，表明參試材料對(duì)黃萎病抗性遠(yuǎn)不及對(duì)枯萎病的抗性。

關(guān)鍵詞：湖南；棉花；枯萎病；黃萎病；抗性鑒定

中圖分類號(hào)：S562.037 S435.621.2.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：2095-3143（2017）04-0036-04

DOI：10.3969/j.issn.2095-3143.2017.04.011

0 引言

根據(jù)湖南省棉花研究所提出的“棉花黃萎病抗性評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程”[1]和“棉花枯萎病抗性室內(nèi)評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程”[2]對(duì)2014～2015年湖南省棉花品種區(qū)域試驗(yàn)、短季棉品種區(qū)域試驗(yàn)的參試品種及育種單位委托鑒定的新品系和新材料的抗病性進(jìn)行了鑒定。

1 材料與方法

1.1 供試材料

一是2014～2015年參加湖南省棉花品種區(qū)域試驗(yàn)和短季棉品種區(qū)域試驗(yàn)的參試品種，2014年為MHQA1～A10，2015年MHQA1～A7；二是育種單位委托鑒定的新品系及新材料為湘FZ011、湘K18、湘K25、湘XP573、湘16、湘419、BN19、湘494、湘P-26，湘XP611、湘B29、湘FZ001、湘棉早1號(hào)、湘Q190、矮早131。

1.2 棉花黃萎病抗性鑒定方法

1.2.1 病原物接種體的選擇

在棉花黃萎病發(fā)病高峰期采集湖南各主產(chǎn)棉區(qū)（鼎城、漢壽、臨澧、澧縣、南縣、安鄉(xiāng)）發(fā)病典型的病株，采用常規(guī)組織分離法于室內(nèi)分離黃萎病菌，經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定確認(rèn)為大麗輪枝菌后，進(jìn)行單孢純化和致病力測(cè)定，致病力測(cè)定采用朱荷琴，等[3]（2010）方法，選擇致病力中等偏強(qiáng)的菌株用于鑒定。

1.2.2 病原物接種體的制備

菌種培養(yǎng)物采用棉籽培養(yǎng)，具體方法為：先將棉籽用水煮漲，瀝干水分，裝入聚丙烯袋中，高壓濕熱滅菌20 min。將查比克液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)好的黃萎病菌孢子液15 mL接入已滅菌的棉籽培養(yǎng)基中，隨后置于25℃恒溫箱中培養(yǎng)7～10 d，待黃萎病菌的菌絲布滿后，將培養(yǎng)物掏出，風(fēng)干，用于病圃土壤接菌。

1.2.3 病圃的建立

按450 kg/hm2的接種量，將布滿菌絲的菌種均勻地施入田間，再翻耕2～3遍，使病菌與土壤混合均勻。

1.2.4 鑒定方法

鑒定地點(diǎn)為湖南省棉花科學(xué)研究所人工病圃，抗病對(duì)照為中植棉2號(hào)，感病對(duì)照為冀棉11號(hào)。鑒定品種（系）與對(duì)照品種隨機(jī)排列，每品種（系）3次重復(fù)，每小區(qū)種2行棉花，行長(zhǎng)5 m，留苗50株；按常規(guī)的播種時(shí)間和田間管理方式進(jìn)行。

1.2.5 發(fā)病調(diào)查及統(tǒng)計(jì)

隨時(shí)監(jiān)測(cè)感病對(duì)照的發(fā)病情況，在感病對(duì)照病情指數(shù)達(dá)35.0以上，應(yīng)開始全面逐株調(diào)查，10～15 d調(diào)查一次，采用5級(jí)分級(jí)法逐株記載病情級(jí)別。根據(jù)調(diào)查的結(jié)果按以下公式計(jì)算病株率、病情指數(shù)和相對(duì)病情指數(shù)[4]。

病株率（%）=（發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)）×100；

病情指數(shù)=[Σ（相應(yīng)病級(jí)×各病級(jí)病株數(shù)）/調(diào)查總株數(shù)×最高病級(jí)（4）] ×100；

相對(duì)病情指數(shù)=K×鑒定材料的病情指數(shù)；K=50/感病對(duì)照實(shí)際病指。

1.2.6 抗病性評(píng)價(jià)

根據(jù)被鑒定品種（系）不同時(shí)期相對(duì)病情指數(shù)的平均值大小評(píng)定品種的抗性級(jí)別，各級(jí)別評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)見表1。

1.3 棉花枯萎病抗性鑒定方法

1.3.1 菌種選擇

枯萎病鑒定所接病菌為河南安陽的7號(hào)菌系。

1.3.2 病原菌接種體制備

將購買的玉米糝和曬干的河沙按質(zhì)量比1︰1混合均勻，加入適量的水，裝入克氏瓶或聚丙烯袋中，高壓濕熱滅菌20 min；再將查比克液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)好的枯萎病菌孢子液15 mL接入已滅菌的玉米沙粒培養(yǎng)基中，隨后置于25℃恒溫箱中培養(yǎng)7～10 d，待枯萎病菌的菌絲布滿后，將培養(yǎng)物掏出，風(fēng)干，備用。

1.3.3 鑒定用病土的接菌

用篩過的無病土，經(jīng)160℃干熱滅菌，拌入等體積的河沙。將病菌玉米沙粒培養(yǎng)物按2%的比例加入到滅菌土中，混合均勻，加入少量水，堆放3～5 d備用。用直徑6 cm，高8 cm的無底紙缽，將已混均勻的帶菌土裝入缽中，至缽體的2/3高度。

1.3.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

鑒定試驗(yàn)于溫室進(jìn)行，使用中植棉2號(hào)為抗病對(duì)照，冀棉11號(hào)為感病對(duì)照，鑒定品種（系）與對(duì)照品種隨機(jī)排列，每品種每重復(fù)播10缽，每缽留苗3株，3次重復(fù)。

1.3.5 棉苗管理

溫室環(huán)境溫度控制在20℃～32℃，出苗后土壤相對(duì)濕度保持在60%～80%，并確保光照良好。

1.3.6 發(fā)病調(diào)查及統(tǒng)計(jì)

跟蹤監(jiān)測(cè)感病對(duì)照的發(fā)病情況，當(dāng)感病對(duì)照病情指數(shù)達(dá)到35.0以上時(shí)，開始調(diào)查各品種（系）的枯萎病發(fā)生情況，每隔7～10 d調(diào)查一次，亦是采用5級(jí)分級(jí)法逐株記載病情級(jí)別。病株率、病情指數(shù)和相對(duì)病情指數(shù)計(jì)算方法同黃萎病鑒定。

1.3.7 鑒定結(jié)果的評(píng)價(jià)

根據(jù)被鑒定品種（系）的相對(duì)病情指數(shù)的大小評(píng)定其抗性級(jí)別，各級(jí)別評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)見表1。

2 結(jié)果與分析

2.1 鑒定結(jié)果

2014～2015年共有33份材料同時(shí)進(jìn)行棉花枯萎病和黃萎病抗性鑒定。兩年的鑒定結(jié)果表明：抗枯萎病材料有3份，占鑒定材料的9.1%，高抗枯萎材料有1份，占鑒定材料的3%，耐枯萎病材料21份，占鑒定材料的63.6%，感枯萎病材料8份，占鑒定材料的24.2%；抗黃萎病材料有2份，占鑒定材料的6.1%，高抗黃萎病材料2份，占6.1%，耐黃萎病材料14份，占42.4%，感黃萎病材料15份，占45.4%（見表2）。

2.2 棉花對(duì)枯黃萎病抗性的相關(guān)性研究

2014～2015兩年鑒定的33份材料其平均枯萎病指為16.5，平均黃萎病指為33.2；黃萎病指為枯萎病指的2.01倍，說明近兩年湖南省參試材料黃萎病抗性遠(yuǎn)不及枯萎病的抗性。對(duì)枯萎病指和黃萎病指做相關(guān)性分析，結(jié)果表明兩者相關(guān)性不明顯。

3 小結(jié)與討論

從兩年的抗病性鑒定結(jié)果來看，湖南省部分材料具有較強(qiáng)的抗病性。具體表現(xiàn)在33份參試材料中，枯萎病抗性級(jí)別達(dá)到抗以上的有4份，占鑒定材料的12.1%，其中有1份高抗材料。黃萎病抗性級(jí)別達(dá)到抗以上的也是4份，占鑒定材料的12.2%，其中有2份高抗材料。尤其是湘B29材料，無論在黃萎病抗性還是枯萎抗性均表現(xiàn)出了非常強(qiáng)的抗性，但其抗病性是否穩(wěn)定仍需進(jìn)一步監(jiān)測(cè)。

從鑒定結(jié)果也可以看出，湖南省棉花抗病育種還應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)。表現(xiàn)在對(duì)黃萎病抗性差，33份參試材料中，感病材料有15份，占鑒定材料的45.4%，接近一半。黃萎病平均病指為33.2，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于枯萎病平均病指（16.5）。

參考文獻(xiàn)

[1] 李彩紅，張志剛，趙瑞元，等. HNZ088-2015，棉花黃萎病抗性評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程[S]. 湖南省農(nóng)業(yè)委員會(huì)，2015-10-29.

[2] 李彩紅，張志剛，趙瑞元，等. HNZ089-2015，棉花枯萎病抗性室內(nèi)評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程[S]. 湖南省農(nóng)業(yè)委員會(huì)， 2015-10-29.

[3] 朱荷琴，馮自力，李志芳，等. 蛭石沙土無底紙缽定量蘸菌液法鑒定棉花品種（系）的抗黃萎病性[J]. 中國棉花，2010，37（12）：15-17.

[4] 齊苗. 轉(zhuǎn)基因抗蟲雜交棉皖雜344選育及栽培技術(shù)研究 [D]. 合肥：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2015.