蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量檢測新方法的研究

摘 要：農(nóng)藥的種類繁多，有機(jī)磷作為最常見的一種，在蔬菜生產(chǎn)中有著廣泛的應(yīng)用，其毒性非常高，在蔬菜中的殘留使得人畜中毒現(xiàn)象時有發(fā)生，甚至?xí)?dǎo)致畸形和致癌，加強(qiáng)對蔬菜中有機(jī)磷的檢測對于保護(hù)人體健康有著重要意義。本文主要針對當(dāng)前新研制出的快速檢測儀來進(jìn)行探究，對其運用的原理酶抑制法進(jìn)行分析，得出檢測有機(jī)磷的有效方法。

關(guān)鍵詞：蔬菜；有機(jī)磷；殘留量；檢測

中圖分類號：S481 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20171132039

1 有機(jī)磷的化學(xué)機(jī)理及在蔬菜中的殘留情況

1.1 有機(jī)磷農(nóng)藥的化學(xué)特性

有機(jī)磷農(nóng)藥中含有C-P鍵或C-O-P、C-S-P、C-N-P鍵，是一種有機(jī)化合物，自從我國禁止使用六六六和滴滴涕之后，有機(jī)磷成為使用最廣泛的農(nóng)藥類型，有機(jī)磷的殺蟲效果好，在蔬菜中的殘留期短，對于溫血動物有一定的毒性，其中毒原理為對膽堿能神經(jīng)突觸后膜上的乙酰膽堿酯酶的抑制，其反應(yīng)的化學(xué)方程式如下：乙酰膽堿酯酶→膽堿+乙酸，有機(jī)磷+乙酰膽堿酯酶→磷酰化膽堿酯酶。乙酰膽堿酯酶在神經(jīng)系統(tǒng)中起著傳導(dǎo)動物刺激的作用，正常情況下神經(jīng)末梢釋放出乙酰膽堿酯，進(jìn)行神經(jīng)傳導(dǎo)，然后被膽堿酯酶分解失去作用，但是當(dāng)有機(jī)磷進(jìn)入人體后，會與酶形成共價中間復(fù)合物，然后經(jīng)過催化水解，使得-X-R基團(tuán)失去作用，令乙酰膽堿酯酶在人體內(nèi)大量堆積，引起神經(jīng)中毒。

1.2 蔬菜中有機(jī)磷的殘留現(xiàn)狀研究

農(nóng)藥殘留是由于農(nóng)藥的化學(xué)穩(wěn)定性強(qiáng)，施用之后很難進(jìn)行分解，出現(xiàn)殘留在蔬菜或土壤中的情況，達(dá)到一定濃度之后就會對人體造成危害，經(jīng)過調(diào)查研究，蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留是當(dāng)前影響蔬菜質(zhì)量的主要因素，超標(biāo)率達(dá)到49.4%，對人體的危害極大。

2 有機(jī)磷檢測的新方法

2.1 乙酰膽堿酯酶抑制檢測

乙酰膽堿酯酶抑制法主要以乙酰膽堿為底物，在AChE作用下，將乙酰膽堿水解為膽堿和乙酸，膽堿和二硫?qū)ο趸a(chǎn)生顯色反應(yīng)，使得反應(yīng)液呈現(xiàn)黃色，采用乙酰膽堿酯酶測定殘留農(nóng)藥時，當(dāng)酶完全水解底物時，溶液會變?yōu)辄S色，對農(nóng)藥的抑制率為0，當(dāng)酶的活性被農(nóng)藥抑制發(fā)生部分水解時，溶液呈顯出淡黃色，抑制率也會隨之出現(xiàn)，當(dāng)酶完全被農(nóng)藥抑制時，溶液呈現(xiàn)無色，抑制率為100%，根據(jù)農(nóng)藥殘留量與酶活性抑制率之間的關(guān)系就可以判斷農(nóng)藥殘留程度。蔬菜中有機(jī)磷的殘留量主要通過測定蔬菜提取液，經(jīng)過AChE活性抑制之后，酶對其底物的水解能力的下降情況來判定有機(jī)磷的殘留量。

2.2 植物酯酶抑制法檢測

植物酯酶抑制法包括固藍(lán)B鹽法和二氯靛酚法，固藍(lán)B鹽法主要依據(jù)農(nóng)藥對植物酶的活性的抑制情況來判定，通過比色法來測定有機(jī)磷的殘留量，如果試樣中殘留量較少或者沒有殘留，酶的活性不會被抑制，基質(zhì)發(fā)生水解，顯色劑會發(fā)生顯色，如果殘留量太大，酶的活性被抑制，水解產(chǎn)物減少使得顯色不明顯或者沒有顯色。植物酯酶將乙酸-α-萘酯水解為萘酯和乙酸，萘酚與顯色劑固藍(lán)B鹽作用形成紫紅色偶氮化合物，發(fā)生顯色反應(yīng)，酶的抑制作用不同，溶液顏色深淺也不同，說明有機(jī)磷的殘留量也不同。主要通過對抑制率的大小判斷來測定有機(jī)磷的殘留量。二氯靛酚測定法的原理是碘化硫代乙酰被植物酯酶水解，生成硫代膽堿，具有還原性，可以使藍(lán)色的二氯靛酚褪色，酶的活性越大，吸光度值越低，當(dāng)被測樣品中存在一定的有機(jī)磷時，酶的活性會受到抑制，吸光度增高，根據(jù)吸光度的變化情況確定有機(jī)磷的殘留量。

2.3 氣相色譜檢測法

氣相色譜檢測方法比酶抑制的檢測度高5倍，但是傳統(tǒng)的氣相色譜法前處理方法花費的時間太長，對于蔬菜的交易情況進(jìn)行影響，本文介紹的氣相色譜前處理方法可以大大縮短前處理時間，進(jìn)行快速測定。對于氣相色譜檢測的儀器選用CP-3800型號，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀為R-205，將有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液作為樣品，用乙腈、丙酮、氯化鈉為提純物，將有機(jī)磷農(nóng)藥的毛細(xì)管氣相色譜進(jìn)行分離，農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)液注入儀器中，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮之后，加入丙酮定容至3mL，即可進(jìn)行樣品測定，處理快速簡便。

3 結(jié)語

本文通過介紹相關(guān)的農(nóng)藥有機(jī)磷的檢測方法，使其在控制蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留量上可以分發(fā)揮更大作用，促進(jìn)蔬菜質(zhì)量的提高，保證飲食安全。酶抑制法檢測有機(jī)磷的含量是最準(zhǔn)確及時的方法，在檢測有機(jī)磷的殘留量中發(fā)揮著重要作用，氣相色譜法的造價成本高，不適用于基層農(nóng)藥殘留檢測，應(yīng)該結(jié)合酶抑制法研發(fā)快速檢測儀器，使得農(nóng)藥檢測效果更好。

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作者簡介：王雙龍（1980-），吉林人，碩士，工程師，研究方向：農(nóng)產(chǎn)品檢測，水產(chǎn)品、畜產(chǎn)品檢測、環(huán)境中水、土壤檢測。endprint