木本錦帶的組培快繁技術研究

張春吉

（吉林工程職業學院，吉林 四平 136000）

木本錦帶的組培快繁技術研究

張春吉

（吉林工程職業學院，吉林 四平 136000）

以休眠的錦帶枝條作為試驗材料進行了木本錦帶組織培養試驗。在分別比較了不同培養基成分對外植體生根及不定芽生成情況的影響后得出試驗結論。試驗結果表明：叢生芽增殖的適宜培養基是1/2 MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L；生根培養基則以1/2 MS+IBA 1.0 mg/L+瓊脂8 g/L+蔗糖40 g/L為宜。

木本錦帶；組培；快繁技術

錦帶花，忍冬科錦帶花屬落葉灌木，產自東北、華東地區，是一種觀賞價值較高的植物。因其花色艷紅粉嫩、葉片翠綠、葉形橢圓可愛，且花期較長，達3個月之久，故多用于早春灌木，應用于園林綠化之中，是一種可增加園林色相、豐富園林綠化景觀的彩葉觀花植物[1,2]。

木本錦帶是由四平市林業科學研究院于2012年引入的一批錦帶新品種，頗具觀賞價值，且耐陰、耐寒；對土壤要求不嚴，能耐貧瘠土壤；萌芽力強，生長迅速。但在繁殖方面因為錦帶花屬的植物種子較難采集，制約了錦帶花的大量繁殖。又因在生產時雖采用分株和扦插等方法進行生產但仍繁殖數量有限，因此建立組織快繁技術對其栽培應用具有重要的現實意義。紅王子錦帶的組織快繁技術已有較多報道，它可通過葉片、莖段再生途徑進行擴繁，也可通過體細胞胚胎發生途徑進行增殖[3-5]。與之相比較，木本錦帶的組培快繁研究較少。因此本試驗就以休眠的木本錦帶枝條為試驗材料，研究了不同因素對其組織培養的影響，以期為木本錦帶的快速繁殖提供更多的有效數據。現具體介紹本次試驗過程及試驗結果。

1 材料與方法

1.1 材料

本試驗使用的是休眠的木本錦帶枝條。室內試驗于2012—2013年在吉林師范大學生命科學學院植物生物技術實驗室進行。

1.2 方法

1.2.1 材料準備及表面消毒

將休眠枝條在實驗室萌發，成活后剪去枝條頂部，以促進分枝生長。當新抽生的分枝長至6 cm左右，葉片剛轉綠平展時剪下枝條，去除葉片，用自來水沖洗15 min，用洗潔精洗滌 2次后吸干，然后在無菌室超凈臺上用 75%酒精消毒 1 min；用 1/50新潔爾滅液消毒 20 min；再用0.1%氯化汞消毒15 min，最后用無菌蒸餾水沖洗3遍后吸干[6-8]。

1.2.2 無菌培養系的建立與增殖

在超凈臺上剝取莖尖，長度 0.5～1.0 mm，余下的枝條，切成1 cm長的莖段(每段帶1～3個腋芽)，淺插于培養基中。培養室溫度為 25℃，光照 12 h/d，光照強度為2 000 lx。增殖培養基為1/2 MS+KT 0.5 mg/L，接入附加不同濃度6-BA與NAA的MS培養基中（表1），比較激素濃度配比對芽增殖的影響。增殖階段的培養物每30 d增殖培養1次[9,10]。

表1 激素濃度配比對木本錦帶芽增殖的影響

1.2.3 試管苗的生根培養

基本培養基選用1／2 MS，然后添加不同質量濃度IBA、NAA進行生根誘導培養。從中篩選合適的培養基配方。不同配方分別接種100株左右，觀察生根情況，經20～25 d統計生根結果[11]。

1.2.4 培養條件

培養期間培養基pH值為5.8，瓊脂6 g／L，蔗糖30 g/L，在120 kPa壓力下滅菌20 min。接種后置于培養溫度(25±2)℃、光照強度為l 000～1 500 lx、每天光照12 h的組培室條件下進行培養[12,13]。

1.2.5 統計分析

以上試驗重復3次，每次重復10瓶以上，試驗結果為3次重復的平均值。采用統計軟件SAS 8.2中的GLM過程進行差異顯著性分析。結果如為百分數，經反正弦轉換后進行統計分析。

2 結果與分析

2.1 激素濃度配比對木本錦帶芽增殖的影響

通過對表1的綜合分析可以發現，出芽率在NAA濃度最低為0.1 mg/L，6-BA濃度最大，即5.0 mg/L時達到最高，為92.31%。同時此時相應的外植體數目也是最多的，達到了39這樣的程度。而相對來說，在NAA濃度最高為0.5 mg/L，6-BA濃度最小，即1.0 mg/L時出芽率為63.89%，為最低值；外植體數目為36。即隨著6-BA濃度的升高、NAA濃度的下降，木本錦帶的出芽率以及外植體數目是不斷提高的，并且培養皿中單個外植體出芽數也隨著6-BA的濃度變化而變化。由6-BA濃度最大，即5.0 mg/L時的7.9 a,直至濃度最低，即1.0 mg/L時的5.2 d，是隨著6-BA濃度升高而不斷變大的。因此可以分析得出，在6-BA濃度為5.0 mg/L、NAA濃度為0.1 mg/L時，是最適宜木本錦帶出芽增殖的。

2.2 試管苗的生根培養

由表2可見，通過IBA進行生根誘導的3個處理，其生根率在IBA濃度為2.0 mg/L、1.0 mg/L時可達100%，在濃度為0.5 mg/L時生根率為最低值，是93.33%。這顯著高于相同濃度的NAA處理時得到的數據，即在 NAA濃度分別為 2.0 mg/L、1.0 mg/L、0.5 mg/L 時，生根率相應為 90.00%、93.33%、73.33%。由此可見，NAA與IBA誘導木本錦帶生根的能力是有顯著差異的。并且同樣能使試管苗生根率可達100%的經IBA處理過的培養基，在IBA濃度為1.0 mg/L時其生根平均根條數為24.7，平均根長度為4.7 cm。在IBA濃度為2.0 mg/L時，其生根平均根條數為23.6，平均根長度為3.4 cm。明顯在IBA濃度為1.0 mg/L時根系的生長最好。由此可以得出結論，即木本錦帶的生根誘導以1/2 MS＋IBA1.0 mg/L＋瓊脂8 g/L＋蔗糖40 g/L為宜。

表2 不同濃度的NAA與IBA對木本錦帶組培苗生根的影響

3 討論

組織培養是目前提高園藝植物繁殖率的重要途徑之一,但是對于部分植物來說,由于體內含有內生菌,因此組織培養還是有一定難度的。國內對紅王子錦帶花的組織培養已有相關報道，但尚未見對木本錦帶花的組培快繁研究的相關報道。因此，本試驗以休眠的木本錦帶枝條為材料，研究了不同因素對其組織培養的影響，并且為木本錦帶的快速繁殖提供更多的有效數據。

本次試驗過程當中，通過使用不同激素以及不同濃度的激素培養，對比培養結果，從而了解不同激素以及激素濃度對于植株生長的影響。通過觀察可知，在培養基當中 6-BA為5.0 mg/L、NAA為0.1 mg/L時，培養基中試管苗增殖效率最高，試管苗的生長最為健壯。而在IBA為1.0 mg/L時，木本錦帶試管苗生根可達100%，根須數量多而長，十分有利于試管苗向土壤中移栽。

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1005-2690（2017）12-0123-02

S685.99

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2017-11-13）