附子多糖對抑郁大鼠模型的影響*

龍亞秋, 謝文源, 李 華， 駱文婷, 鄭慰武

(1.廣州中醫藥大學附屬廣東省中醫院, 廣東 廣州 510000 2.南方醫院， 廣東 廣州 510515)

基礎醫學

附子多糖對抑郁大鼠模型的影響*

龍亞秋1, 謝文源1, 李 華2， 駱文婷1, 鄭慰武1

(1.廣州中醫藥大學附屬廣東省中醫院, 廣東 廣州 510000 2.南方醫院， 廣東 廣州 510515)

目的：觀察附子多糖對抑郁大鼠行為學及海馬形態學的影響。方法:60只健康SD大鼠被隨機均分為4組,即空白對照組、模型組、附子多糖組、氟西汀組。除空白對照組外，其他各組采用慢性應激復制模型,模型復制同時給予附子多糖或氟西汀治療，連續21日后進行行為學觀察，取海馬制備切片用于蘇木精-伊紅染色。結果:與模型組比較，空白組、附子多糖組游泳不動時間縮短，差異有統計學意義(P<0.0.5)。與模型組比較，附子多糖組、氟西汀組海馬神經元細胞數量較多，排列較整齊、密集，細胞核結構較完整。結論:附子多糖對抑郁大鼠行為學有改善作用，同時具有促進神經元再生的作用。

附子多糖; 抑 郁; 慢性應激

抑郁癥對患者、家庭及社會造成巨大負擔，嚴重危害著人類的生命與健康。因此，抑郁癥的防治是當今的醫學科學研究的重大課題。目前尋找起效快、副作用少、效果好并且費用低廉的抗抑郁藥物是當務之急。近年來研究表明成年海馬區神經元再生在抑郁癥的發生、發展過程中具有重要作用[1,2]。基于此理論，我們從多種中藥成分中篩選具有促進神經元再生作用的藥物-附子多糖，而后檢測其是否具有抗抑郁作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組:SPF級Spague -Dawley(SD)大鼠60只,雄性,購自南方醫科大學實驗動物中心,飼養于南方醫科大學南方醫院藥學部動物所。將大鼠隨機分為4組,每組15只:即空白對照組、模型組、附子多糖治療組、氟西汀治療組，模型組、附子多糖治療組、氟西汀治療組采用慢性應激復制抑郁大鼠模型。

1.2 藥品及配制:附子多糖由南方醫科大學神經生物學教研室提供，氟西汀(批號：1508018)購自南方醫科大學試劑中心。附子多糖1.0g溶于30mL滅菌水備用，氟西汀15.4mg溶于30mL滅菌用水備用。

1．3 抑郁大鼠模型復制及處理:第1～21天，正常對照組大鼠正常飼養。其他接受7種不同的刺激[3,4]：夾尾(1min)、搖晃(水平往復，1次/s，共15min)、禁食(48h)、禁水(24h)，晝夜顛倒(24h)，冷水游泳(水溫4度，5min)，束縛(3h)。每天隨機給予一種刺激，每種刺激累計使用2～3次。造模同時[3]：附子多糖組大鼠腹腔注射附子多糖[100mg/(kg．d)]，氟西汀組大鼠腹腔注射氟西汀[1.54mg/(kg．d)]，余兩組大鼠腹腔注射等劑量生理鹽水，腹腔注射按0.3mL/100g給藥。

1．4 觀察指標:觀察指標包括大鼠體質量、行為學觀察、海馬組織形態學觀察。實驗結束前進行強迫游泳實驗(FST)，將大鼠置于高40cm、直徑18cm，盛有25℃自來水的玻璃缸中，水深可調整，以大鼠后足剛可觸及筒缸底卻不足以支撐身體為宜，記錄強迫游泳大鼠不動時間[5]。

1．5 統計方法:實驗數據以均數±標準差表示，數據用SPSS16.0計軟件進行處理。采用One-Way ANOVA；方差齊性時各組之間多重比較采用LSD檢驗；方差不齊時采用近似方差分析Welch法，各組之間多重比較采用Dunnett T3檢驗。以上檢驗以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 大鼠體質量:造模前各組大鼠體重量無顯著差異，造模中期、造模后期：與空白組比較，模型組、附子多糖組、氟西汀組體質量下降，差異有統計學意義(P<0.0.5)；附子多糖組、氟西汀組大鼠體質量較模型組增加。

表1 造模前后各組大鼠體重量±s)

*與空白組比較，P<0.0.5

2.2 行為學觀察：與空白組比較，模型組、氟西汀組游泳不動時間延長，差異有統計學意義(P<0.0.5)；與模型組比較，空白組、附子多糖組游泳不動時間縮短，差異有統計學意義(P<0.0.5)；與附子多糖組比較，模型組、氟西汀組游泳不動時間延長，差異有統計學意義(P<0.0.5)；氟西汀組游泳不動時間小于模型組。

表2 4組大鼠游戲不動時間±s)

*與空白組比較P<0.05；#與模型組比較P<0.05；△與附子組比較P<0.05

2.3 海馬組織形態學觀察：實驗結果顯示慢性應激引起海馬形態結構發生改變，主要表現在模型組大鼠海馬神經元細胞數量減少，排列稀疏、細胞核變形和固縮(見圖b)。空白對照組大鼠海馬神經元細胞數量較多，排列較整齊、密集，細胞核結構完整，清晰可見(見圖a)。附子多糖組和氟西汀組海馬神經元細胞的變化介于空白對照組和模型組之間(見圖c、圖d)。

圖1 海馬組織形態學觀察(蘇木精-伊紅染色,×40)

3 討 論

本實驗采用的模型是國際上公認的抑郁癥模型，經行為學評分測定，證實該模型基本模擬了抑郁癥患者的快感缺乏，興趣缺失，精神運動遲滯等抑郁表現，而且據文獻報道這種慢性應激引起的抑郁狀態及行為異常可保持數月，這就為抗抑郁劑的應用及其藥效學和作用機理的研究提供了可能。

本實驗結果表明，與空白組比較、造模后大鼠體質量下降，差異有統計學意義，經治療后附子多糖組、氟西汀組體質量較模型組增加。行為學觀察：與空白組比較、模型組游泳不動時間延長，差異有統計學意義；與模型組比較、附子多糖組游泳不動時間縮短，差異有統計學意義，提示附子對抑郁大鼠的行為有改善作用。

海馬是邊緣系統重要組成部分，參與情緒、學習和記憶、行為、免疫等的調節，它的損傷在各種應激所致疾患中起到關鍵作用。臨床和臨床前實驗研究表明海馬結構和功能的改變涉及抑郁癥的病理生理學過程，功能性影像學研究提示抑郁癥患者前額葉皮質、腹側紋狀體和海馬的體積減少[6,7]。本實驗海馬形態學觀察表明與模型組比較，附子多糖組、氟西汀組海馬神經元細胞數量較多，排列較整齊、密集，細胞核結構較完整，提示附子多糖具有促進神經元再生的作用。

[1] 江開達．抑郁防治指南障礙[M]．北京：大學醫學出版社，2007.3～4.

[2] 黃泉智,孫志高,許成勇,等.舒郁寧心湯對抑郁模型大鼠行為及海馬形態結構的影響[J].中國中醫急癥,2011,20(8):1250～1251.

[3] Yan HC， Cao X， Das M， et al. Behavioral animal models of depression[J].Neurosci Bull，2010,26( 4) : 327～ 337.

[4] Wu HH， Wang S. Strain differences in the chronic mild stress animal model of depression[J].Behav Brain Res，2010,213(1) : 94～102.

[5] Petit-demouliere B， Chenu F， Bourin M． Forced swimming test in mice：a review of antidepressant activity[J].Psychopharmacology (Berl)，2005，177(3)：245～255.

[6] Perry D，Hendler T ，Sham ay-Tsoory SG ．Projecting memories：the role of the hippocampus in emotional mentalizing[J].Neuroimage，2011,54(2 )：1669 ～1676．

[7] Niehusmann P ，Seifert G ，C lark K ，et al.Coinciden cedetection and stress modulation of spike time -dependent long-term depression in the hippocampus[J].Neumsei，2010,30(18)：6225～6235.

1006-6233(2017)06-1029-03

廣東省科技廳計劃項目，(粵科規劃字[2015]110號，編號：2014A020212398)

A

10.3969/j.issn.1006-6233.2017.06.046