剪切修復基因XPD抑制Ox-LDL誘導人臍動脈平滑肌細胞的增殖*

夏子榮， 李 青， 夏 珍， 李菊香， 洪 葵， 吳延慶， 吳清華， 程曉曙

(南昌大學第二附屬醫院心內科， 江西 南昌 330006)

剪切修復基因XPD抑制Ox-LDL誘導人臍動脈平滑肌細胞的增殖*

夏子榮， 李 青， 夏 珍， 李菊香△， 洪 葵， 吳延慶， 吳清華， 程曉曙

(南昌大學第二附屬醫院心內科， 江西 南昌 330006)

目的探討剪切修復基因——著色性干皮病D組基因(XPD)在氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)促血管平滑肌細胞增殖中的作用及機制。方法將重組質粒pEGFP-N2/XPD利用脂質體轉染人臍動脈平滑肌細胞(HUASMCs)，實驗分為空白對照組、空載質粒pEGFP-N2組、重組質粒pEGFP-N2/XPD組、Ox-LDL組、Ox-LDL+pEGFP-N2組和Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD組。用MTT法和EdU法測定各組細胞的增殖率；流式細胞術檢測各組細胞周期分布；利用Western blot法檢測XPD、caspase-3、Bcl-2 和Bax 的蛋白水平。結果Western blot實驗結果發現，與空白對照組相比，pEGFP-N2/XPD組的XPD表達增加(P<0.05)，表明轉染成功；MTT和EdU檢測結果顯示，pEGFP-N2/XPD組的細胞增殖率較空白對照組降低(P<0.05)；與Ox-LDL組比較，Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD組細胞增殖明顯被抑制(P<0.05)。流式細胞術的檢測結果顯示，與空白對照組比較，pEGFP-N2/XPD 組的S期細胞比例明顯減少(P<0.05)，G0/G1期細胞比例明顯增多(P<0.05)；與Ox-LDL組比較，Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD組的S期細胞比例減少(P<0.05)，G0/G1期細胞比例明顯增多(P<0.05)。Western blot結果顯示，與對照組比較，pEGFP-N2/XPD組的cleaved caspase-3和Bax 蛋白水平增加(P<0.05)，Bcl-2蛋白表達降低(P<0.05)；與Ox-LDL組比較，Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD組的cleaved caspase-3和Bax蛋白水平增加(P<0.01)，Bcl-2 蛋白表達降低(P<0.05)。結論XPD能抑制HUASMCs的增殖并促其凋亡，還能抑制Ox-LDL的促HUASMCs增殖作用，有可能成為抗動脈粥樣硬化治療的靶點。

著色性干皮病D組基因； 氧化低密度脂蛋白； 人臍動脈平滑肌細胞； 動脈粥樣硬化

動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)是心血管疾病發生發展的重要病理基礎，血管平滑肌細胞(vascular smooth muscle cells，VSMCs)過度增殖是促進AS發生發展的一個關鍵因素。研究表明，小劑量的氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein， Ox-LDL)即可直接或間接誘惑血管平滑肌細胞增殖，Ox-LDL在動脈粥樣硬化的形成過程中起著重要的作用[1]。因此，抑制血管平滑肌細胞增殖可能阻止AS的進程。著色性干皮病D組蛋白(xeroderma pigmentosum D, XPD)是轉錄因子(transcription factor，TF)ⅡH 9個亞基中的一個[2-3]。XPD可以激活DNA損傷檢控點，在核酸剪切修復中起重要作用，從而增加基因的穩定性，進而防止基因突變和疾病的產生[4-5]。目前對剪切修復基因XPD的研究，主要與腫瘤的發生及核酸剪切修復途徑中基因功能的缺失密切相關[6]。XPD除了在核苷酸切除修復和轉錄過程中發揮主要作用外，還參與抑制細胞增殖與促進凋亡。因此，我們設想剪切修復基因XPD參與了抑制Ox-LDL誘導的血管平滑肌細胞增殖，促進細胞凋亡，在抑制AS的形成過程中起作用，可從中尋找抗AS的新途徑。本研究將重組表達質粒pEGFP-N2/XPD轉染人臍動脈平滑肌細胞(human umbilical arterial smooth muscle cells，HUASMCs)，并給予Ox-LDL處理XPD高表達HUASMCs，觀察細胞增殖和凋亡的變化，探討XPD對Ox-LDL誘導的臍動脈血管平滑肌細胞增殖作用的影響。

材 料 和 方 法

1 材料

HUASMCs購自上海中喬新舟生物科技有限公司；本實驗用到的空載質粒pEGFP-N2及重組質粒pEGFP-N2/XPD由南昌大學第二附屬醫院消化內科張吉翔教授贈予，pEGFP-N2/XPD通過PCR反應、酶切及基因測序鑒定；DMEM 高糖培養基及胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)購自HyClone；Ox-LDL購自廣州奕源生物科技公司；DMSO購自Ameresco；細胞周期檢測試劑盒購自杭州聯科生物技術股份有限公司；脂質體LipofectamineTM2000購自 Invitrogen；抗XPD、cleave caspase-3、Bcl-2 和Bax抗體購自Cell Signaling Technology；抗β-actin 抗體購自Santa Cruz；辣根過氧化物酶標記的羊抗兔IgG抗體購自北京中杉；EdU(C10310-1)購自廣州市銳博生物科技有限公司；MTT購自北京索萊寶科技有限公司。

2 方法

2.1HUASMCs的培養 HUASMCs用含12% FBS和雙抗(1×105U/L的青霉素和100 mg/L的鏈霉素)的RPMI-1640培養基培養，置于細胞玻璃培養瓶中，于37 ℃、95%空氣濕度、5% CO2孵箱內培養。

2.2質粒轉染和Ox-LDL誘導HUASMCs增殖模型的建立 將上述培養的HUASMCs于轉染前1 d，用不含抗生素的培養基按每孔1.5×105的密度種于6孔板中。24 h后，待細胞融合度達約50%時可進行轉染。分別將每孔8 μg的空載質粒pEGFP-N2及重組質粒pEGFP-N2/XPD稀釋于250 μL不含血清的培養基中，輕輕混勻。每孔加入10 μL的LipofectamineTM2000，用不含血清培養基稀釋(每孔250 μL)，輕輕混勻后在室溫下孵育5 min。將混合稀釋好的質粒分別與稀釋好的LipofectamineTM2000輕輕混勻，室溫下孵育20 min形成復合物。用PBS清洗細胞，每孔加入2 mL不含抗生素的培養基。在培養箱中培養6 h后換有血清的培養基常規條件下繼續培養。培養48 h后提取各孔細胞的蛋白，通過Wes-tern blot實驗檢驗重組質粒pEGFP-N2/XPD的轉染效果。

將HUASMCs 以5×107/L 接種在96孔板，每孔均為100 μL，并設置調零孔(只加培養液)。加入不同濃度(0、6.25、12.5、25、50和100 mg/L)的Ox-LDL ，得出最佳濃度后給予不同作用時間(0、6、12、24和36 h)得出最佳作用時間，并設正常對照組，每組6個平行孔。實驗分為空白對照組、空載質粒pEGFP-N2組、重組質粒pEGFP-N2/XPD組、Ox-LDL組、Ox-LDL+pEGFP-N2組和Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD組。質粒轉染組細胞均取用轉染后48 h的細胞。

2.3MTT法和EdU法檢測細胞增殖率 將對數生長期的 HUVSMCs以適量(因培養時間不同，確保行MTT檢測時細胞鋪至80%左右)接種于5塊 96孔板，每孔均為100 μL，并設置一調零孔(加等量培養液)，加入MTT約4 h后，棄上清液，每孔再加入 150 μL的 DMSO，用錫箔紙遮蓋避光，在搖床上振蕩10 min，使紫藍色結晶充分溶解。酶標儀在492 nm 處測定各孔吸光度(A)值，計算細胞存活率，細胞存活率(%)=A實驗組/A對照組×100%。

同時采用EdU法檢測Ox-LDL對HUASMCs增殖的影響。以每孔4×103個細胞的密度種于96孔板，細胞貼壁后根據不同分組，給予重組質粒pEGFP-N2/XPD及空載體轉染，根據試劑盒進行EdU標記、細胞固定化及DNA染色，在熒光顯微鏡下計算染色細胞核占相應總細胞的百分比，每組6個復孔。

2.4流式細胞術檢測細胞周期 用PBS液洗滌細胞2次，吸去殘余液體。用不含EDTA的胰酶消化(注意胰酶不可過度消化細胞)，加培養基終止消化，獲得約2×105～1×106的細胞數量，用500 μL孵育緩沖液懸浮細胞，至暗室中，加1 mL試劑A及10 μL試劑B，振蕩5～10 s，室溫下避光反應30 min后，使用流式細胞術進行細胞周期檢測。

2.5Western blot法檢測蛋白水平 在各組試劑作用24 h后吸凈6孔板內培養基，預冷PBS沖洗3次，加入細胞裂解200 μL，提取總蛋白，BCA法測定蛋白質濃度后，以每孔100 μg上樣，經12% SDS-PAGE分離蛋白，蛋白轉膜，5%脫脂奶粉-TBST封閉 2h，分別用抗XPD、caspase-3、Bcl-2、Bax和β-actin的 I 抗(1∶1 000)孵育，4 ℃過夜，再加 II 抗孵育2 h，0.1% Tween-TBS洗3次，每次10 min顯色后置入Bio-Rad Image Lab成像系統中曝光成像。將圖片導出用凝膠圖像處理系統分析每組條帶，結果表示為：(目的條帶灰度值-背景灰度值)/β-actin的灰度值。

3 統計學處理

以上實驗均重復6次。采用SPSS13.0 統計學軟件進行數據分析。數據以均數±標準差(mean±SD)表示，各組數據總體差異的比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA)，兩兩比較采用SNK-q檢驗。以P<0.05 為差異有統計學意義。

結 果

1 重組質粒pEGFP-N2/XPD的轉染效果

HUASMCs轉染質粒48 h后收集細胞，提取細胞蛋白，進行Western blot 檢測，結果顯示，與空白對照組相比，重組質粒pEGFP-N2/XPD組中XPD表達明顯增高(P<0.01)，說明重組質粒 pEGFP-N2/XPD轉染成功，見圖1。

Figure 1. The protein expression of XPD in HUASMCs after plasmid transfection determined by Western blot. Mean±SD.n=6.*P<0.05vscontrol group.

圖1質粒轉染后XPD在HUASMCs中的表達

2 Ox-LDL和XPD對HUASMCs增殖的影響

不同濃度的Ox-LDL孵育HUASMCs，使用MTT和EdU法檢測細胞增殖率，各組比較50 mg/L效果最佳，50 mg/L與100 mg/L比較差異無統計學顯著性。采用50 mg/L Ox-LDL孵育HUASMCs 6、12、24和36 h，24 h組效果最佳，24 h與36 h比較差異無統計學顯著性，因此后續實驗我們選擇50 mg/L Ox-LDL孵化HUASMCs 24 h構建模型，見圖2。

EdU實驗結果可見，Ox-LDL處理組的細胞增殖率明顯高于空白對照組(P<0.05)，而pEGFP-N2/XPD組的細胞增殖率明顯低于空白對照組(P<0.05)；Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD組細胞增殖明顯低于Ox-LDL組(P<0.05)；空白對照組與空載質粒pEGFP-N2組細胞增殖的差異無統計學差異；Ox-LDL處理組與Ox-LDL+pEGFP-N2組細胞增殖差異無統計學意義，見圖3。

3 流式細胞術檢測Ox-LDL和XPD對細胞周期分布的影響

與對照組比較，pEGFP-N2/XPD組的S期細胞比例減少(P<0.05)，G0/G1期細胞比例明顯增多(P<0.05)；與對照組比較，Ox-LDL組的S期細胞比例增多(P<0.05)，G0/G1期細胞比例明顯減少(P<0.05)；與Ox-LDL組比較，Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD組S期細胞比例減少(P<0.05)，G0/G1期細胞比例明顯增多(P<0.05)；對照組與空載質粒pEGFP-N2組之間相比差異無統計學顯著性；Ox-LDL組與Ox-LDL+pEGFP-N2組及之間相比差異沒有統計學顯著性，見圖4及表1。

Figure 2. Dose-dependent and time-dependent effects of Ox-LDL on the proliferation of HUASMCs. A: MTT assay was used to detect the viability of the cells exposed to various concentrations of Ox-LDL; B: MTT assay was used to detect the viability of the cells incubated with Ox-LDL (50 mg/L) for various periods; C and D: EdU assay was used to detect the cell proliferation (×100). Mean±SD.n=6.*P<0.05vscontrol (0 mg/L or 0 h) group；#P<0.05vs25 mg/L Ox-LDL group；△P<0.05vs12 h group.

圖2Ox-LDL促HUASMCs增殖作用的時間和劑量相關性

Figure 3. The proliferation ability of the HUASMCs transfected with pEGFP-N2/XPD and treated with Ox-LDL was detected by EdU assay (×100). Mean±SD.n=6.*P<0.05vscontrol group；#P<0.05vsOx-LDL group.

圖3EdU檢測pEGFP-N2/XPD轉染和Ox-LDL處理后HUASMCs增殖能力的變化

Figure 4. The cell cycle distribution of the HUASMCs analyzed by flow cytometry.

圖4流式細胞術檢測各組細胞周期的分布

表1Ox-LDL與XPD過表達對HUASMCs細胞周期的影響

Table 1. The changes of cell cycle distribution of HUASMCs transfected with pEGFP-N2/XPD and treated with Ox-LDL (%. Mean±SD.n=6)

GroupG0/G1phaseSphaseControl62.31±3.6123.12±2.47pEGFP-N261.57±3.2322.75±2.53pEGFP-N2/XPD76.82±4.83*15.68±3.46*Ox-LDL51.19±3.95*38.42±3.63*Ox-LDL+pEGFP-N250.76±3.6737.91±3.97Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD70.96±4.73#21.09±4.02#

*P<0.05vscontrol group；#P<0.05vsOx-LDL group.

4 Western blot法檢測cleaved caspase-3、Bcl-2和Bax的蛋白水平

與空白對照組相比，pEGFP-N2/XPD組HUVSMCs中 Bax及cleaved caspase-3蛋白表達上調(P<0.05)，Bcl-2蛋白表達顯著下調(P<0.05)；與對照組比較，Ox-LDL組中Bax及cleaved caspase-3蛋白表達下調(P<0.05)，Bcl-2蛋白表達上調(P<0.05)；與Ox-LDL組比較，Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD組中Bax及cleaved caspase-3蛋白表達上調(P<0.05)，Bcl-2蛋白表達下調(P<0.05)；對照組與pEGFP-N2組之間相比無顯著差異；Ox-LDL組與Ox-LDL+pEGFP-N2組及之間相比無顯著差異，見圖5、6。

討 論

近年來研究發現，在高齡、高血脂、糖尿病及吸煙等AS的各種危險因素下，VSMCs過度增殖是導致AS發生發展的一個極其重要的環節[7]。研究表明，小劑量的Ox-LDL即可直接或間接導致血管平滑肌細胞增殖，因此Ox-LDL 在動脈粥樣硬化的形成過程中起著十分重要的作用[8-9]。本研究使用Ox-LDL刺激HUASMCs增殖，模擬AS的發生，通過MTT和EdU實驗檢測細胞增殖率比值，發現50 mg/L Ox-LDL孵化HUASMCs 24 h增殖效果最佳。

研究發現XPD在參與機體DNA損傷修復并維持基因組穩定性中起十分重要作用，XPD是TFⅡH的組份之一，TFⅡH在哺乳動物的轉錄起始和核酸剪切修復中起重要作用，XPD作為一種ATP依賴的DNA解螺旋酶，是連接TFⅡH核心亞基與CDK-活化蛋白激酶的橋梁，參與單核苷酸剪切修復途徑。XPD的表達及功能缺陷可能導致機體不能有效修復突變基因，同時具有上調癌基因及下調抑癌基因的作用功能，促進腫瘤的發生發展[10]。XPD除了在核苷酸切除修復和轉錄過程中發揮主要作用外，還參與了抑制血管平滑肌細胞增殖與促進凋亡[11]。

本文假設XPD能抑制Ox-LDL介導的HUASMCs過度增殖，同時促進其凋亡。因此將重組質粒pEGFP-N2/XPD轉染HUASMCs后，使XPD表達升高，給予Ox-LDL 刺激HUASMCs增殖，觀察HUASMCs的凋亡與增殖變化情況。結果顯示，Ox-LDL能抑制HUASMCs的凋亡并促進其增殖；但XPD高表達能抑制Ox-LDL的促增殖及抗凋亡作用。

Figure 5. The protein expression of Bcl-2， Bax and Bcl-2/Bax in HUASMCs transfected with pEGFP-N2/XPD and treated with Ox-LDL. Mean±SD.n=6.*P<0.05vscontrol group;#P<0.05vsOx-LDL group.

圖5pEGFP-N2/XPD轉染和Ox-LDL處理后HUASMCs中Bcl-2和Bax蛋白表達水平及Bcl-2/Bax的變化

Figure 6. The protein level of cleaved caspase-3 in HUASMCs transfected with pEGFP-N2/XPD and treated with Ox-LDL. Mean±SD.n=6.*P<0.05vscontrol group；#P<0.05vsOx-LDL group.

圖6pEGFP-N2/XPD轉染和Ox-LDL處理后HUASMCscleavedcaspase-3蛋白水平的變化

本研究使用Ox-LDL刺激HUASMCs增殖，模擬AS的發生。上調XPD表達能抑制Ox-LDL的促進增殖及抑制凋亡作用，這種現象提示我們可能通過上調VSMCs中的XPD表達來控制及治療AS的發生及發展。抑凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax在凋亡的各個階段起調節作用，是參與細胞凋亡調控關鍵的基因，Bcl-2表達上調和Bax表達下調可以認為是凋亡被抑制[12]。本文發現在HUASMCs中，Ox-LDL可下凋Bax的表達并上調Bcl-2的表達；XPD高表達能上調Bax及下調Bcl-2 ，并且抑制Ox-LDL的上調Bcl-2及下調Bax的作用。

Caspase-3在細胞凋亡中發揮極其重要的作用。Caspase-3被激活是細胞凋亡發生的標志酶。而Bcl-2 蛋白可以通過抑制細胞色素C 與Apof-1結合從而抑制caspases 活化，通過抑制caspase-3過表達誘導的細胞凋亡[13-14]。同時caspase-3 具有裂解Bcl-2蛋白的作用，產生的裂解產物可激活下游caspase 而導致級聯反應。本實驗結果發現，高表達XPD能抑制Ox-LDL誘導的Bcl-2上調及caspase-3下調。XPD促進HUASMCs凋亡作用可能與上調caspase-3有關。

綜上所述，XPD能抑制HUASMCs的增殖并促進其凋亡，還能抑制Ox-LDL的促HUASMCs增殖和抗凋亡作用，可能成為治療AS新的靶點，為AS治療提供新的思路。

[1] Liao L, Zhou Q, Song Y, et al. Ceramide mediates Ox-LDL-induced human vascular smooth muscle cell calcification via p38 mitogen-activated protein kinase signaling[J]. PLoS One, 2013, 8(12):e82379.

[2] Gu Y, Patterson AV, Atwell GJ, et al. Roles of DNA repair and reductase activity in the cytotoxicity of the hypo-xia-activated dinitrobenzamide mustard PR-104A[J]. Mol Cancer Ther, 2009, 8(6):1714-1723.

[3] Houten BV, Kuper J, Kisker C. Role of XPD in cellular functions: to TFIIH and beyond[J]. DNA Repair (Amst), 2016, 44:136-142.

[4] de Vries-van der Weij J, Toet K, Zadelaar S, et al. Anti-inflammatory salicylate beneficially modulates pre-existing atherosclerosis through quenching of NF-κB activity and lowering of cholesterol[J]. Atherosclerosis, 2010, 213(1):241-246.

[5] Shkarupa VM, Mishcheniuk OY, Henyk-Berezovska SO, et al. Polymorphism of DNA repair geneXPDLys751Gln and chromosome aberrations in lymphocytes of thyroid cancer patients exposed to ionizing radiation due to the Chornobyl accident[J]. Exp Oncol, 2016, 38(4):257-260.

[6] Yu HP, Wang XL, Sun X， et al. Polymorphisms in the DNA repair geneXPDand susceptibility to esophageal squamous cell carcinoma[J]. Cancer Genet Cytogenet, 2006, 154(1):10-15．

[7] Ramji DP, Davies TS. Cytokines in atherosclerosis: key players in all stages of disease and promising therapeutic targets[J]. Cytokine Growth Factor Rev, 2015, 26(6):673-685.

[8] Agrawal S， Singh SK, Singh N, et al. Oxidation of LDL: role in atherosclerosis[J]. Int J Geriatrics Gerontol, 2009, 6(1):86-101.

[9] Maiolino G, Rossitto G, Caielli P, et al. The role of oxidized low-density lipoproteins in atherosclerosis: the myths and the facts[J]. Mediators Inflamm， 2013, 2013:714653.

[10] Constantinescu-Aruxandei D, Petrovic-Stojanovska B, Penedo JC, et al. Mechanism of DNA loading by the DNA repair helicase XPD[J]. Nucleic Acids Res, 2016, 44(6):2806-2815.

[11] 丁 浩， 李菊香， 洪 葵， 等. 人著色性干皮病D組基因對白細胞介素-6促進人血管平滑肌細胞增殖作用的影響[J]. 中國病理生理雜志, 2011, 27(4):625-631.

[12] Vela L, Gonzalo O, Naval J, et al. Direct interaction of Bax and Bak with Bcl-2 homology domain-3 (BH3)-only proteins in living cells revealed by fluorescence complementation[J]. J Biol Chem, 2013, 288(7):4935-4946.

[13] Wu R, Tang S, Wang M, et al. MicroRNA-497 induces apoptosis and suppresses proliferation via the Bcl-2/Bax-caspase-9-caspase-3 pathway and cyclin D2 protein in HUVECs[J]. PLoS One, 2016, 11(12):e0167052.

[14] Wang DH, Hu JR, Wang LY, et al. The apoptotic function analysis of p53, Apaf1, Caspase3 and Caspase7 du-ring the spermatogenesis of the Chinese fire-bellied newtCynopsorientalis[J]. PLoS One, 2012, 7(6):e39920.

Effect of xeroderma pigmentosum group D gene on proliferation of human umbilical arterial smooth muscle cells induced by Ox-LDL

XIA Zi-rong, LI Qing, XIA Zhen, LI Ju-xiang, HONG Kui, WU Yan-qing, WU Qin-hua, CHENG Xiao-shu

(DepartmentofCardiovascularMedicine,TheSecondAffiliatedHospitalofNanchangUniversity,Nanchang330006,China.E-mail:ljx912@126.com)

AIM: To investigate the effects of xeroderma pigmentosum group D (XPD) gene on the proliferation of human umbilical arterial smooth muscle cells (HUASMCs) induced by oxidized low-density lipoprotein (Ox-LDL).METHODSThe recombinant plasmid pEGFP-N2/XPD was transfected into HUASMCs by liposome. The cells were divided into blank control group, pEGFP-N2 group, pEGFP-N2/XPD group, Ox-LDL group, Ox-LDL+pEGFP-N2 group and Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD group. The proliferation rate of the cells was detected by MTT and EdU assays. The apoptotic rate and cell cycle distribution were analyzed by flow cytometry. The protein levels of XPD, caspase-3, Bcl-2 and Bax were determined by Western blot.RESULTSCompared with blank control group, the expression of XPD was increased in pEGFP-N2/XPD group (P<0.05). According to the results of MTT and EdU assays, the cell proliferation in pEGFP-N2/XPD group was reduced compared with blank control group (P<0.05). Compared with Ox-LDL group, the cell proliferation in Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD group was significantly inhibited (P<0.05). According to the results of flow cytometry, the cell proportion of S phase decreased and the G0/G1-phase cell proportion increased significantly in pEGFP-N2/XPD group and Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD group compared with blank control group and Ox-LDL group, repectively (P<0.05). Compared with blank control group and Ox-LDL group, the protein level of Bcl-2 decreased and the protein levels of Bax and cleaved caspase-3 increased in pEGFP-N2/XPD group and Ox-LDL+pEGFP-N2/XPD group, respectively (P<0.05).CONCLUSIONXPD inhibits the proliferation of HUASMCs and promotes their apoptosis, and reduces the promoting effect of Ox-LDL on the proliferation of HUVSMCs. XPD may be the target for treatment of atherosclerosis.

Xeroderm pigmentosum group D gene; Oxidized low-density lipoprotein; Human umbilical arterial smooth muscle cells; Atherosclerosis

1000- 4718(2017)12- 2238- 07

2017- 01- 18

2017- 08- 08

江西省自然科學基金資助項目(No. 2010GZY0254)

△通訊作者Tel: 13657092311; E-mail: ljx912@126.com

R543.1； R363.2

A

10.3969/j.issn.1000- 4718.2017.12.020

(責任編輯： 陳妙玲， 羅 森)