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藏藥抗缺氧含片提高缺氧耐受力功能實驗研究

2017-12-22 02:41:45趙可惠尼瑪次仁頓珠次仁
中國民族醫藥雜志 2017年5期
關鍵詞:小鼠劑量差異

趙可惠 尼瑪次仁 頓珠次仁 王 靜 張 藝

(1.成都中醫藥大學民族醫藥學院,四川 成都 611137;2.西藏藏醫學院,西藏 拉薩 850000)

*通訊作者

藏藥抗缺氧含片提高缺氧耐受力功能實驗研究

趙可惠1尼瑪次仁2*頓珠次仁2王 靜1張 藝1

(1.成都中醫藥大學民族醫藥學院,四川 成都 611137;2.西藏藏醫學院,西藏 拉薩 850000)

目的:觀察不同提取方式的抗缺氧含片對提高小鼠缺氧耐受力功能的影響。方法根據《保健食品檢驗與評價技術規范》(2003年版)中的3個動物實驗評價抗缺氧含片的耐缺氧功效。結果抗缺氧含片具有提高小鼠常壓耐缺氧存活時間,及提高小鼠急性腦缺血性缺氧喘氣時間的作用。結論抗缺氧含片具有提高缺氧耐受力的功能。

抗缺氧含片;缺氧耐受力;功能試驗

抗缺氧含片是以紅景天為主要原料制成的保健食品。紅景天是景天科(Crassulaceae)紅景天屬(Rhodiola L.)植物,大多數生長在海拔2500~5000m的高山環境,其根莖熬水、泡酒在民間多用于消除疲勞、抵御嚴寒[1]。藏醫經典著作《四部醫典》記載紅景天“性平、清熱、滋補元氣、利氣養血、能補腎、主周身乏力”。紅景天中的重要成分紅景天苷[(4-羥基-苯基) -β-D-吡喃葡萄糖苷]被證實具有抗衰老、抗疲勞、抗缺氧及心、腦、肝、腎、神經系統等的保護作用[2]。目前在提高缺氧耐受力的保健食品中,大部分以紅景天為主要原料藥材。課題組以藏醫名家尼瑪次仁的臨床經驗保健食品處方為基礎,對西藏藏醫學院提供的抗缺氧含片提取工藝A組(水提)和抗缺氧含片提取工藝B組(原藥),按照《保健食品檢驗與評價技術規范》要求,開展提高缺氧耐受力功能評價實驗。為抗缺氧含片取得國家保健食品批準文號、豐富保健食品種類提供依據。

1 材料與方法

1.1 樣品:受試藥物抗缺氧含片提取工藝A組及提取工藝B組,由西藏藏醫學院提供。陽性藥物為大株紅景天膠囊,由江蘇康緣藥業股份有限公司提供,國藥準字:Z20040023,30粒/盒,批號150402。

1.2 動物:清潔級雄性昆明小鼠,體質量18~22g由四川省成都達碩生物科技有限公司提供,生產許可證號為SCXK(川)2015-030。飼料由同一單位提供。

1.3 儀器:LQ-A6002電子天平,瑞安市安特稱重設備有限公司;Sartorius BP121s電子天平,北京賽多利斯科學儀器有限公司(精確度0.0001g)。

1.4 試劑:亞硝酸鈉(成都市科龍化工試劑廠),鈉石灰(北京德爾利鈉石灰廠);凡士林。

1.5 劑量選擇:動物適應性喂養3d后,將實驗動物隨機分為8組:空白對照組;陽性藥物組(0.912 g/kg·BW,約相當于人體推薦量的12倍);提取工藝A、B的高、中、低劑量組(劑量分別為6.6 g/kg·BW,3.3 g/kg·BW,1.65 g/kg·BW,約相當于人體推薦量的24倍、12倍、6倍);提取工藝B高、中、低劑量組(劑量分別為6.6 g/kg·BW,3.3 g/kg·BW,1.65 g/kg·BW,約相當于臨床用量的12倍、6倍、3倍),每組10只。灌胃1次/d,灌胃量為20mL/kg·BW,連續給藥7天d,每3天稱量1次體重。

1.6 試驗方法

1.6.1 常壓耐缺氧試驗:于末次灌胃后1h,將各組小鼠分別放入盛有10g鈉石灰的250mL磨口瓶內(每瓶1只),用凡士林封瓶口,蓋嚴,使之不漏氣,立即計時,以呼吸停止為指標,記錄小鼠因缺氧而死亡的時間。

1.6.2 亞硝酸鈉中毒存活試驗:于末次灌胃給藥后1h,各組動物按20 mL/kg·BW腹腔注射2%(m/v)亞銷酸鈉溶液,立即計時,記錄動物存活時間。

1.6.3 急性腦缺血缺氧試驗:于末次灌胃給藥后1h,動物用乙醚淺麻醉后,用剪刀自頸部斷頭,立即按秒表記錄小鼠斷頭后至張口喘氣停止時間

1.7 統計學方法: 試驗數據統計采用SPSS 19.0軟件處理。采用單因素方分析比較組間差異,檢驗水準α=0.05,若組間差異有統計學意義,且方差齊用Dunnett法進行兩兩比較;若方差不齊,用Dunnett’s T3法進行兩兩比較。

2 結果與分析

2.1 常壓耐缺氧試驗: 結果如表1所示,試驗前后動物體質量無顯著差異(P>0.05)。與空白對照組相比各實驗組存活時間延長有顯著差異(P<0.05)。

表1 抗缺氧含片小鼠常壓耐缺氧試驗結果

2.2 亞硝酸鈉中毒存活試驗:結果如表2所示,試驗前后動物體質量無顯著差異(P> 0.05)。與空白對照組相比各實驗組存活時間延長除B中劑量組有顯著差異(P<0.05)外,其余組別均無顯著差異(P>0.05)。

表2 抗缺氧含片小鼠亞硝酸鈉中毒存活試驗結果

2.3 急性腦缺血缺氧試驗:結果如表3所示,試驗前后動物體質量無顯著差異(P>0.05)。與空白對照組相比各實驗組存活時間延長有顯著差異(P<0.05)。

表3 抗缺氧含片小鼠急性腦缺血缺氧試驗結果

3 討論

本實驗的受試品是2種不同提取方式制成的抗缺氧含片,在常壓缺氧試驗及急性腦缺血性缺氧試驗中,受試品各組與空白組相比,差異明顯,有統計學意義;而亞硝酸鈉中毒存活試驗中,只有B組中劑量P<0.05,具有統計學意義。在已得到的試驗結果中,B組優于A組,B組的高劑量及中劑量效果最優,故B組小鼠推薦劑量為3.3~6.6 g/kg。

根據保健食品評價標準[3],3項提高缺氧耐受力功能試驗有2項結果為陽性,表明該2種受試品具有提高缺氧耐受力功能的作用。

[1]劉明成,張得鈞.紅景天藥理作用研究進展[J].亞太傳統醫藥,2013,9(6):65-69.

[2] 韓雪嬌,郭娜,朱美宣,等.紅景天苷藥理作用及其作用機理研究進展[J].中國生化藥物雜志,2015,35:171-175.

[3] 中華人民共和國衛生部.保健食品檢驗與評價技術規范[Z].2003.

R291.4

B

1006-6810(2017)05-0062-03

2017年2月18日收稿

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