薄層色譜法檢查藏藥二十味沉香丸中士的寧的限量方法研究

格 央 貢 布

(西藏自治區藏醫藥研究院，西藏 拉薩 850000)

薄層色譜法檢查藏藥二十味沉香丸中士的寧的限量方法研究

格 央 貢 布

(西藏自治區藏醫藥研究院，西藏 拉薩 850000)

目的：建立二十味沉香丸中士的寧的限量檢查方法。方法用薄層色譜法對該處方中的士的寧做了限量檢查。結果薄層斑點清晰，重現性好，空白對照無干擾。結論該方法簡單易行，可以有效控制本處方中的士的寧限量。

藏藥；馬錢子；士的寧；薄層色譜法；限量檢查

二十味沉香丸是由沉香、丁香、肉豆蔻、藏木香、馬錢子(制)等20味藥材加工制成的復方制劑，為藏族經典驗方，已有300多年的歷史。具有調和氣血，安神鎮靜之功效。用于偏癱，高血壓，神志紊亂，口眼歪斜，肢體麻木，失眠。原方收載于《中華人民共和國藏藥標準》(1995年)中，標準中無對士的寧的限量檢查，為了保證用藥安全性，故對本方中的士的寧限量檢查方法，做了如下研究。

1 儀器與試藥

士的寧對照品(中國食品藥品檢定研究院，11075-200306)；二十味沉香丸、空白對照(由西藏自治區藏醫院制劑室提供)；濃氨試液、三氯甲烷、硅膠G薄層板(青島海洋化工廠分廠)。試劑均為分析純，水為純化水。

2 方法與結果

2.1 供試品溶液的制備：取本品適量，研細，取細粉10g，置具塞錐形瓶中，精密加三氯甲烷50mL，濃氨試液4mL，密塞，輕輕振搖，稱定重量。放置24h，再稱定重量，用三氯甲烷補足減失的重量，充分振搖，濾過，全部濾液置分液漏斗中，用硫酸溶液(3→100)振搖提取5次，每次20mL，合并硫酸提取液，加濃氨試液調節pH值至9～10，用三氯甲烷振搖提取5次，每次20mL，合并三氯甲烷提取液，蒸干，放冷，殘渣加三氯甲烷2.5mL使溶解，作為供試品溶液。

2.2 空白對照液的制備：取空白對照藥10g，按上述方法制成空白對照液、空白加對照品溶液。

2.3 對照品溶液的制備：取士的寧對照品，加三氯甲烷制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液。

2.4 方法： 照薄層色譜法(中國藥典，2010年，一部附錄VI B) 試驗，精密吸取上述供試品溶液、空白對照液各3μL和對照品溶液5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇(16.5:2.5)(濃氨水飽和層析缸)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，出現的斑點小于對照品的斑點，且顏色淺于對照品斑點。空白對照未見干擾。結果見圖1。

3 方法學考察

3.1 重現性試驗：取6批本品，依法檢查。結果薄層色譜斑點清晰，且供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，出現的斑點小于對照品的斑點，且斑點顏色淺于對照品斑點。表明方法重現性良好。見圖2。

3.2 專屬性試驗：照薄層色譜法(中國藥典，2010年，一部附錄VI B ) 試驗。精密吸取供試品溶液、空白對照液各3μL和對照品溶液5μL，按2.4項下方法操作，檢視斑點大小及顏色。結果在空白對照液色譜中，與對照品溶液色譜斑點相同位置上不出現斑點，其他斑點則與供試品溶液色譜相同，說明空白無干擾，方法專屬性好。見圖3。

3.3 回收試驗：取空白樣品10g，加入對照品溶液1mL(2.5mg/mL)，照供試品溶液制備方法制備溶液，分別精密吸取該溶液1、2、3、4、5μL以及對照品溶液5μL，依法檢查。溶液色譜中，在與對照品色譜斑點相應位置上顯相同顏色的斑點，且斑點顏色隨點樣量增加而加深。見圖4。

4 討論

4.1 馬錢子為常用藥材，具通絡止痛，散結消腫之功效。其主要成分亦即主要毒性成分士的寧(番木鱉堿)，成人用5～10mg即可發生中毒現象，30mg可致死。本品排泄緩慢，有蓄積作用，故使用不宜過長。藥典中，對其含量有限度要求，本文采用薄層色譜法對其限度進行控制，方法簡單易行，對本方質量控制有較好的效果。

4.2 提取方法的選擇：用堿性三氯甲烷超聲提取的方法，雖操作簡便，但薄層色譜圖中供試品色譜斑點不清晰，受其他組分干擾明顯，且不易點樣。因此，參照《中國藥典》中仁青芒覺[含量測定]項下的提取方法提取供試品，供試品色譜斑點清晰，未見其他成分干擾，故確定采用該提取方法。

4.3 展開系統的選擇：根據文獻報道，試驗了5種展開系統。Ⅰ甲苯-丙酮-乙醇-濃氨試液(4:5:0.6:04)；Ⅱ乙酸乙酯-甲醇-濃氨水(16.5:2.5:1)；Ⅲ 乙酸乙酯-甲醇(16.5:2.5)，濃氨水飽和層析缸；Ⅳ乙酸乙酯-甲醇-濃氨水(17:2:1)、Ⅴ環己烷-三氯甲烷-甲醇(7.5:4:1)等展開系統。因乙酸乙酯-甲醇(16.5:2.5)，濃氨水飽和層析缸展開效果最佳，選Ⅲ系統。其他展開系統分離效果尚可，但受溫度影響較大，致Rf值略小。

4.4 點樣量限度的確定：參考《中藥大辭典》：成人用鹽酸士的寧5-10mg即可發生中毒現象，確定士的寧對照品的點樣量為5μL(1mg/mL)，供試品溶液的點樣量3μL(4g/mL)，即相當于2日服用量與對照品斑點對比。實驗結果表明，3μL供試液斑點與5μL對照品斑點比較，供試液斑點比對照品斑點小，所示本品士的寧用量在安全范圍以內。

[1]江蘇新醫學院.中藥大辭典[M].上海：上?？茖W技術出版社，1986:293.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].一部,北京：中國醫藥科技出版社，2010.

[3]田薇，陳朝暉，等，薄層色譜法檢查仁青芒覺膠囊中烏頭堿、士的寧的限量[J].甘肅省化學會成立六十周年學術報告會暨二十三屆年會論文集.

[4]孫桂明,史丁一,張曉燕,等.對2005年版《中國藥典》一部馬錢子及其制劑質量標準的幾點修訂建議[J].中國藥品標準，2006,7(5).

格央，女，36歲，主管藥師，現供職于西藏自治區藏醫藥研究院，主要從事藏藥研究。

R291.4

B

1006-6810(2017)05-0040-03

2017年1月13日收稿