Ki—67與非小細胞肺癌患者EGFR突變的關系及其對預后的影響

張煜坤++++++戈偉

[摘要] 目的 探討Ki-67LI值與非小細胞肺癌患者表皮生長因子受體（EGFR）基因突變的關系及預測價值，分析Ki-67LI值對非小細胞肺癌患者生存期的影響。 方法 回顧性分析武漢大學人民醫院2015年7月～2016年7月經病理證實為非小細胞肺癌患者并行EGFR突變檢測的共100例，分析Ki-67LI值與EGFR突變關系及其與患者預后的關系。 結果 行EGFR突變檢測共100例，其中發生突變共57例，突變率為57%。女性、非吸煙以及病理類型為腺癌的患者更容易出現EGFR突變（P < 0.01），EGFR突變情況與Ki-67有關，Ki-67LI值升高更易出現在EGFR突變陽性患者中（P < 0.05），并且Ki-67LI值是影響非小細胞肺癌患者預后的獨立因素（OR=2.503；95%CI：1.077～5.815；P=0.033）。 結論 Ki-67LI值可以預測非小細胞肺癌患者的預后，并且與非小細胞肺癌患者EGFR突變相關。

[關鍵詞] 非小細胞肺癌；Ki-67；EGFR突變；預后

[中圖分類號] R734.2 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2017）11（b）-0079-04

[Abstract] Objective To investigate the relationship between Ki-67LI and EGFR gene mutation in non-small cell lung cancer （NSCLC）， as well as to further analyze the effect of Ki-67LI on the survival of patients with non-small cell lung cancer （NSCLC）. Methods From July 2015 to July 2016， total of 100 patients with non-small cell lung cancer were treated in Renmin Hospital of Wuhan University. And 100 patients were examined by EGFR mutation. The relationship between Ki-67LI and EGFR mutation and its relationship with prognosis were investigated. Results A total of 100 cases were detected by EGFR mutation， among them， 57 cases were mutated and the mutation rate was 57%， the incidence of which was more frequent in women， non-smokers， adenocarcinoma patients （P < 0.01）， and also found that EGFR mutations were associated with Ki-67， Ki-67LI values were more likely to occur in patients with EGFR mutations-positive （P < 0.05）， and Ki-67LI was also an independent factor in the prognosis of patients with non-small cell lung cancer （OR=2.503， 95%CI： 1.077-5.815， P=0.033）. Conclusion The value of Ki-67LI can independently predict the prognosis of non-small cell lung cancer patients， which is has a close relationship with EGFR mutations.

[Key words] Non-small cell lung cancer； Ki-67； EGFR mutation； Prognosis

肺癌是全球致死率最高的惡性腫瘤，已經超過乳腺癌成為發達國家女性癌癥死亡的主要原因[1]。非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）占所有肺癌病例的75%～80%，總體5年生存率低于15%[2]。隨著對分子靶向治療的深入研究，分子靶向治療在表皮生長因子（NSCLC）治療中扮演了十分重要的角色。尤其是針對EGFR突變的酪氨酸激酶抑制劑（TKI）的出現，使EGFR突變陽性患者的中位總生存期>2年[3]。EGFR是酪氨酸激酶活性的細胞膜受體，主要與腫瘤細胞的增殖、遷移、血管生成、抑制凋亡及藥物抵抗有關[4]。EGFR敏感突變被確定為預測EGFR-TKIs療效最可靠的預測標志[5]，所以篩選相關標志物預測EGFR突變是非常有必要的。Ki-67指數是惡性腫瘤增生的標志物[6]，目前對于Ki-67標記指數（labeling index，LI）能否預測EGFR基因突變狀態尚未明確。因此，本文回顧性分析我院NSCLC患者140例，來進一步探討Ki-67標記指數水平與EGFR基因突變的關系及對患者生存期的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年7月～2016年7月在武漢大學人民醫院經病理證實為NSCLC患者并行EGFR突變檢測的100例患者，其中男性41例，女性59例。按照病理類型不同分組，其中腺癌60例，鱗癌33例，其他類型7例。按照有無吸煙史分類，吸煙45例，不吸煙55例。行EGFR突變檢測的患者中年齡<60歲45例，≥60歲55例。TNM分期標準，其中Ⅰ～Ⅱ期60例，Ⅲ～Ⅳ期40例。入選標準：①經病理診斷明確；②抗腫瘤治療前接受胸部CT掃描、腦CT或MR、腹部B 超或CT或全身ECT骨掃描檢查（部分患者行PET-CT檢查）進行了腫瘤基線的評估；③未接受任何放、化療等抗癌治療；④生存期大于1個月；⑤病例及隨訪資料完整，且經過被研究對象或其家屬知情同意。排除標準：①合并有其他原發腫瘤者；②病理診斷組織學分類不清者；③病理診斷為小細胞肺癌者。endprint

1.2 隨訪

隨訪時間自診斷明確之日起至末次隨訪或死亡時間，隨訪方式包括門診復查、電話和信件隨訪。總生存率（overall survival rate，OS）從診斷明確之日至隨訪終止日期或死亡，以月為單位；末次隨訪時間為2017年7月。

1.3 統計學方法

采用SPSS 13.0統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗，應用Kaplan-Meier法計算生存率，多因素分析采用Cox比例風險模型進行，以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 EGFR突變與臨床病理因素之間的關系

全組患者行EGFR突變檢測共100例，發生突變率為57%（57/100）。其中女性發生EGFR突變率為43%（43/100），男性發生EGFR突變率為14%（14/100），未吸煙者發生EGFR突變率為41%（41/100），吸煙者發生EGFR突變率為16%（16/100）。病理類型中，腺癌患者發生EGFR突變率為48%（48/100），鱗癌患者發生EGFR突變率為6%（6/100），其他類型患者發生EGFR突變率為3%（3/100）。女性、非吸煙及腺癌患者的EGFR突變率明顯高于男性、未吸煙及鱗癌患者，差異均有統計學意義（P < 0.01），而不同年齡、病變部位及分期患者的EGFR突變率比較差異無統計學意義（P > 0.05）。

2.2 Ki-67與EGFR突變之間的關系

結果顯示，Ki-67LI值升高更易出現在EGFR突變陽性患者中（P < 0.05），見表1，其與EGFR狀態的關系見圖1。

2.3 Ki-67標記指數對NSCLC患者生存期的影響

全組患者中，Ki-67LI值<20%的患者共38例，≥20%的患者共62例，Ki-67LI值高表達組的總OS較低表達組有統計學意義（P < 0.05，圖2）。進一步行Cox風險模型分析，Ki-67LI水平是影響NSCLC患者生存期的獨立因素（OR=2.503，95%CI：1.077～5.815，β=0.917，P=0.033）。

3 討論

EGFR屬于跨膜受體絡氨酸激酶ErbB家族的成員之一，可激活細胞生長和增殖的相關信號途徑[7]。在惡性腫瘤中，EGFR的突變通過持續的活化介導產生不受控制的細胞分裂[8]。在歐洲和亞洲血統從未吸煙的肺癌女性患者中EGFR基因突變率為10%～15%[9]。因此EGFR突變檢測是患者能否從酪氨酸激酶抑制劑治療中獲益的重要組成部分。隨著肺癌系列致癌驅動基因的相繼確定，我國及國際上多項大型臨床研究證明靶向治療藥物能夠明顯改善和延長有相關驅動基因的NSCLC患者的預后和生存期[10-11]。Welsh等[12]研究發現，用厄洛替尼聯合全腦放療治療40例出現腦轉移的NSCLC患者，結果發現總反應率為86%，中位隨訪28.5個月，中位生存時間11.8個月。其中進行了EGFR 基因檢測共17例患者，EGFR 野生型患者中位生存時間9.3個月，EGFR突變患者中位生存時間19.1個月。提示EGFR-TKIs 聯合放療可使NSCLC腦轉移患者獲得更長的生存時間。其中外顯子18～21是EGFR突變的常見位點，這賦予了患者對EGFR酪氨酸激酶抑制劑的敏感性，這些外顯子能編碼EGFR激酶結構域的一部分[13]。大約90%的這些突變發生在外顯子19缺失和外顯子21上的L858R點突變，與患者接受厄洛替尼或吉非替尼治療達到70%的反應率相關[14]。吳應龍等[15]針對晚期EGFR突變陽性NSCLC患者進行的Ⅲ期隨機，開放標簽，ENSURE研究的分析顯示，一線厄洛替尼對比吉西他濱/順鉑化療，可顯著改善患者的PFS，且3級以上的的不良反應顯著低于化療。

本研究中，發現EGFR突變在女性、非吸煙、腺癌患者中更為常見（P < 0.05），這與接受EGFR-TKI治療的優勢人群一致，因此EGFR突變檢測對于NSCLC患者的個體化治療有著至關重要的作用。已經研究了幾種分子生物學標志物對NSCLC的預后或預測作用。其中一個就是30年前發現的在一些惡性疾病中被廣泛研究的Ki-67。Ki67抗體首先是利用霍奇金淋巴系L428細胞核對小鼠進行免疫制備出的。Ki-67蛋白的生物學功能是由位于10號染色體長臂（10q25）上的基因編碼，而且似乎Ki-67與核糖體RNA轉錄有關。因此，Ki-67失活會抑制核糖體RNA合成。Ki-67被廣泛認為是細胞增殖的標志物，主要表達于細胞周期的活躍期，即G1期、S期、G2期和有絲分裂期[16]。然而，少量的Ki-67也可在靜止細胞中檢測到[17]。Ki-67與腫瘤良惡程度關系即Ki-67標記指數與腫瘤惡性程度呈正相關。是鑒別腫瘤良惡程度及侵襲力的重要標志之一[18]。本研究中，Ki-67LI值越高，NSCLC患者EGFR突變率越高（P < 0.05）。分析其對患者生存期的影響同時也發現，Ki-67LI值高表達組的總OS較低表達組有統計學意義（P < 0.05）。但是Dingemans等[19]通過對接受鉑類化療的36例Ⅲ～Ⅳ期NSCLC患者按照Ki-67標記指數分為<30%，30%～60%和>60%進行分析顯示，Ki-67與患者的緩解率、OS在統計學上沒有顯著的差異。Yan等[20]也發現Ki-67對NSCLC患者的OS沒有統計學意義，本研究結果與上述研究相反，可能與本文Ki-67標記指數的選擇不同（Ki-67指數分為<20%，≥20%）及樣本的入組差異有關。

綜上所述，Ki-67LI值可以預測NSCLC的生存期，而且本研究初步發現了CEA、Ki-67水平與EGFR突變的關系，對于EGFR突變狀態未知的患者，通過CEA水平、Ki-67檢測可以為臨床醫生選擇EGFR突變檢測提供一定的參考依據，從而使患者更好地從EGFR-TKI治療中獲益。因此，Ki-67與NSCLC的關系還是值得進一步研究的。endprint

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