用電阻抗法自動血細胞分析儀檢測血小板的影響因素研究

李少芳，韋 敏

(廣西壯族自治區南寧市第一人民醫院醫學檢驗科，廣西 南寧 530022)

用電阻抗法自動血細胞分析儀檢測血小板的影響因素研究

李少芳，韋 敏

(廣西壯族自治區南寧市第一人民醫院醫學檢驗科，廣西 南寧 530022)

目的：探討用電阻抗法自動血細胞分析儀檢測血小板的影響因素。方法：將2014年7月至2016年10月在廣西壯族自治區南寧市第一人民醫院實施血小板輸注治療的60例患者作為研究對象。采集本組患者的空腹靜脈血，分別使用手工顯微鏡法及電阻抗法自動血細胞分析儀對血液標本進行血小板檢測，然后分析對本組血液標本的血小板異常直方圖及血小板正常直方圖中存在大血小板及血小板聚集的情況，并觀察對本組中存在60～70 f1、50～59 f1及＜50 f1小紅細胞的血液樣本采用電阻抗法自動血細胞分析儀與手工顯微鏡法進行血小板檢測的情況。結果：與血小板異常直方圖相比，本組血液標本的血小板正常直方圖中血小板聚集的檢出率及大血小板的檢出率均較高，差異有統計學意義（P＜0.05）。與血小板異常直方圖相比，血小板正常直方圖中血小板的計數較多，差異有統計學意義（P＜0.05）。與采用手工顯微鏡法進行血小板檢測相比，在采用電阻抗法自動血細胞分析儀對本組中存在體積為60～70 f1、50～59 f1及＜50 f1小紅細胞的血液樣本進行血小板檢測時，血小板的檢出數均較多，差異有統計學意義（P＜0.05）。隨著血液標本中小紅細胞體積的縮小，在對其進行電阻抗法自動血細胞分析儀檢測時血小板的檢出數逐漸增多。結論：在對血液樣本進行電阻抗法自動血細胞分析儀檢測時，檢出血小板的數量會受到血液樣本中存在大血小板、血小板聚集及紅細胞體積過小等因素的影響，其檢測結果存在一定的誤差。

電阻抗法；血小板；影響因素

血小板是巨核細胞脫顆粒產生的具有生理及酶活性的無核細胞，在某些生理和病理過程（如生理性止血）中可發揮重要的作用。進行血小板檢測是臨床上研究凝血及止血功能障礙的重要方法。獲得準確的血小板數量可為臨床醫師診治出血性疾病及血栓性疾病提供重要的參考數據。自動血細胞分析儀是臨床上測定血小板的常用儀器，用其檢測血小板具有可重復操作、操作方便快捷等特點，但用其測定血小板數量的準確度會受到一些因素的干擾[1]。本研究主要探討用電阻抗法自動血細胞分析儀檢測血小板數量的相關影響因素。

1 資料和方法

1.1 一般資料

本研究的對象為2014年7月至2016年10月在我院進行血小板輸注治療的60例患者。在這些患者中，有男41例，女19例；其年齡為45～70歲，平均年齡為（60.65±8.50）歲。這些患者均排除了發生惡性腫瘤、腦血管疾病及多器官功能衰竭的可能，均知曉本研究的內容并簽署了對本研究的知情同意書。本研究已經通過本院倫理協會的審核與同意。

1.2 方法

抽取本組患者2.0ml的空腹靜脈血，置于真空抗凝管（IMPROVE公司生產，EDTA-K2）中混勻，置于室溫下，分別采用手工顯微鏡及電阻抗法血細胞分析儀（邁瑞生物醫療電子股份有限公司，BC3000）檢測其中血小板的數量。

1.3 觀察指標

1）分析對本組血液標本采用電阻抗法自動血細胞分析儀進行檢測時血小板異常直方圖及血小板正常直方圖中存在大血小板及血小板聚集的情況。2）分析對本組中存在60～70 f1、50～59 f1及＜50 f1小紅細胞的血液樣本采用電阻抗法自動血細胞分析儀與手工顯微鏡法進行血小板檢測的結果。

1.4 統計學分析

采用SPSS19.0統計軟件對本研究中的數據進行分析，計量資料用（±s）表示，采用t檢驗，計數資料用%表示，采用X2檢驗。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 對本組血液標本采用電阻抗法自動血細胞分析儀進行檢測時血小板直方圖的分析

在對本組血液標本采用電阻抗法自動血細胞分析儀進行檢測時，共檢出血小板異常直方圖20例，血小板正常直方圖40例。與血小板異常直方圖相比，血小板正常直方圖中血小板聚集的檢出率及大血小板的檢出率均較高，差異有統計學意義（P＜0.05）。與血小板異常直方圖相比，血小板正常直方圖中血小板的數量較多，差異有統計學意義（P＜0.05）。對本組中檢出血小板異常直方圖與血小板正常直方圖的血液樣本進行手工顯微鏡檢測時檢出血小板的數量相比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。詳情見表1。

2.2 對存在不同體積小紅細胞的血液樣本進行血小板檢測的情況分析

與采用手工顯微鏡法進行血小板檢測相比，在采用電阻抗法自動血細胞分析儀對本組中存在體積為60～70 f1、50～59 f1及＜50 f1小紅細胞的血液樣本進行血小板檢測時，血小板的檢出數均較多，差異有統計學意義（P＜0.05）。隨著血液標本中小紅細胞體積的縮小，在對其進行電阻抗法自動血細胞分析儀檢測時血小板的檢出數逐漸增多。詳情見表2。

表1 對本組血液標本采用電阻抗法自動血細胞分析儀檢測時血小板直方圖的分析

表2 對存在不同體積小紅細胞的血液樣本進行血小板檢測的情況分析(×109/L，±s)

表2 對存在不同體積小紅細胞的血液樣本進行血小板檢測的情況分析(×109/L，±s)

檢測方法 小紅細胞體積＞70 f1（n=26）小紅細胞體積＜50 f1（n=5）手工顯微鏡檢測血小板的數量 206.68±19.92 242.12±21.68 256.94±24.26 271.88±34.62自動血細胞分析儀檢測血小板的數量 214.06±24.64 260.95±32.45 347.88±42.62 488.87±63.33 t值 1.188 2.047 7.867 12.755 P值 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05小紅細胞體積為60～70 f1（n=18）小紅細胞體積為50～59 f1（n=11）

3 討論

近年來,需要進行血小板輸注治療的患者逐漸增多。血小板極易粘附于破損的血管壁上。在臨床上，檢測血小板數量的方法雖較多，但其準確性均較差[2-3]。

電阻抗法是一種重復性高、操作快速的檢測方法。此法可根據血細胞相對非導電的性質，以電解質溶液中懸浮的血細胞顆粒經過小孔時引發的電阻變化為向導，較為準確地測定血細胞的計數。但是，對發生異常情況的血液標本采用電阻抗法進行檢測，難以準確測出血小板的數量。例如，在對患有糖尿病、血小板減少性紫癜等疾病的受檢者采用電阻抗法進行血小板檢測時，檢出血小板的數量往往偏低。我們認為，導致這種情況的因素可能包括以下幾種：1）血液標本中存在大血小板及血小板聚集現象對血小板數量測定的影響。在用電阻抗法進行血小板檢測時，一定量的大血小板未被計入血小板數，進而造成檢出的血小板的數量偏低[4]。本研究的結果顯示，與血小板異常直方圖相比，血小板正常直方圖中血小板聚集的檢出率及大血小板的檢出率均較高，差異有統計學意義（P＜0.05）。與血小板異常直方圖相比，血小板正常直方圖中血小板的計數較多，差異有統計學意義（P＜0.05）。可見，存在大血小板及血小板聚集現象是影響采用電阻抗法進行血小板檢測準確度的關鍵因素。在采用此法進行血小板檢測時若出現血小板異常直方圖，應采用手工顯微鏡法重新進行血小板檢測。2）血液標本中小紅細胞的干擾。電阻抗法是通過對同一系統中不同顆粒的大小進行區分來鑒別紅細胞與血小板。當血液中小紅細胞的量較大時可導致血小板上限區域改變。當血液標本中紅細胞的體積超過70 f1時，對其進行電阻抗法自動血細胞分析儀檢測的準確度一般不會受其中血小板上限區域的干擾。因此對其進行手工顯微鏡檢測與電阻抗法自動血細胞分析儀檢測的結果無明顯的差異。當血液標本中紅細胞的體積≤70 f1時，對其進行電阻抗法自動血細胞分析儀檢測的準確度會受到血小板上限區域的干擾，其檢出的血小板直方圖上會錯誤地顯示出小紅細胞，進而可導致血小板的檢出數偏高。我們在本次研究中發現，隨著血液標本中小紅細胞體積的縮小，在對其采用電阻抗法自動血細胞分析儀進行檢測時血小板的檢出數逐漸增多。可見，在對血液標本進行血小板檢測時若發現其中存在體積較小的小紅細胞，應采用二維激光散射或流式細胞計數法重新進行血小板檢測。3）血液標本的放置時間過長。將血液標本放置較長的時間易使其中產生巨大血小板。巨大血小板若在體積為100～250 f1的紅細胞直方圖中出現，可導致血小板的檢出數偏低。因此，在采集血液標本后應在1 h內完成血小板檢測，而且應對全血標本頻繁地進行混勻操作，以提高檢測血小板數量的準確率。4）所用試劑的質量較差。在進行血小板檢測時所用試劑質量的好壞可直接決定血小板的檢出數，因此我們應盡可能使用與檢測儀器的操作原理相匹配的試劑。對血液標本所用稀釋液的離子強度及滲透壓等可對檢測結果造成不同程度的影響。因此，在對血液標本進行檢測時應嚴防所用的稀釋液受到污染，并禁止使用污染試劑（污染試劑中所含的雜質微粒可導致血小板數量偏高）。此外，在進行血液標本檢測時使用不同的抗凝劑也可在一定程度上影響檢測結果[5]。

綜上所述，在對血液樣本進行電阻抗法自動血細胞分析儀檢測時，檢出血小板的數量會受到血液樣本中存在大血小板、血小板聚集及紅細胞體積過小等因素的影響，其檢測結果存在一定的誤差。在采用電阻抗法自動血細胞分析儀進行血小板檢測的過程中，應盡可能消除上述因素對檢測結果的影響，并應在檢出血小板異常直方圖時采用手工顯微鏡法重新進行檢測。

[1]焦瑞寶,李娜,劉娜,等.激光散射法和電阻抗法在全血血小板計數中的比較[J].安徽醫藥,2013,17(11):1887-1889.

[2]張馳,張洪波.CELL-DYN Sapphire 血液分析儀的 CD61免疫學法、光學法、電阻抗法在低值血小板計數中的比較與應用[J].檢驗醫學,2015,30(3):274-279.

[3]周靜,陳建安,陳麗莉,等.紅細胞MCV和RDW對不同方法計數低值血小板的影響[J].海南醫學,2016,27(13):2129-2131.

[4]王丹,潘莉娟,歐國平,等.SysmexXT1800i血細胞分析儀血小板計數準確性的研究[J].檢驗醫學與臨床,2015,12(19):2842-2844.

[5]張偉紅,陳斌,蔡夢珊,等.SYSMEX XE-5000血液分析儀血小板準確計數的相關分析[J].檢驗醫學,2014,29(7):741-744.

R331.1+43

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2095-7629-（2017）12-0110-02