間充質(zhì)干細(xì)胞治療強(qiáng)直性脊柱炎的臨床療效

彭 肖， 張 艷， 徐鳳金， 肖翠君

(哈勵(lì)遜國(guó)際和平醫(yī)院老年病二科， 河北 衡水 053000)

間充質(zhì)干細(xì)胞治療強(qiáng)直性脊柱炎的臨床療效

彭 肖， 張 艷， 徐鳳金， 肖翠君

(哈勵(lì)遜國(guó)際和平醫(yī)院老年病二科， 河北 衡水053000)

目的分析探討間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)強(qiáng)直性脊柱炎(AS)患者的臨床治療效果。方法對(duì)2016年5月至2017年5月收治的82例AS患者進(jìn)行回顧性研究，其中42例患者采用間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行治療為觀察組，40例患者采用抗風(fēng)濕藥物治療為對(duì)照組，分析兩組患者治療前后血常規(guī)變化、肝功能水平變化、血沉指數(shù)、夜間疼痛VAS評(píng)分、Bath強(qiáng)直性脊柱炎功能指數(shù)(BASFI)評(píng)分和Bath強(qiáng)直性脊柱炎疾病活動(dòng)性指數(shù)(BASDAI)評(píng)分變化。結(jié)果經(jīng)治療后，觀察組患者血常規(guī)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)、血紅蛋白(HB)分別為[(3.20±0.24)×1012/L]、[(893.65±121.85)×109/L]、[(192.64±7.68)×109/L]、[(106.84±12.35)g/L]，與治療前相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=9.40，30.14，7.08，5.34；P<0.05)，且治療后顯著優(yōu)于對(duì)照組(P<0.05)；觀察組患者谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)以及總膽紅素(TBIL)水平分別為[(17.24±4.96)U/L]、[(28.03±4.96)U/L]、[(10.07±1.42)μmoL/L]，與治療前相比差異顯著(t=3.44，3.74，3.02；P<0.05)；觀察組患者治療后VAS評(píng)分、BASFI評(píng)分以及BASDAI評(píng)分均顯著優(yōu)于治療前(P<0.05)，與對(duì)照組相比差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論AS患者采用間充質(zhì)干細(xì)胞治療可以有效的改善患者的血常規(guī)和肝功能水平，且可以有效的緩解患者的臨床癥狀，改善脊柱功能，效果顯著，值得臨床推廣。

間充質(zhì)干細(xì)胞; 強(qiáng)直性脊柱炎; 肝功能; 臨床療效

強(qiáng)直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)是目前臨床是上發(fā)病率較高的一種全身性疾病，該病主要以侵犯脊柱且累及患者的骶髂關(guān)節(jié)以及周圍關(guān)節(jié)組織的一種慢性進(jìn)行性的炎癥病變[1]。AS患者的主要臨床特征表現(xiàn)為腰背疼痛或者僵硬等癥狀，活動(dòng)后癥狀緩解。AS晚期患者表現(xiàn)為脊柱畸形、強(qiáng)直以及嚴(yán)重的功能受損等情況[2]。該病在青少年中的發(fā)病率較高，且以男性患者居多[3]。由于該病的病理特征在臨床上經(jīng)CT和X線檢查時(shí)極易與風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎混淆。早期臨床上對(duì)于該病的治療主要以慢作用的抗風(fēng)濕藥物治療為主，但是臨床療效并不理想，且患者存在較高的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)[4]。隨著近年來(lái)生物療法的發(fā)展，細(xì)胞靶向療法在臨床上的使用率越來(lái)越高。采用間質(zhì)干細(xì)胞治療AS在臨床取得了顯著的療效。本文通過(guò)對(duì)我院2016年5月至2017年5月收治的82例AS患者進(jìn)行研究，分析探討間充質(zhì)干細(xì)胞治療對(duì)該病患者的臨床療效。現(xiàn)對(duì)具體內(nèi)容進(jìn)行分析報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1一般資料:選取我院2016年5月至2017年5月收治的82例AS患者作為研究對(duì)象。所有患者均符合臨床上AS紐約診斷標(biāo)準(zhǔn)，患者表現(xiàn)為下腰背疼痛時(shí)間≥3個(gè)月，疼痛隨著活動(dòng)有所改善，但是休息的時(shí)候未緩解；腰椎前后以及側(cè)屈方向活動(dòng)時(shí)受限；胸廓擴(kuò)展范圍低于同齡同性別人的正常值；雙側(cè)骶髂關(guān)節(jié)炎分級(jí)為Ⅱ～Ⅳ級(jí)，或者單側(cè)的骶髂關(guān)節(jié)炎分級(jí)為Ⅲ～Ⅳ級(jí)。滿足第四項(xiàng)和前三項(xiàng)中任一項(xiàng)則診斷為AS患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者均符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)，患者均表現(xiàn)為不同程度的關(guān)節(jié)疼痛或者脊柱疼痛；且有骶髂關(guān)節(jié)炎癥狀；且均自愿簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除不符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者和未能配合完成研究的患者。且本次研究經(jīng)過(guò)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。所有患者均未采用生物制劑類藥物進(jìn)行治療，且經(jīng)過(guò)腫瘤系標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果呈陰性。42例患者采用間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行治療為觀察組，40例患者采用抗風(fēng)濕藥物治療為對(duì)照組，觀察組男性患者27例，女性患者15例；患者年齡最大為30歲，最小為15歲，平均年齡為(23.69±3.12)歲；病程為2～18年，平均為(4.35±2.15)年。對(duì)照組男性患者27例，女性患者13例；患者年齡最大為31歲，最小為15歲，平均年齡為(24.01±3.58)歲；病程為2～18年，平均為(4.69±2.67)年。兩組患者一般資料相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法:對(duì)照組患者采用抗風(fēng)濕類藥物治療。觀察組患者均采用間充質(zhì)干細(xì)胞治療。培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞，培養(yǎng)方法包括直接培養(yǎng)法和濃度梯度離心法。直接培養(yǎng)法主要是根據(jù)干細(xì)胞的特性選擇合適的方法培養(yǎng)。濃度梯度離心法主要是根據(jù)骨髓細(xì)胞中各類細(xì)胞比重存在差異，進(jìn)而通過(guò)離心的方式將單核細(xì)胞分離，并進(jìn)行體外培養(yǎng)。直接培養(yǎng)法的內(nèi)容主要為：將接種后的原代細(xì)胞培養(yǎng)1～1.5h，之后將懸浮的細(xì)胞去除；培養(yǎng)24h后將培養(yǎng)液中懸浮細(xì)胞去除；培養(yǎng)48h之后再去除培養(yǎng)液中的懸浮細(xì)胞。對(duì)細(xì)胞情況進(jìn)行觀察，當(dāng)培養(yǎng)7d之后，若可見(jiàn)成片典型細(xì)胞，則在平底標(biāo)記，之后采用0.25%胰酶降解。鏡下觀察，室溫情況下5～10min時(shí)培養(yǎng)基無(wú)消化；之后瓶底向上，吹打4～8min，之后將吹打下來(lái)的細(xì)胞收集并進(jìn)行傳代培養(yǎng)，溫箱中培養(yǎng)0.5h，瓶底向上進(jìn)行吹打，將培養(yǎng)液中的懸浮細(xì)胞去除之后進(jìn)行全培養(yǎng)。濃度梯度離心法主要是將骨髓懸浮液以300r/min離心30min，分離后可見(jiàn)液體分為三層，收取中間層白色絮狀層，轉(zhuǎn)移至新離心管中，加入20mL PBS吹打均勻，之后以1800r/min離心10min，棄上清。之后再加入20mL PBS吹打均勻，以1800r/min離心10min，棄上清。之后加入5mL培養(yǎng)基吹打均勻后培養(yǎng)即可。所有患者均給予30mL 1×107間質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行靜脈輸注治療，均為一次治療。對(duì)于伴隨類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者將間質(zhì)干細(xì)胞和生理鹽水以1:4混勻之后輸注。

1.3觀察指標(biāo):比較兩組患者治療前后血常規(guī)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(Red Blood Cell Count，RBC)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)(White Blood Cell Count，WBC)、血小板計(jì)數(shù)(platelet count，PLT)、血紅蛋白(hemoglobin，HB)，肝功能谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase，AST)以及總膽紅素(total bilirubin，TBIL)水平等指標(biāo)情況，同時(shí)采用夜間疼痛VAS量表、Bath強(qiáng)直性脊柱炎功能指數(shù)(BASFI)量表和Bath強(qiáng)直性脊柱炎疾病活動(dòng)性指數(shù)(BASDAI)量表對(duì)患者的疼痛情況和關(guān)節(jié)活動(dòng)情況進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2 結(jié) 果

2.1兩組患者治療前后血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果比較:治療前，兩組患者RBC、WBC、PLT、HB水平相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。治療后，兩組患者各指標(biāo)水平均顯著改善，但觀察組患者的改善效果優(yōu)于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

表1 兩組患者治療前后血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果比較

注：字母a表示與治療前相比，字母b表示與治療后相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05

2.2兩組患者治療前后肝功能水平比較:治療前，兩組患者體內(nèi)ALT、AST以及TBIL水平相比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，對(duì)照組患者各指標(biāo)水平改善效果不顯著，但觀察組患者各指標(biāo)水平與治療前相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.44，3.74，3.02；P<0.05)；具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。

表2 兩組患者治療前后肝功能水平比較

注：字母a表示與治療前相比，字母b表示與治療后相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05

2.3兩組患者治療前后VAS、BASFI、BASDAI評(píng)分比較:治療前，兩組患者VAS、BASFI、BASDAI評(píng)分相比無(wú)顯著性差異(P>0.05)；治療后，兩組患者各指標(biāo)評(píng)分均顯著下降，且觀察組患者改善效果顯著優(yōu)于對(duì)照組(P<0.05)；具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表3。

表3 患者治療前后VAS、BASFI、BASDAI評(píng)分比較

注：字母a表示與治療前相比，字母b表示與治療后相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05

3 討 論

AS是一種自身免疫性疾病，該病在臨床上具有較高的致殘率和發(fā)病率，且患者的發(fā)病年齡較小。該病主要對(duì)患者的中軸關(guān)節(jié)產(chǎn)生影響，病理表現(xiàn)為炎癥附著。近年來(lái)相關(guān)文獻(xiàn)表明，AS的發(fā)病因素可能與感染、遺傳因素以及免疫因素等關(guān)系密切[5]。AS患者發(fā)病初期多表現(xiàn)為關(guān)節(jié)炎、趾炎或者肌腱端炎等，部分患者表現(xiàn)為脊柱炎和骶髂關(guān)節(jié)炎[6]。早期臨床上對(duì)于AS患者的治療主要以早期聯(lián)合給予抗風(fēng)濕類藥物改善患者的病情，該類方法治療在一定程度上可以有效的減少致殘率的發(fā)生，但抗風(fēng)濕類藥物在臨床治療過(guò)程中起效較慢，且長(zhǎng)期應(yīng)用容易導(dǎo)致患者出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥，進(jìn)而對(duì)臨床療效產(chǎn)生影響[7,8]。隨著近年來(lái)分子生物學(xué)的發(fā)展，靶向治療在臨床上的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，通過(guò)靶向治療可以有效的抑制炎癥因子的釋放，進(jìn)而發(fā)揮抗炎作用緩解患者的臨床癥狀。間充質(zhì)干細(xì)胞治療是近年來(lái)臨床上用于治療AS的常用方法，且取得了滿意的臨床療效[9]。本次研究對(duì)我院收治的82例AS患者進(jìn)行研究，進(jìn)一步分析探討間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)AS患者的具體作用效果。本次研究結(jié)果表明，采用間充質(zhì)干細(xì)胞治療后，患者的血常規(guī)和肝功能水平均顯著改善(P<0.05)；且改善效果顯著優(yōu)于對(duì)照組患者采用抗風(fēng)濕類藥物治療的效果，且患者VAS、BASFI、BASDAI等評(píng)分情況，治療前后相比均顯著改善(P<0.05)。這一結(jié)果表明該方法治療可以有效的改善患者的疼痛和關(guān)節(jié)功能。且該方法在治療過(guò)程中無(wú)嚴(yán)重并發(fā)癥發(fā)生，且對(duì)患者的肝腎功能無(wú)明顯的影響。

間充質(zhì)干細(xì)胞治療AS的作用機(jī)制可能為：①通過(guò)間充質(zhì)細(xì)胞在體外培養(yǎng)分化為脂肪、軟骨、成骨、肌肉組織等細(xì)胞進(jìn)而促進(jìn)組織的再生功能，通過(guò)靜脈輸注進(jìn)入患者體內(nèi)之后參與患者受損組織和細(xì)胞的再生[10]。②靜脈輸注治療過(guò)程中間充質(zhì)干細(xì)胞具有向病變滑膜聚集的特點(diǎn)，進(jìn)而促進(jìn)受損關(guān)節(jié)組織的修復(fù)。③間充質(zhì)干細(xì)胞可以發(fā)揮特有的免疫調(diào)節(jié)功能，通過(guò)將自體以及異體的間充質(zhì)干細(xì)胞加入到外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系中，可以有效的抑制T淋巴細(xì)胞的增殖活化功能，將上述間充質(zhì)干細(xì)胞輸入患者體內(nèi)可以有效的促進(jìn)軟骨的修復(fù)[11]。④間充質(zhì)干細(xì)胞通過(guò)發(fā)揮趨化作用，有效的抑制炎癥介質(zhì)的釋放，進(jìn)而減輕患者的炎癥，改善臨床癥狀。綜上所述，間充質(zhì)干細(xì)胞用于AS患者的治療可以有效的改善患者的臨床癥狀，緩解患者的疼痛，效果顯著，安全性較高，具有較高的臨床推廣價(jià)值。

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ClinicalEffectofMesenchymalStemCellsonAnkylosingSpondylitis

PENGXiao,ZHANGYan,XUFengjin,etal

(HarrisonInternationalHepingHospital,HebeiHengshui053000,China)

Objective：To evaluate the clinical efficacy of mesenchymal stem cells in patients with ankylosing spondylitis (AS).MethodsA retrospective study was conducted on 82 patients with AS from May 20 to May 2017. Among them, 42 patients were treated with mesenchymal stem cells as observation group and 40 patients treated with anti-rheumatic drugs as control group (BASF) score and the brachial ankylosis disease activity index (BASDAI) score were measured before and after treatment, and the changes of liver function, blood pressure index, nighttime pain VAS score, Bath ankylosing spondylitis function index (BASFI) score and Bath ankylosing spondylitis disease activity index Variety.ResultsAfter treatment, the blood transfusion count (RBC), white blood cell count (WBC), platelet count (PLT) and hemoglobin (HB) were observed in [(3.20 ± 0.24) × 1012/L], [(893.65 ± 121.85 (106.84±7.68)×109/ L],[(106.84 ± 12.35) g / L], which was significantly different from that before treatment (t = 9.40,30.14,7.08,5.34; P < (AST) and total bilirubin (TBIL) were significantly higher than those in the control group (P <0.05) (T = 3.44, 3.44, 3.02; P <0.05). The patients in the observation group were significantly higher than those in the control group (P <0.05) After treatment, VAS score, BASFI score and BASDAI score were significantly better than before treatment (P <0.05), compared with the control group was also statistically significant (P <0.05).ConclusionAS patients with mesenchymal stem cell therapy can effectively improve the patient's blood and liver function levels, and can effectively alleviate the clinical symptoms of patients, improve spinal function, the effect is remarkable, worthy of clinical promotion.

Mesenchymal stem cells; Ankylosing spondylitis; Liver function; Clinical efficacy

1006-6233(2017)11-1864-04

河北省衛(wèi)生廳科研基金項(xiàng)目，(編號(hào)：20150174)

徐鳳金，Emailzhurs726417@163.com

A

10.3969/j.issn.1006-6233.2017.11.030