海南玉米種子純度田間種植鑒定技術要點

王靈敏 孟小莽 唐榮芳

（河北省石家莊市種子管理站，石家莊 050051）

海南玉米種子純度田間種植鑒定技術要點

王靈敏 孟小莽 唐榮芳

（河北省石家莊市種子管理站，石家莊 050051）

隨著種子管理工作的加強，石家莊市已經把玉米種子純度海南種植鑒定作為雜交玉米種子質量管理的重要措施，于2015年在海南省三亞市檳榔村建成農作物種子海南種植鑒定基地，并連年在基地安排玉米種子純度海南種植鑒定工作。就玉米種子純度海南種植鑒定工作談幾點技術要點。

海南；玉米種子；樣品；種植鑒定

新《種子法》第四十七條規定：“農業、林業主管部門可以采用國家規定的快速檢測方法對生產經營的種子品種進行檢測，檢測結果可以作為行政處罰依據。”[1]這一條是對快速檢測方法法律地位的肯定。但是，這不意味著玉米種子純度田間小區種植鑒定方法不重要、過時了。理由一，當對采用國家規定的SSR和SNP分子標記快速檢測法的檢測結果產生異議時，仍須用田間種植鑒定法進行復檢。理由二，國家規定的快速檢測方法SSR和SNP分子標記技術的應用受到設備、技術、人員等因素的影響，還達不到全面普及。在這種情況下田間種植鑒定法仍是目前應用最普遍、最準確、最權威的純度鑒定方法。以下就海南玉米種子純度田間種植鑒定的技術要點進行介紹。

1 對供檢樣品登記、排序

根據品種名稱 、種子來源（生產商及經銷商、經營門市等）、檢測日期、種子批號、種子質量指標標注值進行登記，為便于同一品種不同樣品間的比較，按品種排序，使同一品種的樣品鄰近種植，依據此排序號編寫試樣編號。

2 收集品種特征特性的描述

按農作物種子檢驗規程來講，應該把親本及雜交種的標準樣品作為對照。但是因標準樣品的局限性，市級種子管理站鑒定的主要依據是品種審定公告，需要收集品種特征特性相關資料，包括葉鞘顏色、葉緣色、葉形、株型、株高、穗位高、花絲顏色、雄穗及分枝多少、花藥顏色、全株葉片數、穗型、穗軸顏色、穗長、穗行數、禿頂度、粒形、粒色、千粒重及抗逆性等相關描述。

3 確定種植樣品的粒數

在石家莊市多年的同步種植鑒定試驗中，純度標注值為96.0%的樣品播種110粒，在花期鑒定時據統計每年或多或少會出現個別樣品植株數量不足100株。這些樣品的鑒定株數就不能滿足GB/T3543.5檢驗規程上規定的4N原則。

為保證種植株數符合4N原則，種植樣品粒數應為4N/發芽率。因鑒定的樣品量較多，每個樣品發芽率不一，按4N/發芽率計算的每個樣品需要播種粒數就不盡相同，發芽率越高種植粒數相應變少。為便于播種和管理，在純度標注值一致的情況下將種植鑒定樣品播種數量統一，以種子樣品中需要播種最多的粒數作為種植鑒定樣品最低播種數量。按發芽率標注最低值85%[2]，如果樣品中純度標注值為96.0%，4N為100，4N/發芽率為118粒，建議播種120粒；純度標注值為97.0%，4N為134，4N/發芽率為158粒，建議播種180粒；純度標注值為98.0%，40N為200，4N/發芽率為236粒，建議播種240粒；純度標注值為99.0%，4N為400，4N/發芽率為471粒，建議播種480粒。

4 隨機數取種植樣品并編號

從供檢樣品中隨機數取種植鑒定試樣，依據供檢樣品的排序號編寫試樣編號。為使有限數量的種子有較好的代表性，每份必須按試驗設計所規定粒數隨機、精確數取種子。如果數取的種子粒數多于規定的播種粒數，在點播的過程中會挑肥揀瘦，剩下瘦小的種子，甚至播種粒數多于規定的粒數，造成人為誤差。種植鑒定可以不設重復，為了增加鑒定的可靠性和準確性，增加1次重復。

5 選擇地塊，精細整地

為保證氣候環境條件適宜植株性狀正常發育，鑒定地塊要平坦向陽、土壤均勻、肥力一致、有排灌條件且不宜低洼，前茬無同類作物和無病蟲害及雜草[3]。

播前整地：海南降雨量偏多，為防止多雨澇災，采用起壟種植模式。壟寬130cm，溝寬30cm，溝深20～30cm。在1月上中旬進行精細整地，每667m2施底肥史丹利17-17-17復合肥50kg，并澆足底墑水。

6 播種

6.1 播種期一般在1月下旬進行播種。由于農民的消費觀念的改變，已經由春節前備足種子變成4-5月為購買玉米種子高峰期，因此企業備種時間相應延后，大部分企業在11月底至次年1月上中旬回收運輸加工玉米種子，又考慮到錯開春節時間，鑒于這種情況監督抽樣時間多在1月18日之前完成。海南播期為1月20日左右，使花期鑒定在3月下旬4月初完成，趕在購買玉米種子高峰期之前，這樣可以對有問題的種子及時采取措施，保證優質種子入地。

6.2 種子處理播前應對種子進行晾曬，促進種子發芽。對極個別未包衣種子樣品應進行藥劑拌種等處理，防止蟲害與鼠害，確保一次全苗。

6.3 規格播種采用壟上雙行南北行向種植。其雙行的行距為100cm，作為觀測道，壟上種植行距壟邊10～15cm，株距30～40cm，每行播種60粒。純度標注值為96.0%的樣品種植2行，純度標注值為97.0%的樣品種植3行，純度標注值為98.0%的樣品種植4行，純度標注值為99.0%的樣品種植8行，并在當天完成播種，試驗四周設4～5行保護行。如果設有重復并需2d播完，每重復應在同一天播完。每個重復按小區設計方案和種植圖在種植行的行頭插好樣品的唯一性標識牌，然后擺放已數好粒數的種子樣品，經核查擺放的位置無誤后開始播種。采用單粒穴播，播種深度3～5cm。用竹桿或PVC管標記，在長竹桿或PVC管上按固定的株距量好位置，用記號筆標記作為點播的位點；或用無彈性塑料繩標記，在塑料繩上按固定的株距量好位置，用不同顏色線繩捆綁作記號，作為點播的位點。用竹桿或PVC管和塑料繩作為標尺，使株距均勻一致，并且株行豎直，保證每棵植株有均等的生長空間。播種深度、覆土厚度及按壓力度要一致。

7 田間管理

鑒定田的栽培管理要及時到位，保證小區內植株正常發育，使典型性狀充分表現出來，避免因管理不善造成過多的弱小苗。并且自播種之日起出入鑒定田時一定要及時關閉圍欄大門，防止牲畜為害及外來人員的踩踏，并在四周撒放鼠藥防止鼠害，以免影響鑒定。

7.1 中耕除草玉米苗期怕澇不怕旱，輕度的干旱利于根的下扎和發育，而澇害輕則影響生長，重則死苗。全生育期至少中耕2次，尤其是在下雨之后，及時松土，防止土壤板結，保證出全苗，絕不能補苗、間苗、勻苗。第1次中耕通常在苗期5～6葉時進行，耕深3～4cm；第2次在拔節后封壟前進行。也可在出苗后至4～5片葉時噴施玉米苗后專用除草劑1次，在12片葉時再使用滅生性除草劑定向噴霧1次。

7.2 澆水施肥排灌施肥要均勻，澆水建議采用噴灌或者用帶子澆灌；在可見葉為10～11片葉時進行追肥，結合澆水每667m2施尿素20kg。在抽雄前要澆透水，灌漿前澆1次水以增加子粒飽滿度。澆水時間及次數根據氣候及植株生長等情況而定。2016年年初海南氣溫偏高，本站鑒定試驗田在出苗后至花期鑒定之前共澆6水，其中前4水間隔15d左右，后2水間隔10d左右。

7.3 防治病蟲害植株生長期間要及時防治粘蟲、玉米螟、蚜蟲、地下害蟲，以及黑粉病、病毒病等病害。本站在2016年1月18日播種后，害蟲為害較早（1葉1心期），并且病害嚴重，播種后到花期鑒定之前共噴藥防治9次，前4次基本間隔4d，中間2次間隔7d，后3次間隔10d左右。

8 鑒定

8.1 鑒定性狀不同玉米品種，植株性狀、雄穗性狀、雌穗性狀和子粒性狀不同。因缺少標準樣品，通常以品種的審定公告描述的性狀作為標準逐株鑒定。在眾多性狀中，應抓住主要性狀和特殊性狀，必要時考慮次要性狀和易變性狀。玉米品種所固有的主要性狀為軸色、花絲顏色等不易變化的明顯性狀；而次要性狀就是細小、不易觀察的性狀，如花粉育性、葉鞘茸毛、小穗護穎等；易變性狀就是容易隨外界條件的變化而變化的性狀，如株高、莖粗等；特殊性狀就是某些品種所特有的性狀，如花絲遺跡明顯與否、苞葉頂端有無小葉等等。依據品種間性狀的差異鑒別異型植株，從而鑒定品種純度。對于鄰近種植的相同品種，相互對照比較，觀察其特征特性是否一致，與品種審定公告相符則品種真實，否則便是假種子。

8.2 鑒定時期通常在玉米花期植株性狀表現最明顯時期鑒定1次，但是目前玉米品種數量多，僅就2016年本站海南鑒定139個樣品就涉及71個品種。這些品種在很多性狀上相同，故應改變海南單一在花期鑒定的問題，增加苗期和成熟期鑒定，利用3個時期的特征特性綜合判定，以確保鑒定結果客觀、準確。鑒定現場如實填寫品種真實性與純度田間小區種植鑒定的詳細信息，包括種植地點、試樣編號、小區號、品種名稱、鑒定日期、鑒定生育期、供檢株數、本品種株數、異品種株數、異作物株數、品種真實性、病害危害株數、雜草株數，并有檢驗員簽字。

8.2.1 苗期鑒定在5葉1心期，以幼苗葉鞘顏色、葉形、葉色、葉緣顏色、光澤作為苗期純度鑒定所依據的典型性狀，并對懷疑植株用標簽或塑料牌作出標記。

8.2.2 花期鑒定花期是品種特征特性表現最明顯時期，依據株型、株高、莖稈粗細、葉形、葉色、葉上絨毛有無、葉脈顏色、葉耳形狀、雄穗形狀和分枝多少及分枝松散緊湊程度、護穎顏色、花藥顏色、花絲顏色、葉片張開角度、葉片數及穗位高、節間長度等性狀進行鑒定，對苗期懷疑植株重點觀察鑒定。雖然有些品種苗期芽鞘顏色的差異明顯，但為了更加準確鑒定品種純度及真實性，在花期必須進行鑒定。

8.2.3 成熟期鑒定以穗型、穗位高低、果穗苞葉長度、雙穗率、粒形、粒色、子粒大小和穗軸顏色結合抗逆性、生育期進行鑒定。根據果穗性狀對前期懷疑植株進一步觀察鑒定。各個生育期鑒定后再綜合判定，如果仍覺得似是非是的植株應按本品種計數。

8.3 鑒定人員田間種植鑒定必須由2名以上農作物種子田間檢驗員共同完成。田間檢驗員要有豐富的實踐經驗，既要熟悉被檢品種的特征特性，能正確鑒別植株是屬于本品種還是變異株，并能區分變異株是遺傳變異而不是受海南特殊環境影響所引起的變異，還要把雜交1代小苗與自交苗區分開來[3]。田檢員必須對品種多觀摩，熟悉和掌握本地所推廣品種及新品種的典型特征特性，提高田間純度鑒定技能，確保鑒定結果的準確性，避免海南鑒定質量事故的發生。

9 結果計算與容許差距

9.1 計算公式品種純度（%）=本品種株數/鑒定株數×100%；異品種純度（%）=異品種株數/鑒定株數×100%；異作物純度（%）=異作物株數/鑒定株數×100%；雜草率（%）=雜草株數/鑒定株數×100%。

9.2 容許差距與數字修約品種純度計算結果未達到標注值時，使用《GB/T3543.5》規定的容許差距。也可用下式進行計算容許差距[4]。

p為品種純度標注值，q=100-p，N為種植株數。鑒定結果以苗期為參考，以植株性狀表現最完全、最明顯的花期和成熟期為主，以2次重復的平均值表示，保留1位小數。數字修約執行《GB8170-2008數字修約規則》。各種成分的百分率總和必須為100.0%。

[1] 王海陽，劉彩霞，孫淑珍．論完善種子企業植物新品種權保護的對策[J]．中國種業，2016（12）：19-24

[2] 中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局，中國國家標準化管理委員會．GB4404．1-2008糧食作物種子第一部分：禾谷類[M]．北京：中國標準出版社，2008

[3] 王靈敏，孟小莽，許豫南，等．淺議種子真實性與品種純度鑒定方法的適用范圍與優劣[J]．種子科技，2016，34（8）：33-34

[4] 潘顯政，支巨振，梁志杰，等．農作物種子檢驗員考核學習讀本[M]．北京：中國工商出版社，2006：273-274

孟小莽

2017-08-22）