蔬菜中氨基甲酸酯農藥的檢測方法

摘要：液相色譜儀廣泛應用在生物化學、食品、醫藥、環境分析等各種領域。適用于蒸發溫度低、易揮發的氨基甲酸酯。農藥升溫測定如吡蟲啉、除蟲脲、滅幼脲等，檢測效果較好。

關鍵詞：蔬菜；農藥；檢測方法

中圖分類號：S132 文獻標識碼： A DOI編號： 10.14025/j.cnki.jlny.2017.21.047

1液相色譜儀的原理

基本原理使通過目標物分子的有機相和水相混合溶液中表現的極性不同從而使不同的農藥組份分開。

2液相色譜儀在蔬菜農藥殘留檢測中的應用（氨基甲酸酯類農藥的檢測）

2.1檢測的范圍

檢測水果蔬菜中氨基甲酸酯類農藥包括吡蟲啉、多菌靈、除蟲脲、滅幼脲、阿維菌素、涕滅威亞砜、涕滅威砜、涕滅威、三羥基克百威、克百威、甲萘威；12種氨基甲酸酯農藥方法檢出限為0.01～0.03毫克/公斤。

2.2實驗儀器

實驗儀器華光P600液相色譜儀、脫氣機，荷蘭進口自動進樣器，配有安捷倫C-18柱子，日本島津的紫外（型號Essentia SOD-16）和島津熒光（型號RF-20A）檢測器。

2.3液相華光P600型設備原理

樣品經前處理后通過自動進樣樣品，注入20毫克試樣，通過C-18的色譜柱時，吸附在柱的填料中；通過高壓輸液泵調節有機相和水相的比例。使C-18柱中的目標混合物，將先后順序進入檢測器，行程圖譜。

2.4耗材

實驗用的一級純凈水、乙腈、二氯甲烷、甲醇、農藥標準溶液配制。

2.5農藥標準溶液的配制

2.5.1單一藥的標準溶液 取某種農藥標準物，用甲醇溶劑制成1000毫克/升的農藥儲備液置于冰箱冷凍室內，使用時放置于室內達到常溫后，吸收用甲醇稀釋制成標準上機單一的農藥標準溶液。

2.5.2混合農藥標準溶液的配制 取多種農藥標準物分別準確稱量一定量，用甲醇溶解制成1000毫克/升的農藥儲備液置于冰箱冷凍室內，使用時放置于室內達到?；旌?，再稀釋后制成上機用的標準混合溶液。

2.6使用的儀器

液相色譜儀帶有紫外檢測器和熒光檢測器，C-18液相色譜柱；分析試驗室常用儀器設備；食品料理機；氮吹儀；漩渦混合器；勻漿機。

2.7實驗步驟

2.7.1實驗樣品制備 按GB/T789的方法抽樣，采用對角線縮分法把使用部分3公斤濃縮到500克左右，打漿裝入樣品盒中，置于-20℃冰箱冷凍室內保存。

2.7.2農藥提取 將樣品解凍置于室溫稱量25.0克樣品，加入50.0毫升乙腈后勻漿3分鐘，再用濾紙過濾收集到1000毫升具塞量筒中，加入5～7克Nacl蓋上塞子震蕩1分鐘，靜止45分鐘，使之分層備用。吸取10毫升上清液放入50毫升的燒杯中然后放入70℃水浴鍋中蒸至凈干，向燒杯中加入2毫升的99∶1（二氯甲烷加甲醇）備用，向氨基柱中加入4.0毫升（二氯甲烷加甲醇）溶液，待溶液面到達吸附層表面時立即加入待凈化溶液，用10毫升刻度離心管接收洗脫液，然后向燒杯中分3次加入共6毫升的混合液，涮洗后注入氨基柱中回收8毫升洗脫液，將刻度離心管放入40℃水浴鍋中氮吹至近干后用2.5毫升的甲醇溶液定溶轉移到上機小瓶中待測。

2.7.3農藥殘留測定 使用碳十八液相色譜柱，使色譜柱保持在38℃；用紫外檢測器檢測吡蟲啉、多菌靈、滅幼脲、阿維菌素、除蟲脲等農藥；起始的流動相比例為水相55%有機相45%，經過6分鐘水相變為55%有機相45%，運行到30分鐘時水相變為20%有機相為80%，到40分鐘時水相變為10%有機相變為90%，到50分鐘時水相變為55%有機相變為45%。

使用熒光檢測器檢測涕滅威、滅多威、甲萘威、克百威等農藥，時間梯度為起始的流動相比例為：水相70%，有機相30%，經過6分鐘水相變為70%，有機相30%。運行到19分鐘時水相變為30%，有機相為70%。到24分鐘時水相變為25%，有機相變為75%。到35分鐘時水相變為70%，有機相變為30%。

2.8液相色譜分析

由自動進樣器吸取20微升待測溶液注入系統中，通過碳十八柱子分離出待測組分，經過檢測器形成色譜圖，以各組分的出峰時間定性；以出峰面積定量。

2.9分析定性

2.9.1結果分析 采用色譜圖各農藥出峰時間給農藥定性；用外標法根據峰面積給農藥定量。

2.9.2定量結果計算 式樣中被測農藥殘留量以質量分數ω計，單位以毫克每公斤（毫克/公斤）表示，按公式：

ω=ρ×V3÷V2×V1÷m

ρ——標準溶液中農藥的質量濃度，單位為毫升每升。

V1——提取以毫升為單位的溶劑體積。

V2——吸取以毫升為單位用于檢測溶液體積。

V3——以毫升為單位定容樣品溶液體積。

m——以克為單位的式樣質量。

計算結果保留兩位有效數字，當結果大于1毫克/公斤時保留三位有效數字。

2.10精密度

實驗精密度按照GB/T6379.2規定，獲得重復性和再現性的值以95%的可信度來計算。

作者簡介：孔德志，大專學歷，中級農藝師，研究方向：蔬菜農藥殘留檢測。endprint