2種梔子果主要經濟性狀及梔子果仁油成分分析

倪勤學 高前欣 徐志豐 許光治 翁學軍 張有做

(浙江農林大學農業與食品科學學院1，臨安 311300)(浙江驕梔科技有限公司2，臨安 311307)

2種梔子果主要經濟性狀及梔子果仁油成分分析

倪勤學1高前欣1徐志豐1許光治1翁學軍2張有做1

(浙江農林大學農業與食品科學學院1，臨安 311300)(浙江驕梔科技有限公司2，臨安 311307)

為系統研究我國主要梔子果實的品種品質，以山梔子和水梔子果實為原料，測定果重、果皮厚度、果高、果直徑、殼仁比、出籽率、出油率等主要經濟性狀及粗蛋白、粗脂肪、膳食纖維、可溶性總糖等營養成分和總環烯醚萜類、總藏紅花素、總胡蘿卜素和總黃酮等功能成分含量。同時對梔子果仁油的理化性質、脂肪酸和不皂化物組成及主要生物活性物質進行測定和分析。結果表明水梔子果在單果重量(2.10 g)、果實直徑(20.47 mm)等經濟指標上顯著高于山梔子果(單果重量和果實直徑分別0.91 g、10.84 g)，而總環烯醚萜含量(5.35%)顯著低于山梔子果(8.77%)，其余主要營養功能成分無顯著性差異。兩種梔子果的油脂含量相近(約25%)，理化指標均無顯著性差異，主要脂肪酸均為亞油酸，含量高于48%。梔子果仁油的不皂化物主要有甾醇類、三萜醇類、烴類和維生素E類，其中以甾醇類含量最高(均超過50%)。山梔子果仁油中的總甾醇(59.37%)、角鯊烯(11.42%)等主要生物活性物質含量高于水梔子，而維生素E類含量低于水梔子。綜合分析，水梔子從果實產量及產油量上優于山梔子，但總環烯醚萜含量及油中主要生物活性物質含量較低。兩者從梔子果及果仁油的營養、功能方面評價各有千秋，故在食用特別是梔子果仁油的利用方面兩者可混用。試驗結果為梔子果資源的綜合利用、開發提供新的思路和理論基礎。

山梔子 水梔子 果仁油 經濟性狀 營養成分 功能成分

梔子(GardeniajasminoidesEllis)，又名山梔子，為茜草科梔子屬植物，在我國主要有3個變種：水梔子(G.jasminoidesEllis var.radicansMakino)，大花梔子(G.jasminoidesEllis var.grandifloraNakai)，重瓣梔子(G.jasminoidesEllis var.fortunianaLindl)。其中山梔子和水梔子為結實品種。《中國藥典》2000年版收載山梔子干燥成熟果實為中藥材，具有瀉火除煩,清熱利尿,涼血解毒等功效[1]，2002年被收錄為我國衛生部第一批頒布的既是食品又是藥品的物品名單。長期以來，1.8%含量的梔子苷為梔子作為藥用原料的唯一標準規范。水梔子(G.jasminoidesEllis var.radicans Makino)作為山梔子的變種，果實一直只能以中藥梔子的偽品視之，不作內服藥。因其富含以藏紅花素為主的色素成分，目前作為工業和食品的黃色天然著色原料之用。事實上，梔子果與藏紅花是自然界僅有的兩種含藏紅花素的植物。梔子藏紅花素也可能具有和藏紅花所含藏紅花素一樣的抗抑郁、預防腦損傷所造成的認知能力退化的功能[2-4]。此外，梔子果還具有20%～25%的可食用脂肪[5-6]，具有鎮靜安神、抗驚厥、抗憂郁等功效，是一種可媲美橄欖油和茶油的寶貴的新型功能性木本油[7-8]。因此，梔子具有開發新型藥食兩用營養健康油和梔子特色健康食品的潛在的巨大優勢。

然而，目前對梔子的研究和應用主要集中在僅以1.8%梔子苷為中國藥典標準規范的中藥原料或提取色素添加劑等原料，缺少對不同品種梔子果實的性狀、營養成分、功能成分的研究、比較和評價，一定程度上造成梔子果實資源的浪費和梔子產業發展的緩慢。為系統研究不同梔子果的品種品質，本研究從果實的經濟性狀及主要的營養和功能成分含量來評價山梔子和水梔子的異同點、利用價值及潛能，為梔子果的推廣和加工提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

山梔子：新鮮果實2015年11中旬采自3個樣地(浙江永嘉，浙江安吉，浙江德清)，45 ℃烘干；水梔子：新鮮果實2015年11中旬采自3個樣地(浙江永嘉，浙江杭州，浙江德清)，45 ℃烘干。果實均為無病蟲害的成熟果實。

1.2 主要儀器設備及試劑

HA221-50-06超臨界CO2萃取儀：江蘇南通華安超臨界流體萃取設備公司；ASE-200加速溶劑萃取儀：美國Dionex公司；RE-52A旋轉蒸發器：上海亞榮生化儀器廠；Freezone-18L冷凍干燥機：美國LABCONCO公司；SHIMADZU GCMS-QR2010 Ulra氣相色譜儀、UV-1800分光光度計：日本島津公司；BSA224S電子天平：賽多利斯科學儀器(北京)有限公司。

菜籽甾醇、麥角甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇：純度>99%，美國Chromadex公司，γ-生育酚、α-生育酚：日本東京化成工業株式會社，純度>99%；角鯊烯、梔子苷、藏紅花素、蘆丁、對羥基苯甲酸：美國Sigma公司，純度>98%；其他試劑均為分析純。水為去離子水。

1.3 試驗方法

1.3.1 經濟性狀的檢測方法

各取100顆干燥果實，百顆果實的果重、殼重、仁重、籽重均用電子天平稱重，取百顆果實的平均值。仁殼比=仁重/殼重。果實高度、果實直徑、果皮厚度分別用游標卡尺測量，精確到mm，取百顆果實的平均值。果形指數=果高/果徑。出籽率=籽重/果重。

1.3.2 主要營養成分含量的測定

含水量：GB/T 5497—1985；灰分：GB/T 5505—2008；粗蛋白：GB/T 14489.2—2008；粗脂肪：GB/T 5512—2008；總膳食纖維：GB/T 5009.88—2014；可溶性總糖：GB/T 5009.8—2008；還原糖：GB/T 5513—2008；淀粉：GB/T 5514—2008；能量：GB 28050—2011；鈉：GB/T 5009.91—2003。

1.3.3 樣品的制備

梔子果仁油的提取：各取1 000 g干燥果實，人工剝殼后，果仁粉碎，裝入萃取釜進行超臨界CO2萃取，萃取條件為萃取壓力30 MPa，萃取溫度50 ℃，CO2流量10 L/h，萃取時間4 h，減壓分離、離心去雜后為梔子果仁油，分析理化性質、脂肪酸和不皂化物組成及主要生物活性物質含量。出油率=油質量/果質量×100%。

梔子提取物的制備：烘干的梔子果各稱取100.0 g，分別將實果仁和果殼分開、粉碎，過40目篩。果仁用石油醚脫脂后和果殼混合，在加速溶劑萃取儀上依次用95%乙醇(1 500 psi，85 ℃)提取15 min、70%乙醇(1 500 psi，85 ℃)提取15 min和水(1 500 psi，95 ℃)提取45 min，合并各提取物，凍干備用。提取物測定總環烯醚萜、總藏紅花素、總胡蘿卜素和總黃酮含量。提取物得率=提取物質量/梔子果質量(100 g)。

1.3.4 梔子果仁油理化性質的測定

色澤：GB 5525—2008；酸價：GB/T GB 5530—2005；皂化值：GB/T 5534—2008；碘值：GB/T 5532—2008；過氧化值：GB/T 5538—2005；黃曲霉毒素：GB/T 18979—2003。

1.3.5 梔子果仁油脂肪酸成分分析

根據GB/T 17376—2008、GB/T 17377—2008方法采用GC-MC法測定梔子果仁油脂肪酸含量。

甲酯化處理：取50 mg梔子果仁油置于20 mL具塞刻度試管中，加0.5 mol/L KOH-甲醇溶液2 mL，于60 ℃水浴中振蕩皂化15 min，冷卻后，加入三氟化硼-甲醇2 mL，于60 ℃水浴中振蕩甲酯化2 min，冷卻，準確加入正己烷2 mL，振蕩，再加入飽和NaCl溶液2 mL，振蕩，靜置。將上層清液取出吹干，并準確定容到1.0 mL。

GC-MS試驗條件：采用SHIMADZU GCMS-QR 2010 Ulra(日本島津公司)，配備RXI-1ms型彈性石英毛細管(30 m×0.32 mm,0.25 μm)。柱溫最初為120 ℃，保持2 min，隨后以6 ℃/min上升到250 ℃，然后保持15 min。進樣口溫度250 ℃。用氦氣作為載體，流速為2.38 mL/min，分流比為1:5。MS在30～500 m/z監測，在脂肪酸峰面積的基礎上計算其百分比。采用NIST’05數據庫。

1.3.6 梔子果仁油不皂化物的成分組成及主要生物活性物質的定量分析

不皂化物的成分組成及主要生物活性物質的定量分析均采用GC-MS法。

主要生物活性物質對照品混標的制備：分別精密稱取干燥至恒重的標準品適量，用乙醇溶解并定容至5 mL，制成含菜籽甾醇100 μg/mL、麥角甾醇400 μg/mL、菜油甾醇100 μg/mL、豆甾醇400 μg/mL、β-谷甾醇400 μg/mL、γ-生育酚500 μg/mL、α-生育酚2 000 μg/mL、角鯊烯700 μg/mL的混標溶液，經0.22 μm濾膜后進GC-MS分析。

標準曲線制作：將混合標準品溶液分別用乙醇稀釋成不同濃度的樣品，以1 μL的進樣量注入GC-MS，記錄峰面積。分別以各標準品的含量為橫坐標，峰面積為縱坐標，進行線性回歸，得回歸方程，分別為菜籽甾醇y=1×108x-349 067(r=0.998 5)、麥角甾醇y=6×107x-868 085(r=0.999 3)、菜油甾醇y=1×108x-574 836(r=0.998 9)、豆甾醇y=1×108x-92 133(r=0.999 7)、β-谷甾醇y=1×108x-628 083(r=0.998 7)、γ-生育酚y=1×108x-709 939(r=0.998 6)、α-生育酚y=1×108x-3×106(r=0.998 5)和角鯊烯y=2×108x+591 366(r=0.998 5)。

GC-MS條件：采用SHIMADZU GCMS-QR 2010 Ulra(日本島津公司)，配備Rtx-5MS型彈性石英毛細管(30 m×0.32 mm,0.25 μm)。進樣口溫度300 ℃；進樣量1 μL；分流比20:1；載氣：高純氮氣；流速：1 mL/min；程序升溫：初始溫度180 ℃，保持10 min，以20 ℃/min升溫速率升到260 ℃，保持45 min。MS條件：進樣口溫度230 ℃；離子源溫度230 ℃；全掃描方式；溶劑延遲2 min。

不皂化物樣品的制備：準確稱取2.00 g油脂樣品，置于250 mL具塞三角瓶中，加入30 mL 0.5 mol/L KOH-甲醇溶液，80 ℃水浴中震蕩皂化40 min，冷卻。將皂化液轉移至250 mL分液漏斗中，加入40 mL乙醚萃取，重復3次，合并乙醚萃取液，用超純水洗滌至中性，用無水硫酸鈉去除殘水后回收乙醚。殘留物用1.5 mL乙醇復溶，經0.22 μm濾膜后進GC-MS分析。

不皂化物的成分定性采用與NIST’05數據庫比對，定量計算用面積歸一法。主要生物活性物質利用外標法，根據各標準品的回歸方程計算。

1.3.7 總環烯醚萜含量的測定

[9]，精密稱取梔子苷對照品2.00 mg用50%甲醇配成40 μg/mL的標準溶液。以50%甲醇為空白，分別測定不同濃度梔子苷標準液在238 nm波長處吸光度值。以梔子苷濃度(μg/mL)為橫坐標，吸光度值為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方程y=0.022 1x-0.017(r=0.999 5)。

梔子提取物測定238 nm波長處吸光度值，根據梔子苷的標準曲線計算各試樣的總環烯醚萜含量。總環烯醚萜含量以占梔子果實干基計。

1.3.8 總藏紅花素含量的測定

參考文獻[10]，精密稱取藏紅花素-1對照品10.00 mg用50%甲醇配成200 μg/mL的標準溶液。以50%甲醇為空白，分別測定不同濃度標準液在440 nm波長處吸光度值。以藏紅花素-1濃度(μg/mL)為橫坐標，吸光度值為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方程y=0.004 8x-0.015 3(r=0.999 3)。

梔子提取物測定440 nm波長處吸光度值，根據藏紅花素-1的標準曲線計算各試樣的總藏紅花素含量。總藏紅花素含量以占梔子果實干基計。

1.3.9 總類胡蘿卜素的測定

參考文獻[11]，精確稱取梔子提取物0.1 mg用50%甲醇定容至10 mL，測定其在445 nm處的吸光值，以50%甲醇做空白，按公式計算總類胡蘿卜素含量：

X=(1 000×E×V)÷(A×W)

式中：X為類胡蘿卜素含量/mg/kg，E為測得的吸光度值，V為樣品最后的定容體積/mL，W為所取的樣品質量/g，A為類胡蘿卜素的平均消光系數2 500。

1.3.10 總黃酮含量的測定

硝酸-亞硝酸鈉比色法用于總黃酮含量的測定。

精密稱取蘆丁對照品15.0 mg，用甲醇配成150 μg/mL的蘆丁對照品溶液。準確吸取對照品溶液0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00 mL移入10 mL具塞試管中，甲醇定容至5 mL，各加5%亞硝酸鈉溶液0.3 mL，振搖后放置5 min，加入10%硝酸鋁溶液0.3 mL，搖勻后放置6 min，加1.0 mol/L氫氧化鈉溶液2 mL，用甲醇定容至10 mL，靜置10 min。以甲醇為空白，搖勻后在510 nm的波長處測定A值。以蘆丁濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程y=0.007 7x+0.018 3(r=0.999 1)。

梔子提取物配按照上述方法操作，在510 nm波長處測定吸光值，并根據蘆丁的標準曲線計算各試樣的總黃酮含量。

1.4 統計分析

試驗結果采用“SPSS 16.0”統計軟件進行分析，方差分析運用Duncan新復極差法。數據取3個樣方數據的平均值，以平均值±標準差表示。

2 試驗結果

2.1 梔子果實品質比較

2.1.1 主要經濟性狀的差異比較

2種梔子果的經濟性狀檢測結果見表1。由結果可知，2種梔子果實在單果質量、果實高度、果實直徑、果形指數、果皮厚度上都存在極顯著差異(P<0.01)，殼仁比存在顯著差異(P<0.05)，而出籽率無顯著性差異。水梔子的單果質量、果實高度和直徑都顯著高于山梔子，故水梔子的果實產量顯著高于山梔子。

2.1.2 主要營養成分的差異比較

梔子果主要營養成分的測定結果見表2。由表2可知，在相同條件下烘干的兩種梔子果水分含量一致。水梔子果殼中灰分含量顯著高于山梔子，而仁中無顯著性差異。粗脂肪主要集中在梔子果仁中，山梔子和水梔子無顯著性差異，質量分數約為25%，作為一種新型高產量的木本油，具有較大的經濟價值。水梔子果仁中粗蛋白質含量顯著低于山梔子，故在油脂提取時受蛋白質的影響較小。山梔子果仁中的還原糖、可溶性總糖顯著低于水梔子仁，說明在用壓榨法提油時，對山梔子果仁油脂的色澤、出油率影響較小，對榨油機的損傷也較小。另外，2種梔子果仁的膳食纖維、淀粉含量及能量無顯著性差異。所以，綜合考慮兩種梔子果在營養成分上基本一致，在油脂利用評價上也不相上下。

2.1.3 主要功能成分的差異比較

梔子果的主要功能成分含量(占果實干基)見表3。由表3可知，不同品種干燥梔子果脫脂后利用95%乙醇、70%乙醇和水在亞臨界狀態下依次提取，得到的提取物得率無顯著性差異，為14.05%～16.16%。兩種梔子果的總藏紅花素、總類胡蘿卜素和總黃酮含量也無顯著性差異。環烯醚萜含量山梔子果(8.77%)極顯著高于水梔子(5.35%)。以梔子苷為代表的環烯醚萜是梔子中主要的藥效成分，說明山梔子的瀉火除煩的藥用價值相對水梔子略高。

2.2 梔子果仁油品質的比較

2.2.1 主要理化性質比較

對超臨界CO2提取的梔子果仁油的理化性質進行了分析測定，結果見表4。由表4可知，梔子果出油率在13.78%～15.60%之間，水梔子果仁油顏色較山梔子果仁油深，偏深紅色，說明水梔子果仁油中的色素成分更多。其他理化指標兩者無顯著性差異。

2.2.2 脂肪酸組成分析

梔子果仁油的脂肪酸組成分析見表5，離子流圖見圖1。由表5可知梔子果仁油主要由7種脂肪酸組成，其中亞油酸、油酸和棕櫚酸是梔子果仁油中含量最多的3種脂肪酸，占脂肪酸組成的90%以上。梔子果仁油主要為不飽和脂肪酸，不同品種有一定差異，油酸含量山梔子高(P<0.05)，棕櫚酸(P<0.01)含量和亞麻酸(P<0.05)含量則水梔子高。水梔子果仁油總不飽和脂肪酸高于山梔子果仁油。從脂肪酸角度看，梔子果仁油可以視為高級食用油。

表1 梔子果實經濟性狀比較

注：*顯著差異(P<0.05)，**極顯著差異(P<0.01)，余同。

表2 梔子果實主要營養成分比較

表3 梔子果實主要功能成分比較

表4 梔子果仁油理化性質比較

表5 梔子果仁油中主要脂肪酸含量/%

注：*顯著差異(P<0.05)，**極顯著差異(P<0.01)。

注：序號與表5中的序號一致。圖1 2種梔子果仁油GC-MS離子流圖

2.2.3 不皂化物的成分分析

在油脂中還存在不皂化物，山梔子和水梔子果仁油中分別含有1.91%和2.83%的不皂化物。兩種油脂的不皂化物組成經GC-MS分析，根據面積歸一化法得到，結果見表6。由表6可知梔子果仁油的不皂化物主要有甾醇類、三萜醇類、烴類和維生素E類，其中以甾醇類含量最高，且兩者均含有較多的β-谷甾醇和菜油甾醇。2種梔子果仁油不皂化物組成存在一定差異，山梔子果仁油植物甾醇含量(60.65%)高于水梔子(52.58%)，而維生素E類及三萜醇類含量較低。

表6 2種梔子果仁油不皂化物的成分組成及含量/%

2.2.4 主要生物活性物質含量分析

現代醫學研究表明，油脂中某些微量物質對人類健康有益，如甾醇類、維生素E類、角鯊烯等。利用GC-MS外標法定量分析了2種梔子果仁油的主要生物活性物質含量，結果見表7。植物甾醇是植物中的固醇，可以阻斷人體腸道對膽固醇的吸收，因而有效降低血清膽固醇，常被作為功能食品的添加劑使用。梔子果仁油中β-谷甾醇(309.86～416.32 mg/100 g)和菜油甾醇(238.17～343.78mg/100 g)含量較高，不同品種間有一定差異，山梔子果仁油均極顯著高于水梔子果仁油(P<0.01)。維生素E和角鯊烯均為廣泛存在于植物油中的具有較強生物活性的物質，但含量均不高。維生素E是一種脂溶性維生素，是油脂中最重要的抗氧化劑之一。梔子果仁油中的維生素E主要為γ-生育酚和α-生育酚。γ-生育酚在2種梔子果仁油中的含量無顯著性差異，但水梔子果仁油中的α-生育酚含量顯著高于山梔子。角鯊烯是一種高度不飽和烴類化合物，最初從角鯊魚肝臟中發現，具有極強的抗氧化性能和調控動物體膽固醇代謝、防癌抗癌、抗輻射等多種生物活性[12]，被廣泛用于保健食品和化妝品領域。山梔子果仁油中角鯊烯含量顯著高于水梔子果仁油(P<0.05)，兩者的角鯊烯含量較常用食用油高。因此，從植物甾醇、維生素E類和角鯊烯等油脂生物活性物質方面看，梔子果仁油可以作為一種有益于人體健康的功能木本植物油。

表7 梔子果仁油主要生物活性物質的含量/mg/100 g

3 結論

以我國主要的2種結果梔子山梔子和水梔子為原料，系統的比較、評價果實的經濟性狀、主要的營養和功能成分含量及其油脂的理化性質、脂肪酸和不皂化物組成及主要生物活性物質含量。測定結果表明，水梔子在單果重量、果實高度、果實直徑、果皮厚度、殼仁比、果仁的含油率顯著高于山梔子，說明水梔子從采摘、果實產量及產油量上優于山梔子。但總環烯醚萜含量顯著低于山梔子，故從藥效上來講處于劣勢。而其余各項指標山梔子和水梔子無顯著性差異。以超臨界CO2萃取的方法梔子果出油率為15%左右，水梔子稍高，但無顯著性差異。梔子果仁油色澤深紅、透明澄清，理化指標均在國家食用植物油標準范圍內，黃曲霉毒素無檢出，是一種安全的木本油。2種梔子果仁油均以亞油酸、油酸和棕櫚酸為主，不飽和脂肪酸質量分數高達85%左右，其中多不飽和脂肪酸占40%以上，故梔子果仁油可以作為一種高級食用油。梔子果仁油色澤顯紅，說明具有一定含量的梔子特有寶貴藏紅花素類色素。另外兩種梔子果仁油均含有較多的β-谷甾醇、菜油甾醇及VE和角鯊烯等油脂生物活性物質，所以梔子果仁油又可作為一種營養、健康的功能性植物油，值得進一步的研究和開發。

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Analysis of Main Economic Characters of Two Kinds ofGardeniaJasminoidesand Components of Their Nut Oil

Ni Qinxue1Gao Qianxin1Xu Zhifeng1Xu Guangzhi1Weng Xuejun2Zhang Youzuo1

(College of Agriculture and Food Science，Zhejiang A&F University1，Lin′an 311300)(Zhejiang Jiaozhi Technology Co., Ltd2，Lin′an 311307)

GardeniajasminoidesEllisandGardeniajasminoidesvar.radicans Makino were selected as raw materials to study systematically qualities of two main fructiferous varieties ofGardeniajasminoidesin China,and the main economic characters(i.e.fruit weight,pericarp thickness,fruit height,fruit diameter,pericarp seed ratio,seed yield and oil yield),nutritional ingredient(i.e.crude protein,crude oil,dietary fiber,total soluble sugar,reducing sugar,starch and energy)and functional component(i.e.total iridoid glycosides,total crocin,total carotene and total flavonoids)were determined.The physicochemical property,fatty acid and unsaponifiable matter composition,phytosterol,vitamin E and squalene content of gardenia nut oil were also determined analyzed.The results showed that some economic characters ofGardeniajasminoidesvar.radicans Makino(weight and diameter were 2.10 g and 20.47 mm for single fruit)were better than that ofGardeniajasminoidesEllis(0.91 g and 10.84 mm respectively for single fruit),while the total iridoid glycosides content(5.35%)was lower.The oil content in gardenia nut was about 25%,linoleic acid was the main fatty acid(> 48% in both gardenia fruit).The physicochemical properties of both kinds of gardenia nut oil showed no significant difference.The unsaponifiable matters in gardenia nut oil was mainly composed of sterols(more than 50%),triterpenoid alcohols,hydrocarbons and vitamin E.GardeniajasminoidesEllis contained much more total sterols(59.37%)and squalene(11.42%)thanGardeniajasminoidesvar.radicans Makino.Summarily,Gardenia jasminoides var.radicans Makino had the advantage in fruit picking and oil yield,yet contained much lower total iridoid glycosides in fruit and beneficial factors in nut oil than that of Gardenia jasminoides Ellis.The nutritional ingredients and functional components analysis of both gardenia fruit and fruit oil showed no significant difference.The results provided a theoretical basis for comprehensive utilization and development of gardenia fruit.

GardeniajasminoidesEllis,Gardeniajasminoidesvar.radicans Makino,nut oil,economic characters,nutrition component,functional component

TS222.1

A

1003-0174(2017)10-0078-07

浙江省公益性項目(2014C32112)，浙江省省院合作林業科技項目(2011SY02)

2016-07-22

倪勤學，女，1983年出生，副教授，食品加工

張有做，男，1970年出生，教授，食品工程