肉雞新城疫母源抗體衰減規律和免疫程序試驗

盧運戰 ， 程幫照 ， 楊金兵 ， 諸亞平 ， 李 楊 ， 王 穎 ， 劉鵬義 ， 趙宏波

(1．安徽省宣州區畜牧獸醫管理局 , 安徽 宣城 242000 ； 2.安徽省宣城市畜牧獸醫局 , 安徽 宣城 242000 ；3.安徽華衛集團禽業有限公司 , 安徽 宣城 242000)

肉雞新城疫母源抗體衰減規律和免疫程序試驗

盧運戰1， 程幫照2， 楊金兵1， 諸亞平1， 李 楊1， 王 穎3， 劉鵬義3， 趙宏波3

(1．安徽省宣州區畜牧獸醫管理局 , 安徽 宣城 242000 ； 2.安徽省宣城市畜牧獸醫局 , 安徽 宣城 242000 ；3.安徽華衛集團禽業有限公司 , 安徽 宣城 242000)

雞新城疫(ND)是由雞新城疫病毒引起雞的一種急性、高度接觸性、高致死性傳染病，嚴重危害養雞生產，疫苗免疫是預防和控制ND的主要手段，有的養殖場免疫途徑選擇不合理，有的免疫次數過多，有的免疫時機不佳，免疫失敗情況也時有發生，研究雞新城疫母源抗體的消退規律，建立科學合理的免疫程序對新城疫防控有實際意義。

當前多數肉雞養殖場在1日齡采用噴霧、點眼或滴鼻等方式進行免疫，本試驗中，對1日齡雛雞用ND活苗分別進行噴霧、點眼和滴鼻3種免疫途徑接種，設定對照組，通過檢測抗體水平，可確定1日齡的免疫途徑，也為第二次免疫時間提供科學依據；第二次加強免疫中，選擇注射和飲水兩種方法，比較免疫效果，從而建立肉雞新城疫免疫程序。

1 材料與方法

1.1 疫苗 雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯活疫苗(HB1株+H120株)，購自北京信得威特科技有限公司，生產批號：201603001；用于噴霧、滴鼻、點眼和飲水免疫，免疫劑量均按說明書要求操作。雞新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感(H9亞型)三聯滅活疫苗(LaSota株+M41株+WD株)(派力優)，購自四川省華派生物制藥有限公司，生產批號：2016004；用于注射免疫，免疫劑量按說明書要求操作。

1.2 檢測試劑 雞新城疫血凝抑制試驗抗原，購自哈爾濱動物生物制品國家工程研究中心有限公司(批號：20151103)；雞新城疫血凝抑制試驗陽性血清和陰性血清，購自哈爾濱動物生物制品國家工程研究中心有限公司(批號：20151101)。

1.3 試驗設計 1日齡健康皖江黃雛雞2 400羽，由安徽華衛集團禽業有限公司提供，分成5組，共2個批次，第一組來源同一批次，共300羽，第二、三、四、五組來源同一批次，其中第三組900羽，其他每組300羽。第一、二組作為對照，不進行任何免疫；第三組1日齡雛雞進行ND噴霧免疫，第四組1日齡雛雞進行ND點眼免疫，第五組1日齡雛雞進行ND滴鼻免疫。試驗雞由安徽華衛集團禽業有限公司在隔離場所按常規方法進行飼養管理[1]，分別于1、4、7、10、13、16、19、22日齡采集血樣，每組每次采樣30羽，18日齡前用心臟采血，18日齡后翅靜脈采血，采樣后雞只廢棄，血樣放于室溫待自然淅出血清后，取血清于離心管中，放置于-20 ℃冰箱冷凍保存待檢。13日齡時，選取第三組噴霧免疫組雞600羽，平均分成A、B兩小組，A組進行注射免疫，B組進行飲水免疫，每隔4天分別進行翅靜脈采血30羽，血樣放于室溫待自然淅出血清后，取血清于離心管中，放置于-20 ℃冰箱冷凍保存待檢。

1.4 抗體檢測方法 按照國標《新城疫診斷技術》(GB/T 16550-2008) 中血凝和血凝抑制試驗(HA-HI)方法進行抗體檢測。每組按采樣日齡分別計算平均值。

2 結果

2.1 不同批次皖江黃肉雞新城疫母源抗體衰減規律 對兩組不同批次的試驗雞群，采集其不同日齡血樣進行ND抗體的HI效價測定。由表1可知，兩組1日齡皖江黃雛雞的ND母源抗體HI效價平均值分別是7.8 log2、和7.5 log2， 10 日齡分別降至5.95 log2和4.60 log2，22 日齡降至2.65 log2和2.35 log2。依據母源抗體滴度衰減規律，10～13日齡進行1次加強免疫為宜。

表1 兩批次皖江黃雞ND母源抗體的動態變化 (log2)

2.2 同一批次1日齡雛雞不同免疫接種方法新城疫抗體測定 對同一批次的第2、3、4、5組雞群在不同日齡采樣后檢測新城疫抗體，檢測結果如表2所示，經噴霧、點眼、滴鼻免疫后，免疫組抗體滴度比空白對照組略高，但抗體均勻度有所提升，3種免疫途徑間的免疫效果差異不顯著。

表2 同一批次1日齡雛雞不同免疫方法ND抗體的動態變化 (log2)

2.3 1日齡噴霧免疫，13日齡注射免疫和飲水免疫效果監測 13日齡時，采用注射免疫和飲水免疫兩種方法分別進行ND第二次免疫，抗體監測結果如表3所示，由此可知，1日齡進行噴霧免疫，13日齡進行注射免疫可獲得良好的ND免疫效果；1日齡進行噴霧免疫，13日齡進行飲水免疫ND免疫效果不明顯。

表3 1日齡噴霧免疫，13日齡注射免疫和飲水免疫效果監測 (log2)

3 討論

測定ND母源抗體的衰減規律對于制定科學合理的ND免疫程序是十分重要的基礎性工作，本試驗選取了兩組不同批次的皖江黃雞為試驗對象，研究母源抗體衰減規律。試驗中，兩批次皖江黃雞ND母源抗體高低有所不同，這與父母代雞的ND抗體高低直接相關，隨著雞日齡的增長，血清中母源抗體水平逐漸降低，至22日齡時，兩批皖江黃雞的母源抗體退到2.5 log2左右。選擇其中一批試驗雞，對1日齡雛雞分別進行噴霧、點眼和滴鼻免疫后，測定其血清中ND抗體，通過數據分析可以得出，3種免疫接種方法，其血清中ND抗體差異不顯著，但與不免疫的空白對照組相比，抗體滴度下降較慢，抗體均勻度有所提高，考慮到操作簡易性，1日齡噴霧免疫是比較不錯的選擇。

在第二次免疫中，根據1日齡雛雞噴霧免疫后抗體的滴度下降規律，在10-13日齡時，抗體滴度降至5.0 log2左右，此時是加強免疫的最好時機，以弱毒苗飲水和死苗注射兩種免疫途徑進行，每隔4 d監測抗體1次，通過抗體滴度數據不難發現，注射免疫可獲得可靠的免疫抗體滴度，抗體峰值較高，最高可達9.68 log2，均勻度高；而飲水免疫后，效果不明顯，峰值最高只達到5.10 log2，離散度高，注射免疫效果明顯好于飲水免疫。

在傳染病的預防接種中，局部免疫作用有利于封鎖入侵門戶，是防制傳染病的較好措施。由于新城疫病毒，對黏膜有特殊的親嗜性，極易經呼吸道感染而發病，雛雞早期抵抗ND病毒感染的機制主要依靠的是黏膜的局部免疫作用。通過疫苗在體內的占位性免疫，先入為主，干擾野毒的入侵。弱毒活疫苗通過滴鼻、點眼和氣霧途徑免疫，均可產生局部黏膜抗體和免疫記憶細胞，且這種抗體的產生不受母源抗體的影響，因而1日齡進行噴霧免疫，抗體滴度雖不能很大幅度提高，但對于早期新城疫的防控具有重要意義。周寶貴等[2]提倡1日齡進行活苗免疫。

綜上所述，根據母源抗體衰減規律和黏膜的局部免疫作用原理，以及本試驗的監測結果，肉雞新城疫免疫程序推薦為1日齡用活苗進行噴霧免疫，13日齡采用滅活苗進行注射免疫，可取得良好效果。這種弱毒疫苗和滅活疫苗間隔免疫法與孟建斌等[3]報道的相符。

[1] 馮永志. 皖江黃雞飼養管理技術[J]. 農技服務,2011,28(7):1 017-1 055.

[2] 周寶貴,盧國強,邢千旺，等. 雞群新城疫免疫應堅持的原則[J]. 中國家禽,2005,27(21):51.

[3] 孟建斌,溫志醫,王興龍，等. 弱毒疫苗和滅活疫苗間隔免疫法提高雞群新城疫苗免疫效果的研究[J]. 畜牧獸醫科技信息,2014,05:13-14.

S855.3

B

0529-6005(2017)09-0051-02

2017-01-16

盧運戰(1980-)，男，獸醫師，碩士，主要從事動物疫病防控工作，E-mail: lyz0563@163.com