西藏謝通門縣山羊球蟲感染情況調(diào)查

常艷凱 ， 毋亞運 ， 鄭雙健 ， 王 璐 ， 李東方 ， 李家奎 ， 張龍現(xiàn) ， 張慧正 ， 張素梅

(1.河南農(nóng)業(yè)大學牧醫(yī)工程學院 ， 河南 鄭州 450002 ； 2. 西藏農(nóng)牧學院動物科學學院 ， 西藏 林芝 860000 ; 3.華中農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院 ， 湖北 武漢 430070 ； 4.河南省汝陽縣衛(wèi)生監(jiān)督所付店分所 ， 河南 汝陽 471200)

西藏謝通門縣山羊球蟲感染情況調(diào)查

常艷凱1， 毋亞運1， 鄭雙健1， 王 璐1， 李東方1， 李家奎2，3， 張龍現(xiàn)1， 張慧正4， 張素梅1

(1.河南農(nóng)業(yè)大學牧醫(yī)工程學院 ， 河南 鄭州 450002 ； 2. 西藏農(nóng)牧學院動物科學學院 ， 西藏 林芝 860000 ; 3.華中農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院 ， 湖北 武漢 430070 ； 4.河南省汝陽縣衛(wèi)生監(jiān)督所付店分所 ， 河南 汝陽 471200)

為了解西藏謝通門縣山羊球蟲的感染情況，采用飽和蔗糖溶液漂浮法,對該地區(qū)采集的260份山羊新鮮糞便樣品進行了顯微鏡檢查，并對球蟲種類進行了形態(tài)學鑒定。結果：該地區(qū)山羊球蟲總感染率為81.15%(211/260)，共感染12種山羊艾美耳球蟲(Eimeria)，其中艾麗艾美耳球蟲(E.alijevi)和蒼白艾美耳球蟲(E.pallida)的感染率分別為52.7%(137/260)和50.8%(132/260)，為優(yōu)勢蟲種。山羊感染球蟲多呈混合感染，混合感染率為61.7%(129/209)，并首次在西藏地區(qū)發(fā)現(xiàn)了斑點、柯察、蒼白艾美耳球蟲。依據(jù)本次調(diào)查山羊球蟲的結果和艾美耳球蟲孢子化卵囊特征，制訂了山羊球蟲檢索表。結論：西藏謝通門縣山羊球蟲的感染情況較為嚴重，建議積極做好防控措施，減少球蟲感染。

球蟲感染 ； 種類 ； 西藏 ； 山羊

西藏地區(qū)作為中國五大牧場之一，動物種類繁多，一直以來畜牧業(yè)在其生產(chǎn)總值中占有較大比重。2015年西藏家畜存欄量有2 188萬頭，其中山羊有533萬頭，占西藏家畜總量的24.3%(國家統(tǒng)計中心http://t.cn/RI9Zg1z)。西藏地區(qū)山羊的養(yǎng)殖主要以個體放牧飼養(yǎng)為主，交通不便和管理粗放導致了山羊球蟲病治療的滯后。羊球蟲病引起的腹瀉和亞臨床感染(消瘦、發(fā)育停滯)嚴重影響了養(yǎng)羊業(yè)的經(jīng)濟效益。國內(nèi)外關于山羊球蟲感染情況調(diào)查較多，但西藏地區(qū)作為傳統(tǒng)牧區(qū)，且又處于高海拔地區(qū)，關于山羊球蟲的報道相對較少。日喀則地區(qū)位于青藏高原西南部，山羊存欄量居西藏全區(qū)之首，謝通門縣是日喀則地區(qū)主要的羊生產(chǎn)區(qū)之一[1]。為了弄清高海拔地區(qū)山羊球蟲感染情況，為本病的防控提供科學的依據(jù)，本研究對平均海拔 4 100 m 以上的日喀則地區(qū)謝通門縣牧區(qū)山羊球蟲感染情況進行了調(diào)查，以期為高原地區(qū)山羊寄生蟲病的防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品采集 本調(diào)查于2016年6-7月在西藏謝通門縣(位于日喀則地區(qū)中北部，東經(jīng)87°4′至89°1′，北緯29°18′至30°26′，平均海拔4 100 m以上)4個鄉(xiāng)鎮(zhèn)7個不同放牧地點隨機采集了260份山羊糞便，每份樣品20～30 g。每份加2.5%重鉻酸鉀，置于4 ℃冰箱中保存。

1.2 檢查方法 應用飽和蔗糖漂浮法對球蟲樣本進行陽性篩選。參考Becker[2]的方法進行球蟲的收集與培養(yǎng)。

1.3 蟲種鑒定 為確定球蟲的種類，將孢子化球蟲卵囊置于顯微鏡(OLYMPUS BX53)下進行鑒定。根據(jù)卵囊大小、形狀、卵囊結構、內(nèi)殘體的有無和孢子囊形狀進行形態(tài)學定種[3-4]。

2 結果與分析

2.1 球蟲感染情況 260份糞便樣品中，檢測到211份球蟲陽性樣品，感染率為81.2%(211/260)。因部分樣品球蟲感染量小，未進行球蟲孢子化培養(yǎng)，對211份球蟲陽性樣品中的209份球蟲進行了形態(tài)學鑒定，共鑒定出12種山羊艾美耳球蟲。感染率分別為：艾麗艾美耳球蟲(E.alijevi)52.7%(137/260)，蒼白艾美耳球蟲(E.pallida)50.8%(132/260)，克氏艾美耳球蟲(E.christenseni)10.8%(28/260)，柯察艾美耳球蟲(E.kocharli)9.6%(25/260)，家山羊艾美耳球蟲(E.hirci)8.8%(23/260)，阿普艾美耳球蟲(E.apsheronica)7.3%(19/260)，阿氏艾美耳球蟲(E.arloingi)5%(13/260)，山羊艾美耳球蟲(E.caprina)4.2%(11/260)，約奇艾美耳球蟲(E.jolchijevi)2.7%(7/260)，斑點艾美耳球蟲(E.punctata)2.7%(7/260)，妮氏艾美耳球蟲(E.ninakohlyakimovae)1.5%(4/260)，羊艾美耳球蟲(E.caprovina)0.4%(1/260)。

本次調(diào)查顯示，山羊球蟲的混合感染率為61.7%(129/209)。陽性樣本中，最多有7種球蟲的混合感染，平均感染1.9種球蟲?；旌细腥?、3、4、5、7種球蟲的所占的比率分別為38.3%、15.8%、6.7%、0.5%、0.5%。

2.2 山羊球蟲種類及孢子化卵囊形態(tài)特征 本次調(diào)查檢測到的山羊球蟲種類及孢子化卵囊形態(tài)特征描述如下(圖1)：(1)約奇艾美耳球蟲(E.jolchijevi)：卵囊大小31.4(27.7～41.6)μm×22.3(18.4～28.6)μm，呈壺形或罐狀，有極帽且極帽稍平，近極帽端較寬，有卵膜孔，無卵囊殘體，孢子囊橢圓形，大小14.3(11.7～16.9)μm×7.7(6.1～10.4)μm，有斯氏體，有孢子囊殘體；(2)家山羊艾美耳球蟲(E.hirci)：卵囊大小26.1(19.2～30.2)μm×19.1(15.4～20.8)μm，寬橢圓形，或近似球形，卵囊壁光滑，有極帽，有卵膜孔，無卵囊殘體，孢子囊寬橢圓形，大小11.2(9.0～13.1)μm×7.7(6.2～9.3)μm，有斯氏體，有孢子囊殘體；(3)阿氏艾美耳球蟲(E.arloingi)：卵囊大小30.5(25.6～38.7)μm× 21.3(17.9～26.0)μm，橢圓形，兩邊相對平直，卵囊壁光滑，有極帽，有卵膜孔，無卵囊殘體，孢子囊長橢圓形，大小14.8(13.0～17.9)μm×7.5(5.6～8.2)μm，無斯氏體，有孢子囊殘體；(4)克氏艾美耳球蟲(E.christenseni)：卵囊大小40.9(36.4～46.1)μm×26.1(24.3～28.6)μm,卵圓形，卵囊壁光滑，有極帽，有卵膜孔，無卵囊殘體，孢子囊寬橢圓形，大小15.3(13.5～17.4)μm×9.7(8.2～10.9)μm，斯氏體不明顯，有孢子囊殘體；(5)阿普艾美耳球蟲(E.apsheronica)：卵囊大小33.4(22.9～38.4)μm× 24.8(22.5～28.2)μm，尖卵圓形，卵囊外壁較厚，無極帽，有卵膜孔，且卵膜孔內(nèi)陷成一個小孔，無卵囊殘體，孢子囊卵圓形，大小14.5(12.8～17.9)μm×8.4(7.7～10.2)μm，斯氏體不明顯，有孢子囊殘體；(6)羊艾美耳球蟲(E.caprovina)：卵囊大小32.8(26.1～41.1)μm×26.4(20.5～38.8)μm，短橢圓形或近似球形，卵囊壁光滑，無極帽，有卵膜孔，無卵囊殘體，孢子囊長橢圓形，大小15.3(12.8～17.7)μm×8.2(7.2～10.4)μm,有斯氏體，有孢子囊殘體；(7)斑點艾美耳球蟲(E.punctata)：卵囊大小30.2(25.6～35.8)μm×22.3(17.9～25.6)μm，卵囊呈橢圓形、近似球形或卵圓形，卵囊壁粗糙，呈波浪狀，有極帽，有卵膜孔，有卵囊殘體，孢子囊呈梨形，大小12.1(10.2～15.4)μm×6.9(5.1～8.2)μm，有斯氏體，有卵囊殘體；(8)山羊艾美耳球蟲(E.caprina)：卵囊大小37.0(28.1～42.9)μm×25.3(20.5～28.6)μm，橢圓形，卵囊壁光滑，無極帽，有卵膜孔，無卵囊殘體，孢子囊長橢圓形，大小15.8(11.7～18.2)μm×9.0(6.4～10.4)μm，有斯氏體，有孢子囊殘體；(9)柯察艾美耳球蟲(E.kocharli)：卵囊大小51.5(43.5～57.4)μm×38.5(30.2～44.2)μm，橢圓形或卵圓形，卵囊表面有顆粒狀浮起，有橫紋，有極帽，有卵膜孔，無卵囊殘體，孢子囊長橢圓形，大小20.3(17.4～27.3)μm×10.7(9.0～13.0)μm，有斯氏體，有孢子囊殘體；(10)妮氏艾美耳球蟲(E.ninakohlyakimovae)：卵囊大小24.9(20.5～29.4)μm×19.7(15.4～25.6)μm，卵圓形，卵囊壁光滑，無極帽，有卵膜孔，無卵囊殘體，孢子囊橢圓形，大小12.9(10.2～15.4)μm×7.6(6.4～9.1)μm，有斯氏體，有卵囊殘體；(11)艾麗艾美耳球蟲(E.alijevi)：卵囊大小17.8(15.4～21.1)μm× 15.7(12.8～19.5)μm，球形或近似球形，卵囊壁光滑，無極帽，無卵膜孔，無卵囊殘體，孢子囊卵圓形，大小9.5(7.7～11.7)μm×5.3(4.2～6.5)μm，斯氏體不明顯，有孢子囊殘體；(12)蒼白艾美耳球蟲(E.pallida)：卵囊大小18.2(14.3～22.5)μm×13.2(12.2～15.4)μm，長橢圓形，卵囊壁光滑，無極帽，無卵膜孔，無卵囊殘體，孢子囊長橢圓形，大小7.5(5.0～9.1)μm×4.8(3.1～6.4)μm，無斯氏體，無孢子囊殘體。

圖1 山羊孢子化艾美耳球蟲卵囊圖A：約奇艾美耳球蟲 B：家山羊艾美耳球蟲 C：阿氏艾美耳球蟲 D：克氏艾美耳球蟲 E：阿普艾美耳球蟲 F：羊艾美耳球蟲 G：斑點艾美耳球蟲 H：山羊艾美耳球蟲 I：柯察艾美耳球蟲 J：妮氏艾美耳球蟲 K：艾麗艾美耳球蟲 L：蒼白艾美耳球蟲

2.3 鑒別山羊球蟲檢索表 山羊球蟲種類較多，結構上較為相似，但不同種類形態(tài)上有差異，依據(jù)國內(nèi)外相關文獻[3-4]和本次檢測到的球蟲種類，制訂了山羊艾美耳球蟲檢索表(表1)，為其他學者在鑒定種類時提供參考。

3 討論

本次對謝通門縣區(qū)域山羊球蟲感染情況調(diào)查，結果顯示球蟲的感染率較為普遍(81.2%，211/260)。和夏晨陽[5]7月份對青藏高原尼木縣放牧山羊的調(diào)查(86.7%，1 040/1 200)、韓瓊瓊[6]在云南、貴州等高山地區(qū)對肉用山羊球蟲的調(diào)查(88.0%，243/276)的結果相一致，朱丹[7]在河南(95.6%，807/844)和Penzhorn[8]在美國(97.2%，599/616)的結果都高于本調(diào)查，這可能因為高山地區(qū)較平原溫度低，氣候不適于卵囊的生長發(fā)育。但是遠遠高于閻曉菲[9]在新疆(71.4%，893/1 251)和Cai[10]對寧夏地區(qū)放牧山羊(86.7%，26/30)的報道，可能與空氣的濕度對卵囊的感染傳播有影響。

自Marotel第一次描述山羊的球蟲，到如今被描述的山羊球蟲多達20種，但其中一些種類被重復描述，且部分種類是在綿羊體內(nèi)發(fā)現(xiàn)而當作山羊感染的種類[3]。一些科學家在山羊和綿羊間進行了球蟲的交叉感染[11-12]，以期證明山羊和綿羊可以同時感染相同種類的球蟲，但都未得到預期結果。綜合國內(nèi)外相關文獻，多數(shù)學者認為感染山羊球蟲有13種[3-4,9]。

本次在謝通門縣地區(qū)共發(fā)現(xiàn)12種山羊艾美耳球蟲，其中斑點、柯察、蒼白艾美耳球蟲在西藏地區(qū)首次報道，國內(nèi)其他地區(qū)也有檢測記錄[5-6,10]。據(jù)Andrews[13]統(tǒng)計，現(xiàn)有的艾美耳球蟲中，阿氏、克氏、家山羊、山羊、妮氏、艾麗艾美耳球蟲是在山羊體內(nèi)發(fā)現(xiàn)最多的蟲種。本次調(diào)查中艾麗和蒼白艾美耳球蟲為本試驗中的優(yōu)勢蟲種，李夢婕[14]對堯山白山羊的調(diào)查阿氏、克氏、艾麗艾美耳球蟲為優(yōu)勢蟲種，涂宜強[15]報道的陜西大耳山羊優(yōu)勢蟲種為阿氏、雅氏及艾氏艾美耳球蟲。夏晨陽[5]在西藏對放牧山羊球蟲的調(diào)查艾麗、阿氏、山羊、雅氏、約奇、羊艾美耳球蟲為優(yōu)勢蟲種。不同地區(qū)的優(yōu)勢蟲種不同，可能與地區(qū)的差異、生活環(huán)境因素和山羊品種有關，有待進一步的研究。

表1山羊艾美耳球蟲檢索表

檢索特征檢索特征或檢索結果1無極帽(妮氏、山羊、艾麗、羊、阿普、蒼白)2 有極帽(約奇、家山羊、阿氏、克氏、斑點、柯察)52卵膜孔不明顯，或無，卵囊球形到橢圓形，小型體積(艾麗、蒼白)3 有卵膜孔卵膜孔不凹陷(山羊、羊、妮氏)4 有卵膜孔且卵膜孔呈小凹陷阿普3卵囊呈球形或近似球形艾麗 卵囊呈橢圓形蒼白4卵囊卵圓形，中小型體積(20～29．4)μm×(15．4～25．6)μm妮氏 卵囊橢圓形，孢子囊長橢圓形，大型體積山羊 卵囊短橢圓形或近似球形，大型體積羊5卵囊壁光滑6 卵囊壁粗糙76卵囊橢圓形，兩側相對平直阿氏 卵囊呈罐狀約奇 卵囊寬橢圓形或近似球形，孢子囊寬橢圓形，中小型體積(19．2～30．2)μm×(15．4～20．8)μm家山羊 卵囊卵圓形，孢子囊寬卵圓形，大型體積(36．4～46．1)μm×(24．3～28．6)μm克氏7卵囊壁呈波浪花紋狀，有卵囊殘體，中型體積(25．6～35．8)μm×(17．9～25．6)μm斑點 卵囊表面有粒狀浮起，有橫紋，無卵囊殘體，大型體積(43．5～57．4)μm×(30．2～44．2)μm柯察

本次調(diào)查球蟲在山羊體內(nèi)主要呈現(xiàn)混合感染(61.7%，129/209)，混合感染2～7種蟲種，和國內(nèi)外其他學者調(diào)查基本一致，但是在目前的研究中涉及的混合感染的蟲種的平均數(shù)量小于Skirnisson[16]所報道的每個樣品平均感染7.4種。球蟲的混合感染也被認為是引起山羊球蟲病的一個重要因素。山羊感染球蟲病時會出現(xiàn)腹瀉，甚至死亡。有研究表明，球蟲病引起的腹瀉可能是引起羊死亡的第二大病因[17]。并且球蟲病會伴發(fā)感染蠕蟲病、 肺炎、 疥癬等疾病，如果不及時治療，會導致山羊的死亡率增加。

綜上所述，西藏謝通門縣地區(qū)山羊球蟲的感染率和混合感染率均較高，且感染蟲種較多。本次調(diào)查在高原地區(qū)首次發(fā)現(xiàn)了斑點、柯察、蒼白艾美耳球蟲，更為重要的是山羊球蟲檢索表的制定為今后其他學者進行羊球蟲病的防控提供了重要參考。

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InvestigationofCoccidialInfectionandSpeciesinGoatsinXaitongmoin,Tibet

CHANG Yan-kai1, WU Ya-yun1, ZHENG Shuang-jian1, WANG Lu1, LI Dong-fang1, LI Jia-kui2,3, ZHANG Long-xian1, ZHANG Hui-zheng4, ZHANG Su-mei1

(1. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China;2.College of Animal Science, Tibetan Agricultural and Animal Husbandry College, Linzhi 860000,China;3. College of Veterinary Medicine, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China;4. Fudian Branch Institute of Ruyang Animal Health Inspection Institute, Ruyang 471200, China)

In order to understand the infection situation of goat coccidiosis in Xaitongmoin County of Tibet, 260 goats fecal samples were examined by the sheather floatation method and theEimeriaspecies were identified based on morphological features and size of the sporulated oocysts. Results showed that the prevalence ofEimeriain goats was 81.15% (211/260), and theEimeriaalijeviandEimeriapallidawere the dominant species in 12 identified species in this study, with 52.7% (137/260) and 50.8% (132/260) infection rates and concurrent infection rate 61.7% (129/209)simultaneously.E.punctate,E.kocharli, andE.pallidawere first discovered in Tibet. A retrieval table ofEimeriaspp. in goats was established to identify the species according to the characteristics of sporulated oocysts under microscopy. From above all, effective measures should be taken to control the coccidial infection in Tibet.

Coccidial infection ; Species ; Tibet ; Goats

ZHANG Su-mei

S858.27

A

0529-6005(2017)09-0009-04

2017-02-27

國家現(xiàn)代肉羊產(chǎn)業(yè)技術體系建設專項資金項目(NYCYTX-39)；國家現(xiàn)代肉牛牦牛產(chǎn)業(yè)技術體系建設專項資金項目(CARS-38)

常艷凱(1992-)，男，碩士生，研究方向為人獸共患寄生蟲病學，E-mail:changyankai369@163.com

張素梅，E-mail：zhsumei2815@163.com