EB病毒抗體及DNA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)嬰幼兒傳染性單核細(xì)胞增多癥的診斷價(jià)值

劉 婕，程祿山，荊成寶

EB病毒抗體及DNA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)嬰幼兒傳染性單核細(xì)胞增多癥的診斷價(jià)值

劉 婕，程祿山，荊成寶

目的分析EB病毒(EBV)抗體及EBV-DNA聯(lián)合檢測(cè)在嬰幼兒傳染性單核細(xì)胞增多癥(infectious mononuleosis， IM)中的診斷價(jià)值。方法選擇我院兒科2014年1月—2016年5月診斷的120例IM患兒，分別于入院第1、2、3、4周采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)EBV-IgM，采用熒光定量法檢測(cè)EBV-DNA載量，以及EBV-IgM聯(lián)合EBV-DNA檢測(cè)，比較3種檢測(cè)方法的陽(yáng)性率。結(jié)果入院第1、2、3、4周EBV-IgM檢測(cè)及聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率均高于EBV-DNA檢測(cè)陽(yáng)性率，且第1、2周聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率亦高于EBV-IgM檢測(cè)陽(yáng)性率，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)；入院第3、4周聯(lián)合檢測(cè)與EBV-IgM檢測(cè)陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論EBV-IgM檢測(cè)對(duì)于嬰幼兒IM早期診斷更為敏感，而早期EBV-IgM聯(lián)合EBV-DNA檢測(cè)可進(jìn)一步提高診斷率。

傳染性單核細(xì)胞增多癥；EB病毒抗體；EB病毒DNA

傳染性單核細(xì)胞增多癥(infectious mononuleosis， IM)是由EB病毒(EBV)感染所導(dǎo)致的一類(lèi)傳染性疾病。IM不同地域發(fā)病率不盡相同，以學(xué)齡前兒童好發(fā)，研究表明我國(guó)IM好發(fā)于2～3歲兒童，而國(guó)外好發(fā)年齡稍大[1-2]。EBV可在體內(nèi)長(zhǎng)期潛伏，大多數(shù)成年人均有EBV感染史[3-4]。盡管目前IM有明確的診斷標(biāo)準(zhǔn)，但是疾病早期臨床表現(xiàn)并無(wú)特異性，易被誤診[5]。本病若得不到及時(shí)的干預(yù)治療可發(fā)生脾破裂等嚴(yán)重并發(fā)癥，甚者可誘發(fā)嗜血細(xì)胞綜合征等危及患者生命，故IM的早期診斷尤為重要[6-7]。本研究通過(guò)分析EBV-IgM聯(lián)合EBV-DNA檢測(cè)在嬰幼兒IM診斷中的價(jià)值，旨在為提高其早期診斷敏感性提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①表現(xiàn)為發(fā)熱、肝脾增大、淋巴結(jié)增大等臨床癥狀，符合IM的診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]；②所有研究對(duì)象的監(jiān)護(hù)人均簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并先天畸形及嚴(yán)重臟器功能不全者；②合并惡性腫瘤者；③資料欠缺或不能配合本研究的患兒。

1.2研究對(duì)象 選取我院兒科2014年1月—2016年5月收治的符合上述納入及排除標(biāo)準(zhǔn)的120例IM患者，其中男70例，女50例；年齡為4個(gè)月～3歲，平均(15.25±7.56)個(gè)月。病程3～20(10.75±3.23)d。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。

1.3檢測(cè)方法

1.3.1EBV-IgM檢測(cè)：所有患兒于入院后第1、2、3、4周清晨空腹抽取肘靜脈血5 ml，置入4℃冰箱中待測(cè)。應(yīng)用全自動(dòng)酶免分析儀并采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行EBV-IgM檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自深圳亞輝龍公司，試驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)規(guī)范進(jìn)行。

1.3.2EBV-DNA載量檢測(cè)：所有患兒采血時(shí)間和方法同EBV-IgM檢測(cè)。應(yīng)用7300實(shí)時(shí)定量PCR分析儀(美國(guó)ABI公司生產(chǎn))，并采用熒光定量法進(jìn)行EBV-DNA檢測(cè),試劑盒購(gòu)自中山大學(xué)達(dá)安基因公司，試驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)規(guī)范進(jìn)行。

1.4判定標(biāo)準(zhǔn) 觀察120例IM患兒分別采用單一EBV-IgM檢測(cè)、EBV-DNA檢測(cè)及二者聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果。EBV-IgM以S/CO>1.000定義為陽(yáng)性；EBV-DNA以>5.0E+02定義為陽(yáng)性。以EBV-IgM或EBV-DNA任一陽(yáng)性判定為聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示，比較采用χ2檢驗(yàn)。以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

2 結(jié)果

入院第1、2、3、4周EBV-IgM檢測(cè)及聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率均高于EBV-DNA檢測(cè)陽(yáng)性率，且第1、2周聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率亦高于EBV-IgM檢測(cè)陽(yáng)性率，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)；第3、4周聯(lián)合檢測(cè)與EBV-IgM檢測(cè)陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 120例嬰幼兒傳染性單核細(xì)胞增多癥患者EB病毒標(biāo)志物檢測(cè)陽(yáng)性率比較[例(%)]

注：與EBV-DNA檢測(cè)相比，aP<0.05,bP<0.01;與EBV-IgM檢測(cè)相比，cP<0.05,dP<0.01

3 討論

IM在兒童中好發(fā)，特別是嬰幼兒，臨床無(wú)特征性表現(xiàn)，早期誤診較為多見(jiàn)，故借助實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測(cè)EBV感染非常重要[9-11]。而EBV-IgM在IM疾病急性期有升高的特性，且近年來(lái)送檢的IM血清標(biāo)本大多是行嗜異性凝集試驗(yàn)，該試驗(yàn)可檢出一種暫時(shí)出現(xiàn)、凝集紅細(xì)胞的IgM型抗體即嗜異性抗體。但EBV-IgM檢測(cè)早期診斷的敏感性不足，故本研究觀察EBV-IgM聯(lián)合EBV-DNA檢測(cè)對(duì)于EBV的早期診斷價(jià)值。

本研究結(jié)果顯示，在IM患兒入院第1周時(shí)，EBV-IgM檢測(cè)陽(yáng)性率為80.83%，表明患兒發(fā)病1周左右體內(nèi)已存在抗體；入院第2周時(shí)，患兒EBV-IgM檢測(cè)陽(yáng)性率為89.17%，入院第3、4周EBV-IgM檢測(cè)陽(yáng)性率分別為73.33%、47.50%，表明入院第2周時(shí)患兒體內(nèi)EBV-IgM含量已達(dá)最高峰，隨時(shí)間的延長(zhǎng)，EBV-IgM檢測(cè)陽(yáng)性率逐漸下降[12]，與既往其他研究報(bào)道結(jié)果相符[13]。故對(duì)IM患者在發(fā)病1～3周時(shí)，應(yīng)用EBV-IgM檢測(cè)可提高其早期診斷率。本組患兒在入院第1、2、3、4周行EBV-DNA檢測(cè)陽(yáng)性率分別為63.33%、38.33%、36.67%、0，表明EBV-DNA檢測(cè)陽(yáng)性率及載量呈逐漸降低的趨勢(shì)；其中1例從第1周開(kāi)始EBV-DNA就轉(zhuǎn)為陰性，1例從第2周開(kāi)始轉(zhuǎn)為陰性，還有1例一直檢測(cè)為陰性，表明部分患兒體內(nèi)檢測(cè)不到病毒DNA，與相關(guān)研究報(bào)道結(jié)果相符[14-15]。故對(duì)IM患者采用EBV-DNA檢測(cè)作為診斷標(biāo)準(zhǔn)是不合理的[16]。但因嬰幼兒各器官組織功能尚未發(fā)育完善，EBV-IgM和EBV-DNA在患兒體內(nèi)水平不高，故可能存在不易檢出的問(wèn)題，而EBV-IgM和EBV-DNA聯(lián)合檢測(cè)可彌補(bǔ)其弊端，可使檢測(cè)結(jié)果更精準(zhǔn)[17]。本研究結(jié)果顯示：EBV-DNA聯(lián)合EBV-IgM檢測(cè)，在入院第1、2周檢測(cè)陽(yáng)性率高于EBV-IgM檢測(cè)陽(yáng)性率，表明早期聯(lián)合檢測(cè)較單一EBV-IgM檢測(cè)可明顯提高IM患者檢測(cè)陽(yáng)性率及診斷敏感性[18]；而在入院第3、4周聯(lián)合檢測(cè)與EBV-IgM檢測(cè)陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能和樣本的抽樣誤差相關(guān)，且第3、4周聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率變化較小，故此時(shí)間段行聯(lián)合檢測(cè)無(wú)很大意義[19]。

綜上，在早期單獨(dú)應(yīng)用EBV-IgM和EBV-DNA檢測(cè)的情況下，EBV-IgM檢測(cè)對(duì)于嬰幼兒IM診斷更為敏感，而早期聯(lián)合檢測(cè)更可明顯提高診斷率，但是病程后期聯(lián)合檢測(cè)意義不大。

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ValueofCombinedDetectionofEBVirusAntibodyandItsDNAinDiagnosisofInfectiousMononucleosisSyndromeinInfantsandYoungChildren

LIU Jie, CHENG Lu-shan, JING Cheng-bao

(Department of Clinical Laboratory, Central Hospital of Ankang City, Ankang, Shaanxi 725000, China)

ObjectiveTo analyze value of combined detection of epstein-barr virus (EBV) antibodies and EBV-DNA in diagnosis of infectious mononucleosis syndrome (IMS) in infants and young children.MethodsA total of 120 infants and young children with IMS admitted during January 2014 and May 2016 were recruited in this study. In the 1st, 2nd, 3rdand 4thweeks after admission, EBV- immunoglobulin M (IgM) levels were detected using enzyme linked immunosorbent assay; EBV-DNA values was detected using fluorescent quantitation; combined detection of EBV-IgM and EBV-DNA were also performed. Positive rates of 3 methods were compared.ResultsPositive rates in the 1st, 2nd, 3rdand 4thweeks after admission by EBV-IgM and combined detections were significantly higher than those of EBV-DNA, and the positive rates of combined detection in the 1stand 2ndweeks after admission were significantly higher than those of EBV-IgM detection (P<0.05 orP<0.01). There were no statistically significant differences in the 3rdand 4thweeks after admission between combined detection and EBV-IgM detection (P>0.05).ConclusionEBV-IgM detection is more sensitive for early diagnosis of infants and young children with IMS, and early combined detection of EBV-IgM and EBV-DNA can further increase diagnostic rate.

Infectious mononucleosis; Epstein-Barr virus antibodies; Epstein-Barr virus DNA

陜西省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014JM4177)

725000 陜西 安康，安康市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科

R512.7

A

1002-3429(2017)10-0088-03

10.3969/j.issn.1002-3429.2017.10.029

2017-03-10 修回時(shí)間：2017-05-24)