細(xì)菌內(nèi)毒素定量檢測(cè)在炎性疾病中的診斷意義

●楊小燕 吳天恩

細(xì)菌內(nèi)毒素定量檢測(cè)在炎性疾病中的診斷意義

●楊小燕 吳天恩

目的：探討細(xì)菌內(nèi)毒素定量檢測(cè)在炎性疾病中的診斷意義。方法 采用動(dòng)態(tài)濁度法。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組細(xì)菌內(nèi)毒素定量較對(duì)照組及CRP組和WBC組顯著增高（P＞0.01），其次CRP組較對(duì)照組及WBC組增高（P＞0.05），最后WBC組較對(duì)照組輕微增高（P＞0.05）。結(jié)論：細(xì)菌內(nèi)毒素水平檢測(cè)是診斷和監(jiān)測(cè)細(xì)菌性疾病感染的一個(gè)重要參數(shù)，通過內(nèi)毒素水平的定量快速檢測(cè)可以鑒別診斷細(xì)菌性和非細(xì)菌性感染性和炎癥，且細(xì)菌內(nèi)毒素定量檢測(cè)在監(jiān)控嚴(yán)重感染時(shí)是比CRP、白細(xì)胞計(jì)數(shù)更好的工具。

細(xì)菌內(nèi)毒素；定量；炎性；診斷

細(xì)菌內(nèi)毒素為革蘭氏陰性菌及某些陰性菌樣微生物，如立克次體、螺旋體，衣原體細(xì)胞壁外膜中的一種脂多糖成分，它往往在細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)釋放或細(xì)菌死亡時(shí)裂解出來。體液內(nèi)毒素水平是嚴(yán)重細(xì)菌性炎癥（尤其是革蘭氏陰性菌）的一個(gè)重要的特異性脂，而且也是膿毒癥和炎癥活動(dòng)有關(guān)的多臟器衰竭的可靠指標(biāo)。內(nèi)毒素水平不僅是用于鑒別診斷的急性指標(biāo)，而且是監(jiān)控炎癥活動(dòng)的參數(shù)，內(nèi)毒素水平的檢測(cè)應(yīng)是一系列的病理.生理反應(yīng).嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC）及多器官功能衰竭直至休克、死亡。重癥患者常常合并感染，嚴(yán)重者發(fā)展成為嚴(yán)重感染或感染性休克，其中革蘭陰性菌感染為主要來源[1]。現(xiàn)將我院自開展細(xì)菌內(nèi)毒素定量檢測(cè)項(xiàng)目以來的情況報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 病例選擇

（1）實(shí)驗(yàn)組：共檢測(cè)病例2060例，全部系我院2012年1月-2014年6月脊柱外科和關(guān)節(jié)外科住院病例，年齡6-80歲，平均43歲。用無熱原肝素鈉抗凝真空采血管采集靜脈血2ml以上，進(jìn)行3000rpm離心1分鐘，分離得到富含血小板的血漿。

（2）對(duì)照組：選60例健康體檢者作為正常對(duì)照組，年齡20-40歲，平均年齡30歲。

1.2 儀器與試劑

（1）儀器美國(guó)INC EL808全自動(dòng)酶標(biāo)儀，美國(guó)貝克曼immage800全自動(dòng)特定蛋白分析儀，日本希森美康XT1800全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀。

（2）試劑細(xì)菌內(nèi)毒素定量檢測(cè)使用廈門市鱟試劑實(shí)驗(yàn)廠有限公司提供的專用配套試劑。血清CRP測(cè)定使用儀器配套試劑盒。WBC計(jì)數(shù)使用儀器配套試劑包。

1.3 檢測(cè)方法

（1）細(xì)菌內(nèi)毒素定量檢測(cè)取0.1ml血漿樣本，加入到一支樣本處理液中，混勻后70℃保溫10分鐘，取出后立即放入冰水中冷卻3分鐘。取所得溶液0.2ml加入一支鱟試劑中，溶解鱟試劑后迅速移取0.1ml至反應(yīng)容器中。將反應(yīng)容器放置于檢測(cè)儀器中檢測(cè)，反應(yīng)結(jié)束后自動(dòng)計(jì)算出樣本內(nèi)毒素含量。

（2）血清CRP測(cè)定免疫比濁法。按試劑盒說明書使用。

（3）WBC計(jì)數(shù)全自動(dòng)血細(xì)胞XT1800計(jì)數(shù)儀，使用儀器配套試劑包。

1.4 數(shù)據(jù)處理實(shí)驗(yàn)組與其他組進(jìn)行兩兩比較

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組細(xì)菌內(nèi)毒素定量檢測(cè)、血清CRP測(cè)定、WBC計(jì)數(shù)結(jié)果見表1。

分組 例數(shù) 內(nèi)毒素（EU/ml） CRP(mg/L) WBC(x109/L)實(shí)驗(yàn)組 2060 57.16±3.01 26.12±2.36 15.21±1.92對(duì)照組 60 0.05±0.02 0.40±0.11 5.0±1.02 P 值 ＞ 0.01 ＞ 0.05 ＞ 0.05

由表1可見，實(shí)驗(yàn)組細(xì)菌內(nèi)毒素定量較對(duì)照組及CRP組和WBC組顯著增高（P＞0.01），其次CRP組較對(duì)照組及WBC組增高（P＞0.05），最后WBC組較對(duì)照組輕微增高（P＞0.05）。

3 討論

微量的細(xì)菌內(nèi)毒素進(jìn)入機(jī)體后即可引起機(jī)體內(nèi)發(fā)熱血管擴(kuò)張.血管通透性增加.中性粒細(xì)胞增多，補(bǔ)體激活，機(jī)體血壓下降等一系列病理，生理反應(yīng).嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC）及多器官功能衰竭直至休克、死亡。細(xì)菌內(nèi)毒素作為革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁最外層的脂多糖(LPS),當(dāng)嚴(yán)重時(shí)細(xì)菌感染以及膿毒血癥和多臟器功能衰竭時(shí)它在血漿中的濃度升多。而自身免疫過敏和病毒感染時(shí)內(nèi)毒素水平不會(huì)升多，但局部有限的細(xì)菌感染，輕微的感染不會(huì)導(dǎo)致其升多。內(nèi)毒素水平的升多一般出現(xiàn)在嚴(yán)重休克，重量性炎癥反應(yīng)綜合征（SIRS）和為多臟器功能紊亂綜合征（MODS），無菌性感染患者中水平通常低于那些有細(xì)菌性病灶的患者，而從腸道釋放的因子或細(xì)菌可能引起誘導(dǎo)。內(nèi)毒素血癥多隨病情惡化而加重，隨病情緩解而減輕，可以作為一個(gè)衡量病情和判斷預(yù)后的一個(gè)參考指標(biāo)，內(nèi)毒素的定量檢測(cè)，使得內(nèi)毒素成為指導(dǎo)臨床治療，判斷療效和篩選恰當(dāng)藥物的非常實(shí)用指標(biāo)。內(nèi)毒素檢測(cè)對(duì)于重癥患者來說，不僅可以用于鑒別患者是否為細(xì)菌感染，協(xié)助抗生素的選擇．還與感染的嚴(yán)重程度存在相關(guān)性，有助于評(píng)估患者預(yù)后，具有一定臨床價(jià)值[2]。

通過本實(shí)驗(yàn)可見，實(shí)驗(yàn)組細(xì)菌內(nèi)毒素定量較對(duì)照組及CRP組和WBC組顯著增高（P＞0.01），其次CRP組較對(duì)照組及WBC組增高（P＞0.05），最后WBC組較對(duì)照組輕微增高（P＞0.05）。因此，細(xì)菌內(nèi)毒素水平檢測(cè)是診斷和監(jiān)測(cè)細(xì)菌性疾病感染的一個(gè)重要參數(shù)，通過內(nèi)毒素水平的定量快速檢測(cè)可以鑒別診斷細(xì)菌性和非細(xì)菌性感染性和炎癥，且細(xì)菌內(nèi)毒素定量檢測(cè)在監(jiān)控嚴(yán)重感染時(shí)是比CRP、白細(xì)胞計(jì)數(shù)更好的工具。

（作者單位：江西省贛州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科）

[1] Alberda c， GramLich L， Meddings J， et a1． Effects of probiotic therapy in critically ill patients： a randomized，doubleblind，placebo-controlled trial[J]．Am J clin Nutr，2007，85(3)：816-823．

[2]陳德珠,盧劍海，左六二，等.血漿內(nèi)毒素檢測(cè)在重癥患者感染診療中的臨床意義[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2013,29（15）：2531-2532.

楊小燕（1975～），女，本科，副主任技師，研究方向?yàn)榕R床生化檢驗(yàn)研究。