組織微陣列技術(shù)研究腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因在鼻咽癌中的臨床意義

河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院（471003）劉勤

1 研究資料與方法

1.1 研究資料 選取2015年12月～2016年12月我院收治的156例患者作為此次研究對象，其中鼻咽癌、癌旁鼻咽上皮及鼻炎慢性炎性黏膜上皮分別為74例、40例及42例。

1.2 方法 組織微陣列切片在經(jīng)過脫蠟、水化后，放置在過氧化氫中30分鐘，過氧化氫的濃度在3%左右，主要是為了阻斷內(nèi)源性過氧化物酶。把組織微陣列切片放在檸檬酸鹽緩沖劑中，為0.1mol/L，對微波抗原進行修復(fù)，修復(fù)的時間為20分鐘，使用胰蛋白酶對酶消化抗原進行修復(fù)，胰蛋白酶的濃度在0.1%左右，在37℃中消化25分鐘，正常山羊或兔血清應(yīng)在室溫進行封閉，封閉的時間為半個小時。然后使用AEC染色，利用顯微鏡對染色的強度進行控制，使用蘇木精進行復(fù)染，再取水性封片劑和相應(yīng)規(guī)格蓋玻片進行封片，根據(jù)各抗體的陽性對照片作為陽性對照的依據(jù)，根據(jù)PBS作為一抗陰性對照依據(jù)。

1.3 觀察指標(biāo) 根據(jù)蛋白質(zhì)表達評分[1]對陽性強度和陽性細胞數(shù)進行綜合的評分。陽性染色強度：0分：細胞沒有染色；1分：細胞呈淺紅色，弱陽性；2分：細胞呈紅色，沒有背景染色，或細胞呈深紅色，有淺紅色背景，為中等陽性；3分：細胞呈深紅色，沒有背景著色，為強陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué) 以結(jié)果P＜0.05作為有顯著性差異標(biāo)準(zhǔn)，X2檢驗計數(shù)資料，采用SPSS19.0軟件對上述數(shù)據(jù)進行處理。

2 結(jié)果

模型基質(zhì)金屬蛋白酶-1和模型細胞骨架連結(jié)蛋白埃滋蛋白在鼻咽癌組織中的陽性表達明顯高于鼻咽炎性上皮；鼻咽癌組織中轉(zhuǎn)移抑制因子和金屬蛋白酶組織抑制因子-2蛋白的陽性表達明顯低于其在癌旁鼻炎上皮組織和鼻咽炎性黏膜上皮中的表達，數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。癌旁鼻炎上皮及慢性炎性鼻炎上皮組織中模型基質(zhì)金屬蛋白酶-1和模型細胞骨架連結(jié)蛋白埃滋蛋白的陽性表達相比；模型基質(zhì)金屬蛋白酶-2和細胞粘附因子蛋白在鼻咽癌、癌旁鼻炎上皮和慢性炎性鼻炎上皮組織中的表達比較，數(shù)據(jù)差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。詳見附表。

附表 轉(zhuǎn)移相關(guān)基因在鼻咽癌組織微陣列中的蛋白質(zhì)表達[n(%)]

3 討論

此次研究根據(jù)已經(jīng)制作的鼻咽癌組織微陣列，免疫組化法對模型基質(zhì)金屬蛋白酶-1、模型基質(zhì)金屬蛋白酶-2、模型細胞骨架連結(jié)蛋白埃滋蛋白、轉(zhuǎn)移抑制基因、細胞粘附因子及金屬蛋白酶組織抑制因子-2在鼻咽癌組織微陣列中的蛋白表達進行檢測，經(jīng)過檢測后發(fā)現(xiàn)，模型基質(zhì)金屬蛋白酶-1及模型基質(zhì)金屬蛋白酶-2及模型細胞骨架連結(jié)蛋白埃滋蛋白表達與鼻咽癌臨床進展和鼻咽癌發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈現(xiàn)出正相關(guān)，說明模型基質(zhì)金屬蛋白酶-1及模型基質(zhì)金屬蛋白酶-2及模型細胞骨架連結(jié)蛋白埃滋蛋白在鼻咽癌侵襲及轉(zhuǎn)移的過程中起到了重要的作用，模型基質(zhì)金屬蛋白酶-1和轉(zhuǎn)移抑制因子可以作為鼻咽癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測指標(biāo)。總而言之，多個腫瘤轉(zhuǎn)移基因的蛋白質(zhì)表達在鼻咽癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和進展的過程中起到了重要的作用，模型基質(zhì)金屬蛋白酶-1可以作為臨床預(yù)測鼻咽癌淋巴轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志。