耐甲氧西林表皮葡萄球菌感染情況調(diào)查及藥敏分析研究

吳婷婷 孔曉明

·藥物研究·

耐甲氧西林表皮葡萄球菌感染情況調(diào)查及藥敏分析研究

吳婷婷 孔曉明

目的探討耐甲氧西林表皮葡萄球菌的感染情況及其耐藥性。方法收集收集2013年7月至2016年4月住院患者的各類送檢標本中分離鑒定的表皮葡萄球菌158株，由有經(jīng)驗的檢驗員采用BIOFOSUN微生物鑒定藥敏分析系統(tǒng)對菌株進行鑒定，采用MIC法作抗生素敏感性試驗，分析不同科室、不同年齡、不同標本及不同性別中MRSE菌株的分布情況；對院外與院內(nèi)MRSE的臨床特征進行分析；對MRSE在12種抗生素的藥敏結(jié)果進行分析。結(jié)果在表皮葡萄球菌感染的病例中耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)占79.1%，且男性耐甲氧西林表皮葡萄球菌的檢出率高于女性，>60歲的MRSE檢出率高于30～60歲和<30歲的檢出率，院內(nèi)感染者檢出率高于院外感染者，重癥監(jiān)護室MRSE的檢出率為高于其他科室，來源于膿性分泌物標本的MRSE檢出率高于血液標本和其他標本，差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.000)。院內(nèi)MRSE感染的患者中存在原發(fā)疾病的比例較院外感染的多，檢出細菌前2周內(nèi)服用兩種以上抗生素的患者所占比例較院外感染的多，差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；MRSE對青霉素、氨芐西林、苯唑西林、頭孢唑啉、紅霉素及克林霉素的耐藥性極強，均超過90.0%，而對環(huán)丙沙星、慶大霉素、四環(huán)素、利福平、甲氧芐啶/磺胺甲噁唑(SMZ)的耐藥性較強，而對萬古霉素敏感。結(jié)論耐甲氧西林表皮葡萄球菌在臨床上感染情況嚴重，且普遍存在對普通抗生素的耐藥性。

耐甲氧西林表皮葡萄球菌；院內(nèi)感染；耐藥性

表皮葡萄球菌是一群凝固酶陰性的葡萄球菌，在自然界中分布廣泛，絕大多數(shù)不致病，僅少數(shù)可引起人和動物的化膿性感染[1]。寄生于人體皮膚、陰道等部位的表皮葡萄球菌可以引起癤、癰、尿路感染、敗血癥及傷口感染等[2]。且近年來由于對抗菌藥物的大量使用，以及不斷增加的抗菌藥物種類和廣譜抗菌藥物的廣泛使用，使得表皮葡萄球菌的耐藥性在逐年增加[3]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，表皮葡萄球菌對青霉素類的耐藥性超過80.0%，其對很多抗生素耐藥的原因主要與它產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶有關(guān)，耐藥機制是mecA基因編碼低親和力的青霉素結(jié)合蛋白2a所致[1，4]。當前國內(nèi)對耐甲氧西林表皮葡萄球菌感染率以及耐藥性的研究報道較少，而對該方面的研究又顯得較為重要[5]。因此本研究收集2013年7月至2016年4月在我院住院患者的各類送檢標本(剔除同一患者同一部位的重復標本)中分離鑒定的表皮葡萄球菌158株，對其耐藥性和藥敏情況進行分析，得出結(jié)論，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2013年7月至2016年4月來我院就診的門診和住院患者標本分離的表皮葡萄球菌158株，其中20株血標本，42株尿標本，13株前列腺液標本，53株膿拭子分離標本，7株腦脊液標本，6株精液標本，17株痰標本，排除同一病例的重復株。

1.2 方法 所有患者的血液、尿液、痰液、膿液、腦脊液、前列腺液等標本的分離與鑒定均由本院微生物實驗室有經(jīng)驗的技術(shù)人員用BIOFOSUN微生物鑒定藥敏分析系統(tǒng)進行鑒定，BIOFOSUN微生物鑒定藥敏分析系統(tǒng)由中國的復星醫(yī)藥公司生產(chǎn)制造。采用MIC法進行測定，如果苯唑西林抑菌濃度≥0.5時即為耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)。

1.3 藥敏實驗 采用稀釋法(即MIC法)作抗生素敏感性試驗，該法由美國國家臨床和實驗室標準委員會(National Committee for Clinical Laboratory,NCCLS)推薦。使用NCCLS推薦的方法制備濃度為0.5麥氏單位的菌懸液，按照相應(yīng)的葡萄球菌藥敏板操作規(guī)程將菌懸液逐步加入板條，在35℃條件下培養(yǎng)24 h后上機讀板，共有氨芐西林、紅霉素、克林霉素、萬古霉素、頭孢唑林、甲氧芐啶/磺胺甲噁唑(SMZ)、環(huán)丙沙星、慶大霉素、四環(huán)素、青霉素、利福平、苯唑西林12種抗生素。其中葡萄球菌藥敏板為上海星佰生物技術(shù)有限公司提供，另外本研究采用苯唑西林代替甲氧西林，用金黃色葡萄球菌ATCC25923作為質(zhì)控菌株。

1.4 觀察指標 (1)分析不同科室、不同年齡、不同標本及不同性別中MRSE菌株的分布情況；(2)對院外與院內(nèi)MRSE的臨床特征進行分析；(3)對MRSE在12種抗生素的藥敏結(jié)果進行分析。

2 結(jié)果

2.1 不同科室、不同年齡、不同標本及不同性別中MRSE菌株的分布情況 本次調(diào)查共收集從我院住院患者的各類送檢標本中分離鑒定的表皮葡萄球菌158株，其中耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)的標本125例，占79.1%。其中125例MRSE的標本中男性72例，女性53例，男性耐甲氧西林表皮葡萄球菌的檢出率(85.9%)高于女性(72.6%)；≥60歲的MRSE檢出率94.6%，30-60歲的MRSE檢出率64.1%，<30歲的MRSE檢出率46.2%；院內(nèi)感染者檢出率(85.0%)高于院外感染者(71.1%)；重癥監(jiān)護室MRSE的檢出率為76.2%為最高，其次是普外科(67.5%)，新生兒科為50.0%。其他科室為39.1%；來源于膿性分泌物的標本的MRSE檢出率90.0%，其次為血液標本(78.9%)，其他標本MRSE發(fā)生率最低，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表1。

2.2 院外與院內(nèi)MRSE的臨床特征分析 院內(nèi)感染患者中>60歲者占比、死亡率、年齡≤1歲者占比、長期使用免疫抑制劑者占比及發(fā)病前有侵襲性操作者占比與院外感染間差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；院內(nèi)MRSE感染的患者中存在原發(fā)疾病的比例較院外感染多，檢出細菌前2周內(nèi)服用兩種以上抗生素的患者所占比例較院外感染多(P<0.05)。見表2。

表1 不同標本MRSE檢出率比較

注：其他標本包括痰標本、前列腺液標本、腦脊液標本和精液標本

表2 院外與院內(nèi)MRSE的特征分析 例(%)

注：*表示采用Fisher確切概率法計算得到的P值

2.3 MRSE對12種抗生素的藥敏結(jié)果分析 MRSE對12種抗生素的藥敏結(jié)果的分析發(fā)現(xiàn)，MRSE對青霉素、氨芐西林、苯唑西林、頭孢唑啉、紅霉素及克林霉素的耐藥性極強，均超過90.0%，而對環(huán)丙沙星、慶大霉素、四環(huán)素、利福平、甲氧芐啶/磺胺甲噁唑(SMZ)的耐藥性較強，而對萬古霉素敏感。見表3。

3 討論

表皮葡萄球菌是一種重要的機會性致病菌,也是引起院內(nèi)感染的主要致病菌之一[5]。而隨著半合成青霉素甲氧西林和苯唑西林應(yīng)用于臨床，MRSE便出現(xiàn)了，且當前MRSE感染及耐藥性已經(jīng)成為一個不容忽視的問題[6]。另外據(jù)相關(guān)研究報道，美國約80.0%醫(yī)院感染分離的表皮葡萄球菌對甲氧西林耐藥[7]。雖然臨床指南規(guī)定，在使用抗生素之前要做病原學及藥敏試驗，不得濫用抗菌藥物,但由于我國對抗生素的監(jiān)管機制不夠完善，使其合理利用受到很大制約，甚至由于濫用抗生素而產(chǎn)生了超級菌[8]。本耐藥菌的出現(xiàn)與機體的免疫狀態(tài)、長期聯(lián)合使用抗生素、長期使用免疫抑制劑、住院時間過長以及侵襲性操作等有關(guān)。

表3 MRSE對12種抗生素的藥敏結(jié)果分析

本研究發(fā)現(xiàn)，在調(diào)查的158株表皮葡萄球菌中耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)占79.1%。說明當前表皮葡萄球菌的耐藥現(xiàn)象較為嚴重，這較黃鍵云等[9]報道的MRSE89.4%的檢出率低。較魏凌秀等[10]報道的MRSE的檢出率66.7%要高。造成MRSE的地區(qū)分離率不同的原因可能與不同地區(qū)臨床醫(yī)生用藥習慣之間的差異有關(guān)。男性發(fā)生MRSE的情況較女性多。年齡分布中以≥60歲的老年人為該菌感染的高危人群，主要可能是這些人群的自身免疫力較低，容易受到外源性致病菌的感染等有關(guān)。MRSE的標本主要分布在重癥監(jiān)護室、普外科和新生兒科，這與表皮葡萄球菌通常的寄生部位、機體的免疫狀況等有關(guān)，重癥監(jiān)護室的患者病情重，營養(yǎng)狀況差，抗菌能力也很差，容易合并機會性感染[11]。MRSE的標本來源于膿性分泌物的數(shù)最多，其次為血液標本。之后本研究又發(fā)現(xiàn)院內(nèi)MRSE感染的患者中存在原發(fā)疾病的比例較院外感染的多；院內(nèi)感染患者檢出MRSE細菌前2周內(nèi)服用兩種以上抗生素的患者所占比例較院外感染的多，差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；說明影響MRSE發(fā)生的主要危險因素是對患者免疫狀態(tài)造成嚴重影響的基礎(chǔ)性疾病，以及長期聯(lián)合使用抗生素。MRSE對12種抗生素的耐藥性差異較大，對青霉素、氨芐西林、苯唑西林、頭孢唑啉、紅霉素及克林霉素的耐藥性極強，均超過90.0%，而對環(huán)丙沙星、慶大霉素、四環(huán)素、利福平、甲氧芐啶/磺胺甲噁唑(SMZ)的耐藥性較強，而對萬古霉素敏感。這與朱德妹[12]等的研究結(jié)果接近。MRSE耐藥的機制可能是由于細菌的細胞中青霉素結(jié)合蛋白發(fā)生突變，從而產(chǎn)生新的青霉素結(jié)合蛋白位點，導致其與β-內(nèi)酰胺類抗生素的親和力降低而產(chǎn)生耐藥。

綜上所述，耐甲氧西林表皮葡萄球菌在臨床上感染情況嚴重，且普遍存在對普通抗生素的耐藥性。

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10.3969/j.issn.1002-7386.2017.20.037

R 378.11

A

1002-7386(2017)20-3168-03

2017-04-05)

項目來源：溧陽市重點研發(fā)計劃(社會發(fā)展)項目(編號：LC2015010)

213300 江蘇省溧陽市人民醫(yī)院檢驗科