福建泉州石香薷萃取物的GC-MS分析

楊曉燁 李贊錦 張鴻燕 賴晨楠 茍文韜 洪鈴冰 葉明星 郭琳娟 張偉云，*

1.廈門醫學院藥學系/廈門市中藥生物工程重點實驗室，福建 廈門 361023；2.福建醫科大學藥學院，福建 福州 350122

石香薷(MoslachinensisMaxim.)系唇形科 (Labiatae)薺寧屬一年生草本植物，別名青香薷、土香薷、野香薷、還魂草、七星劍等[1]。石香薷作為我國特有中藥材，性味溫辛，歸肺、胃經，常用于治療中暑發熱、感冒惡寒、頭痛無汗、腹痛吐瀉等癥[2]。現代研究[3]表明，石香薷中含有揮發油類、黃酮苷類及酚酸類等多種化學成分，揮發油是石香薷發揮藥理活性的主要成分，具有抗菌抑菌[4]、抗氧化[5]、抗流感病毒[6]等生理活性。

我國石香薷資源分布廣泛，主產于廣西、廣東、湖南、湖北、浙江、江西、四川、福建等地，具有廣闊的應用前景[7]。研究[8]表明，產地是影響石香薷藥材質量的重要因素之一，可能與其土壤、氣候有關。目前有較多針對湖南、江西及浙江等產地的石香薷化學成分的研究報道，對福建泉州產石香薷的研究報道較少。本研究通過超臨界流體萃取法對福建泉州產石香薷中揮發油等化學成分進行了提取，運用薄層色譜法和氣質聯用儀對其化學成分進行分析，分析比對不同產地石香薷成分及其含量之間存在的差異，以期為研究石香薷相關藥效物質基礎提供文獻參考，也為今后石香薷的開發研究利用打下基礎。

1 材料與儀器

1.1 藥品與試劑 石香薷產于福建泉州，經廈門大學藥學院陳全成副教授鑒定為石香薷MolsachinensisMaxim.的干燥地上部分。2，4-二硝基苯肼、1%香草醛-濃硫酸試劑、0.05%溴酚藍試劑，均為分析級，購自海晟泰化工(廈門)有限公司；甲醇為色譜級，購自上海安譜實驗科技股份有限公司。

1.2 儀器 QEY-300 g高速粉碎機，浙江屹立工貿有限公司生產；六號(100目)標準藥篩，浙江省紹興上虞華豐五金儀器有限公司生產；JCS-W5003電子天平，哈爾濱眾匯衡器有限公司生產；硅膠薄層板，海晟泰化工(廈門)有限公司生產；氣質聯用儀，型號：7890B/7000，美國安捷倫科技有限公司生產；超臨界流體萃取儀，型號：*LC-2000，日本分光株式會社生產。

2 方法與結果

2.1 方法

2.1.1 福建泉州石香薷SFE提取 參照參考文獻中的方法[9-11]，將福建泉州產石香薷粉碎，過六號標準藥篩，稱取10.00 g石香薷用于超臨界流體萃取，萃取溫度45 ℃，壓力20 MPa，CO2流量3 mL/min，90 min后得到石香薷萃取物。吸取少量黃褐色的萃取物置于未使用且干凈的EP管中，加入適量色譜甲醇溶解，經0.45 μm微孔濾膜過濾，作為石香薷萃取物GC-MS分析用樣品。

2.1.2 TLC薄層檢測條件 取福建泉州石香薷萃取物適量，分別點樣于硅膠G-CMC-Na薄層板的三處，分別用2，4-二硝基苯肼，1%香草醛-濃硫酸試劑和0.05%溴酚藍試劑進行顯色，然后分別觀察顏色變化。

2.1.3 GC-MS條件 參照參考文獻中的方法[10，12-15]，氣相色譜的色譜柱為HP-5MS 5%苯基甲基硅氧烷毛細管柱(30 m×250 μm×0.25 μm)，設置初始柱溫為50 ℃，保持5 min，程序升溫5 ℃/min，260 ℃保持5 min。柱子參數：柱內流量為1 mL/min，氦氣作為載氣，進樣量為1 μL，流速1 mL/min，無分流進樣，溶劑延遲5 min。質譜條件：選用電子轟擊離子源，電子轟擊能量70 eV，離子源溫度230 ℃，四極桿溫度150 ℃，質量掃描范圍為40～550 m/z。

2.2 結果

2.2.1 SFE提取的石香薷萃取物狀態及提取率 SFE提取所得萃取物呈黃褐色，液體呈濃稠狀，提取率為2.85%。

2.2.2 TLC顯色結果 如圖1所示，石香薷SFE萃取物分別在薄層板點樣三處，經0.05%溴酚藍試劑顯色，呈現黃色斑點，提示可能含有中含有酸性化合物；經2，4-二硝基苯肼試劑顯色，呈現黃色斑點，提示可能含有醛或酮類化合物；經1%香草醛-濃硫酸試劑顯色，呈現紫色斑點，提示可能含有油脂類化合物。

圖1 超臨界流體萃取法提取福建泉州-產石香薷的TLC顯色圖

2.2.3 超臨界萃取及其GC-MS成分 在上述實驗條件的操作分析中，采用超臨界流體萃取法得到萃取物并進行GC-MS分析，得到福建泉州產石香薷的GC-MS總離子流圖。譜圖如圖2所示。

圖2 超臨界流體萃取法提取福建泉州產石香薷的GC-MS總離子流圖

使用Agilent Mass Hunter Qualitative Analysis B.06.00(AgtQual)分析軟件分析福建泉州產石香薷萃取物的總離子流圖(TIC)，通過NIST MS譜庫進行檢索比對，共發現有198個色譜峰，初步確定了112個化合物。具體見表1。

表1 SFE提取所得福建泉州產石香薷化學成分表

表1(續)

表1(續)

表1(續)

分析結果表明，福建泉州產石香薷所得化合物以烯烴、醇、酚、有機酸、酯類化合物為主，使用AgtQual軟件通過峰面積歸一法測定萃取物中化合物相對含量，總峰面積為140558316.30，所得鑒定峰峰面積合計為133901135.89，所得鑒定峰峰面積占總峰面積的95.26%，其中6個化合物占比>1%，從高到低依次為百里香酚(66.23%)；乙酸瑞香[草]酯(5.68%)；α-石竹烯(3.77%)；葉綠醇(3.57%)；反式角鯊烯(2.31%)；順-8，11，14-二十碳三烯酸(1.30%)。

3 結果與討論

經過與文獻[16]對比分析，湖南邵東產石香薷采用SFE得到萃取物，萃取條件為萃取壓力為20 MPa，萃取溫度為45℃，與本實驗的萃取條件相同，因此比較兩產地超臨界萃取物的化學成分差異，其所得萃取物的化學成分含量由高到低依次是百里香酚、香薷酮和鄰異丙基甲苯。兩種產地的石香薷萃取物中含量最高的化學成分均為百里香酚。兩種產地的石香薷所得化合物有部分相同，僅有6種化合物為共有成分，具體為百里香酚、萜品烯、β-石竹烯、α-石竹烯、鄰異丙基甲苯和松油烯。現代相關研究[17]表明，百里香酚是石香薷的主要活性成分之一，又稱麝香草酚，對常見食源性真菌、金黃色葡萄球菌、黃曲霉孢子等均有抑制作用，而上述兩個產地石香薷萃取物中主要活性成分含量的不同，可能對其藥理活性產生影響，可能是由采摘時間、儲存時間不同所致，尚且需要對應實驗驗證和深入研究。

本實驗通過超臨界流體萃取法萃取福建泉州產石香薷中揮發油等多種化學成分并進行了GC-MS成分分析，豐富了其化學成分研究，為今后的石香薷藥用資源的開發利用提供一定的理論依據。