反相高效液相色譜法測定注射用頭孢美唑鈉的含量

王雷

摘 要：本文采用高校液相測定了注射用頭孢美唑鈉中頭孢美唑鈉的含量，固定相為：奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm），乙腈-甲醇-四氫呋喃-磷酸二氫銨水溶液-10%四丁基氫氧化銨（20∶255∶25∶700∶12.8）為流動相，檢測波長為272nm，流速1.0mL·min-1，柱溫：30℃。本文對注射用頭孢美唑鈉中的頭孢美唑鈉進行含量測定的試驗方法，結果表明該法不受其它成分的干擾，分離度好，精密度、重現性佳，可用于注射用頭孢美唑鈉中頭孢美唑鈉的含量測定。

關鍵詞：注射用頭孢美唑鈉；反相高效液相色譜法；含量

注射用頭孢美唑鈉，適應癥為本品適用于治療由對頭孢美唑鈉敏感的金黃色葡萄球菌、變形桿菌、摩氏摩根菌、大腸桿菌、肺炎桿菌、普羅維登斯菌屬、擬桿菌屬所引起的呼吸系統感染、膽道感染、腹膜炎、尿路感染、婦產科、口腔外科等感染[1-2]。反相高效液相色譜是由非極性固定相和極性流動相所組成的液相色譜體系，它正好與由極性固定相和弱極性流動相所組成的液相色譜體系（正相色譜）相反。RP-HPLC是當今液相色譜的最主要的分離模式，幾乎可用于所有能溶于極性或弱極性溶劑中的有機物的分離。本文采用高校液相測定了注射用頭孢美唑鈉中頭孢美唑鈉的含量。

1 儀器與試藥

屹譜儀器U-1810準雙光束紫外可見分光光度計（屹譜儀器制造（上海）有限公司）；Aurora-F1實驗室自動洗瓶機（杭州喜瓶者生物技術有限公司）；1810-B石英自動雙重蒸餾水器（上?？德穬x器設備有限公司）；LC-5520高效液相色譜儀（北京東西分析儀器有限公司）；FR224CN奧豪斯電子天平（上海書培實驗設備有限公司）；HYYTH-10小型實驗室污水處理設備（濰坊浩宇環保有限公司）；HH-601超級恒溫水?。ńK金壇市億通電子有限公司）；SCQ-7201E雙頻加熱型超聲波清洗機（上海聲彥超聲波儀器有限公司）；UV2800雙光束紫外可見分光光度計（四川匯巨儀器設備有限公司）。頭孢美唑鈉對照品由中國藥品生物制品檢定所提供。

2 含量測定

2.1 色譜條件：依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[3-5]。色譜柱為奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）；乙腈-甲醇-四氫呋喃-磷酸二氫銨水溶液-10%四丁基氫氧化銨（20∶255∶25∶700∶12.8）為流動相；檢測波長為272nm。理論板數按頭孢美唑鈉峰計算應不得低于2000。

2.2 供試品溶液的制備

取注射用頭孢美唑鈉，精密稱定，置10毫升容量瓶內中，加入適量流動相超聲溶解，在用流動相定容，搖勻，取續濾液，即得。

2.3 對照品溶液的制備

精密稱取頭孢美唑鈉對照品適量，用流動相溶解并稀釋成每1ml中含10μg的溶液，作為對照溶液。

2.4 陰性溶液的制備

取頭孢美唑鈉合成過程中原輔料，按照供試品溶液的制備方法制成陰性液，依上述方法測定，結果在頭孢美唑鈉出峰處陰性液無色譜峰，結果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5 準曲線的制備

精密稱取頭孢美唑鈉對照品100.0mg，置25ml容量瓶中，加入水溶液使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取0.2、0.4、0.6、1.2、1.6、2.0mL，置于10mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標，對照品進樣量（X）為橫坐標，繪制標準曲線。結果表明，頭孢美唑鈉在80～800μg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。

2.6 精密度試驗

精密吸取頭孢美唑鈉對照品溶液20μL重復進樣6次，測定峰面積積分值，對照品峰面積積分值的RSD為0.72%。結果表明，本實驗精密度良好。

2.7 重現性試驗

分別稱取同批注射用頭孢美唑鈉樣品6份，測定含量，并計算樣品的RSD值，結果RSD為0.78%，結果表明此方法的重現性良好。

2.8 穩定性試驗

依照2.3項下供試品制備方法制備供試品溶液，分別在0，2，4小時精密吸取供試品溶液注入液相色譜儀，進樣測定，供試品頭孢美唑鈉峰面積積分值的RSD為0.78%。結果表明頭孢美唑鈉至少在4小時內穩定。

2.9 準確度試驗

取對照品適量，精密稱取已知含量的樣品9份，置量瓶中，分別精密加入頭孢美唑鈉對照品，按項下方法制備成100%、120%、140%。取模擬樣品照“含量測定”項下方法試驗，計算回收率為99.3%，RSD為0.55%。

2.10 樣品含量測定

分別精密吸取對照品溶液10μl，20μl，供試品溶液20μl，注人液相色譜儀，測定，用外標兩點法計算，即得，結果三批樣品的含量分別為為標示量的99.1%、99.1%、100.9%。

3 討論

分別考察含1%醋酸0.025mol.L-1醋酸銨溶液-乙腈（75∶25），甲醇-水（35：65），乙腈-甲醇-四氫呋喃-磷酸二氫銨水溶液-10%四丁基氫氧化銨（20∶255∶25∶700∶12.8），乙腈-甲醇-四氫呋喃-磷酸二氫銨水溶液-10%四丁基氫氧化銨（20∶200∶125∶600∶12.8），乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氫鉀緩沖液（含三乙胺0.5%，磷酸調pH至3.0）（40：60），乙腈-0.08%磷酸溶液（20：80），0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液-乙腈-冰醋酸（70：30：1），水-乙腈-三乙胺（80∶20：0.01）不同比例的流動相，結果以乙腈-甲醇-四氫呋喃-磷酸二氫銨水溶液-10%四丁基氫氧化銨（20∶255∶25∶700∶12.8）為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用乙腈-甲醇-四氫呋喃-磷酸二氫銨水溶液-10%四丁基氫氧化銨（20∶255∶25∶700∶12.8）為流動相。此方法簡便、準確、重現性好，可用于注射用頭孢美唑鈉中頭孢美唑鈉的含量測定。注射用頭孢美唑鈉中頭孢美唑鈉的含量為標示量的105%-95%。

參考文獻

[1]彭鳳英，卓超，黃文祥，李崇智.頭孢美唑鈉治療呼吸系統急性細菌性感染療效觀察[J].重慶醫科大學學報，2007（02）.

[2]彭鳳英，卓超，黃文祥，李崇智，江南，吳佳玉，熊瑛，王宋平，王榮麗，范賢明，湛曉勤，李多.頭孢美唑鈉注射劑治療呼吸系統感染的隨機、雙盲、多中心臨床試驗[J].中國抗生素雜志，2006（06）.

[3]王瑩瑩，龔莉，王成港，王春龍，陳常青.頭孢美唑鈉的體外降解穩定性[J].中國新藥雜志，2012（12）.

[4]蔡尾玉，黃凱文.高效液相色譜法測定注射用頭孢美唑鈉中頭孢美唑含量[J].中國民族民間醫藥，2012（04）.

[5]邊原，何林，夏祺悅.反相高效液相色譜法測定注射用頭孢美唑鈉的含量[J].中國藥業，2010（05）.endprint