沙門氏菌優化檢測方法在預防性體檢肛拭子檢驗中的應用

鄭少梅

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2017.20.087

[摘要] 目的 探析沙門氏菌的優化檢測方法對于預防性體檢流程中的肛拭子檢驗項目的應用價值。方法 方便選取2016年4—9月于該中心接受預防性體檢的500名食品衛生業從業者的肛拭子標本為研究對象，在相同環境下進行常規SF+SS檢驗及優化SBG+XLD檢驗，對比常規檢驗的檢出率和優化檢驗的檢出率。 結果 SBG聯合XLD優化檢測法檢出率為2.60%（13/500），SF聯合SS常規檢測法的檢出率為0.80%（4/500），優化檢測法檢驗效果優于常規檢測法，同時組間對比差異有統計學意義（P<0.05）。 結論 相較于SF聯合SS常規檢測法，SBG聯合XLD優化檢測法在沙門氏菌預防性體檢肛拭子檢驗中具有顯著優良性，更值得應用，可予以推廣。

[關鍵詞] 沙門氏菌；優化檢測方法；預防性體檢；肛拭子檢驗

[中圖分類號] R446.5 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2017）07（b）-0087-03

Application of Salmonella Detection Optimization Method in Testing the Preventive Physical Examination Anal Swab

ZHENG Shao-mei

Hanjiang District Disease Preventive and Control Center， Putian， Fujian Province， 351111 China

[Abstract] Objective To study the application value of salmonella detection optimization method in testing the preventive physical examination anal swab. Methods Convenient selection 500 cases of anal swab specimens of food hygiene practitioners with predictive physical examination in our center from April to September 2016 were selected and tested by the routine SF+SS and optimized SBG+XLD under the same environment， and the test rate of the two test methods was compared. Results The test rate of SBG and XLD was better than that of SF and SS[2.60%（13/500）vs 0.80%（4/500）]， and the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The SBG and XLD optimized test in testing the preventive physical examination anal swab is obviously better than that of SF and SS， which is worth promotion and application.

[Key words] Salmonella； Optimized test method； Preventive physical examination； Anal swab test

沙門氏菌，作為一種常見病原菌，其感染者極易發生食源性腹瀉[1]，在我國，該病菌原因導致的食物中毒在此類細菌性事件中占據首位[2]。我國在食品安全法中已頒布相關條令，明確規定各個級別的疾病預防控制中心須對餐飲及其他公共場所從業者作預防性體檢，其中沙門氏菌被清楚制定為必檢內容之一，該手段對于遏制沙門氏菌傳播與相關疾病蔓延都有顯著作用。為探析沙門氏菌常規與優化檢測方法對于預防性體檢流程中肛拭子檢驗所發揮的效用，現以2016年4—9月于該中心接受預防性體檢的500名食品衛生業從業者的肛拭子標本為研究對象，同時給予常規檢測與優化檢測，實驗結果顯示，相較于SF+SS常規檢驗法，SBG+XLD優化檢驗法效果更優，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取于該中心接受預防性體檢的500名食品衛生業從業者的肛拭子標本為研究對象，其中男280名，女220名，年齡區間18～63歲，平均年齡為（40.81±12.53）歲。

1.2 檢驗方法

常規檢測法具體流程如下：每個體檢人員同時規范采集2根肛拭子標本，將其中1根接種到增菌液SF內，在37℃環境內做增菌培養，待18～24 h后，于該增菌培養液中挑取一環接種于SS瓊脂平板，在37℃環境內持續培養24 h，其后，將無色、半透明狀、濕潤、中心呈黑色以及邊緣呈光滑狀的可疑菌落一一挑取出來，將其接種至三糖鐵瓊脂及賴氨酸脫羧酶試驗培養基，其后于37℃環境內持續培養24 h，在必要時可將培養時間延長至48 h。三糖鐵的反應：斜面（K），底層（A），產氣（+/-），H2S（+/-）。賴氨酸脫羧酶的反應則為（+/-）。根據三糖鐵瓊脂與賴氨酸脫羧酶試驗培養基的最終反應結果，來判定是否為可疑沙門氏菌，如為可疑沙門氏菌，則將其轉種到營養瓊脂平板處，待37℃環境內持續培養24 h后，以生理鹽水制備濁度適當的菌懸液，將之接種至API20E，通過APILAB PLUS細菌鑒定操作軟件系統予以鑒定，與此同時，以沙門氏菌菌體“O”抗原和鞭毛“H”抗原做血清凝集，鑒定菌種具體類型。endprint

優化檢測法具體流程如下：將另一根肛拭子同時接種于增菌液SBG內，在37℃環境內做增菌培養，待18～24 h后，從該增菌培養液內挑取一環劃線接種于XLD瓊脂平板，繼續放置在37℃環境作為期24 h的菌落培養，其后，將淡紅色或無色、濕潤、邊緣光滑、中心黑色以及中等大小特征的可疑菌落全部挑取出來，接種至三糖鐵瓊脂與賴氨酸脫羧酶試驗培養基，后續操作同上述常規檢測法。

1.3 評價指標

比較兩種檢測方法在沙門氏菌方面的檢出情況。

1.4 統計方法

兩組肛拭子樣本資料及檢驗結果數據進行SPSS 20.0統計學軟件分析，帶有[n（%）]的計數資料行χ2檢驗法，帶有標準差（x±s）的計量資料行t檢驗法，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

研究中優化檢測法共檢出沙門氏菌感染者13例，常規檢測法共檢出沙門氏菌感染者4例。最終檢出結果具體如表1。

3 討論

沙門氏菌可人畜共患，人體可被直接感染，倘若食用感染該病菌的動物及其動物產品，也可發生食物中毒，也有部分感染者感染病菌潛伏期較長，即便不曾表現出沙門氏菌感染癥狀，但其體內卻已攜帶此病原菌體，一旦該類人群從事食品、飲用水等行業的生產加工，就很可能導致沙門氏菌流行與大范圍傳播。據相關文獻可知，由腸道致病性病菌感染所引發的各種消化道疾病帶有多發性，尤其是近年來臨床發病率一直居高不下且連年增長，該種現象成因可能復雜多樣，其中源自食品加工及飲用水等行業從業者原因造成的污染在疾病傳播中占較大比例，故此，加強該類行業從業者的人員管理，對于疾病傳播率的有效控制與進一步降低至關重要、不容忽視[3]，其中主要防范措施之一就是針對這些從業者，定期、定時開展預防性體檢活動[4]。

預防性體檢的現實目的就是要篩選出人群中的病原體攜帶者，進而避免他人感染，在眾多預防性體檢病原體中，沙門氏菌最具常見性和重要性。沙門氏菌，被歸類于革蘭陰性菌群范疇內，無莢膜，大部分生有鞭毛，可存活于糞便當中，存活時間通常為1～2個月。調查顯示，在我國所有食源性質的各類食物中毒事件當中，沙門氏菌病原體感染者在數量上列舉首位[5]。當人類感染了沙門氏菌之后，在臨床上一般有3個類型[6]。①傷寒型，該型主要由傷寒沙門氏菌或者副傷寒沙門氏菌所引起的；②敗血癥型，大多是由豬霍亂沙門氏菌，或鼠傷寒沙門氏菌，或腸炎沙門氏菌的感染原因造成的；③胃腸炎型，通常而言，胃腸炎型感染中常見率最高的感染事件包括沙門氏菌感染性食物中毒與腹瀉，皆是食品貯藏沙門氏菌并不斷繁殖，進而侵入人體腸道，在腸道內繼續繁殖，同時釋放出數量龐大的腸毒素，最終導致嚴重胃腸炎疾病。如若未能控制好沙門氏菌各相應類型的感染，就極其容易引發爆發或流行。

在沙門氏菌檢測中，傳統常規應用辦法是先增菌、后分離[7]，在該次研究中，將沙門氏菌增菌、分離所需的培養基經過重新組合優化后，應用SBG聯合XLD瓊脂平板法進行了檢測，并以檢測結果對該種搭配組合的優良性給予了實驗證實。在研究中，500名樣本中，SBG聯合XLD優化檢測法檢出率為2.60%（13/500），SF聯合SS常規法檢出率為0.80%（4/500）；優化檢測法檢出率常規檢測法檢出率，同時組間對比差異有統計學意義（P<0.05）。由此可見，相較于SF聯合SS常規檢測法，SBG聯合XLD優化檢測法在沙門氏菌預防性體檢肛拭子檢驗中具有顯著優良性，更值得應用，可予以推廣，該結論與敖琴芳[8]研究相類似。

常規與優化法最終檢測結果出現明顯差異，經分析，一方面可能與在不同增菌液中細菌生長至峰值所需的時間不同有關；另一方面則可能是由于主要靠觀察在瓊脂平板處沙門氏菌菌落特殊形態來找出可疑菌落，而在不同的選擇性培養基上沙門氏菌可疑菌落在識別難易程度上存在一定差異；此外，也可能因增菌液中所含成份不同，以致對沙門氏菌的增菌效果以及對沙門氏菌以外的其他菌抑制程度不同。

4 結語

綜上所述，為有效預防食物中毒及疾病傳播事件的發生，有必要加強對食品生產加工及飲用水生產等行業從業者的檢查管理，其中沙門氏菌SBG聯合XLD優化檢測法兼具操作簡易、檢出率高的優質性，于預防性體檢的肛拭子檢驗領域獲得較好的應用效果，故可予以推廣。

[參考文獻]

[1] Arlai D， Chuanchom S， Sirinarumitr T. Optimization of cell permeabilization for rapid detection of Salmonella in pork by FISH[J]. Thai Veterinary Medicine， 2015， 45（1）：91-99.

[2] 劉曉晨，徐品，張默宇，等.預防性體檢便樣中沙門氏菌的優化檢測方法[J].口岸衛生控制，2013，18（3）：21-23.

[3] 陳玲，張菊梅，楊小鵑，等.南方食品中沙門氏菌污染調查及分型[J].微生物學報，2013，53（12）：1326-1333.

[4] 陳海平，冼桂江.從業人員體檢沙門氏菌檢測結果分析[J].大家健康，2017，11（2中旬版）：53-54.

[5] 許婷.探討沙門氏菌優化檢測方法在預防性體檢便樣檢驗中的作用[J].大家健康，2017，11（1上旬版）：72-73.

[6] 葉雪梅，胡佳佳，胡靜，等.檢測食品沙門氏菌的生物傳感器持久性研究[J].農業工程學報，2014，30（20）：334-338.

[7] Zhao WL， Yang LP， Xue-Ming HU， et al. Optimization and Evaluation of the Methods for Isolating Salmonella in Preventive Occupational Physical Examination[J].Computers & Structures， 2015， 158（3）：61-70.

[8] 敖琴芳.沙門氏菌優化檢測方法在預防性體檢便樣檢驗中的作用[J].口岸衛生控制，2016，21（2）：55-57.

（收稿日期：2017-04-17）endprint