中藥材中硝酸鹽含量測定方法的研究

夏國鳳

【中圖分類號】R478.9 【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-6851（2017）09--01

1 材料與方法

1.1 實驗材料

實驗選用不同品種的丹參藥材分別為北丹1號（選育品種）、陜黃1號（選育品系），濱海丹參。該中藥材栽培于藥植所栽培試驗基地，分為地下根及根莖、莖及葉三部分（由于陜黃1號莖不明顯，所以至分成根、莖兩部分）曬干。

連作種植丹參藥材選用北丹一號為試驗品種，試驗區面積30m2。丹參施肥試驗處理有：頭茬常規施肥：雞糞500kg/667m2、復合肥100kg/667 m2；連作常規施肥：雞糞500kg/667 m2、復合肥100kg/667m2。連作生物有機肥：生物有機肥500kg/667m2（其中250kg撒施，250kg按1：1伴土穴施），復合肥：100kg/667m2。

1.2 實驗設備和儀器

HH-6型數顯恒溫水浴鍋，UV752N紫外可見分光光度計，FW135中草藥粉碎機（天津泰斯特儀器有限公司）， DIONEXICS-1000離子色譜儀（包括Chromeleon7色譜工作站）、SIGMA3K15離心機、KQ5200DV型數控超聲波清洗器、AL204萬分之一電子天平、HDM-3000數顯控溫電熱套。

1.3 實驗方法

1.3.1 供試品溶液的提取

精密稱取粉碎樣品0.50g，置三角燒瓶中，準確加入去離子水50mL，超聲處理30min，轉移提取液于10mL離心管中，12000r/min，離心15min，取上清液過RP小柱（依次用甲醇、水淋洗預處理），棄去前3mL流出液，收集后2mL流出液，流出液過0.22m濾頭后直接進樣。

1.3.2 對照品溶液的配制

精密稱取0.75g經105℃干燥至恒重的亞硝酸鈉于500mL容量瓶中加水定容，配制1000g/mLNO_2^-標準儲備液；精密稱取0.815g硝酸鉀于500mL容量瓶中加水定容，配成1000g/mLNO_3^-標準儲備液；精密移取1mL亞硝酸鈉標準儲備液于100mL容量瓶中，配制10g/mLNO_2^-標準使用液。精密移取5mL硝酸鈉標準儲備液于100mL容量瓶中，配制501000g/mLNO_3^-標準使用液。

1.3.3 色譜條件

水為超純水，電阻率為18.2MΩ?cm^（-1），亞硝酸鈉和硝酸鉀對照品均為分析純（純度≥99.0%），碳酸鈉（純度≥99.5%），碳酸氫鈉（純度≥99.7%）。IonPacAS234250mm離子交換柱、IonPacAS23450mm保護柱、ASRS300-4mm抑制器。

1.3.4 測定方法

按設定的色譜條件，待基線穩定后，依次取相同體積的標準工作溶液和待測樣品溶液，注入離子色譜儀，根據保留時間定性，標準曲線法定量。

2 結果與分析

2.1 不同品種丹參藥材中亞硝酸鹽和硝酸鹽含量分析

丹參的不同品種及植株的不同部位中亞硝酸鹽和硝酸鹽含量測定結果見表1。從表1的測定結果可以看出，不同品種丹參根中亞硝酸鹽含量有明顯差異，其中濱海丹參是北丹1號、陜黃1號中的2倍，而北丹1號及陜黃1號差別不大。

不同品種丹參的根部硝酸鹽含量差異十分明顯，表現為濱海丹參>北丹1號>陜黃1號。而丹參葉中亞硝酸鹽含量差異不大，其中硝酸鹽含量差異明顯，表現為陜黃1號>北丹1號>濱海丹參。不同品種丹參莖部亞硝酸鹽含量差異不大，而莖中硝酸鹽含量具有明顯差異，北丹1號莖中硝酸鹽含量最高，可以達到15000mg/kg。從植株的不同部位亞硝酸鹽含量來看，濱海丹參為莖>根>葉，三者之間具有明顯的差異；北丹1號為莖>根>葉，根、莖之間差異不明顯，但與葉之間具有明顯的差異；陜黃1號為根>葉，根、葉差異明顯。不同品種植株的不同部位硝酸鹽含量均表現為莖>根>葉，三者之間差異十分明顯。

2.2 連作及施肥對丹參藥材中亞硝酸鹽和硝酸鹽含量的影響

連作及施肥對丹參藥材中亞硝酸鹽和硝酸鹽含量影響的測定結果見表2。從表2中的測定結果可以看出，頭茬常規施肥和連作常規施肥丹參中亞硝酸鹽含量差異不大，在6.4mg/kg左右；而生物有機肥能夠明顯減少連坐地丹參中亞硝酸鹽含量，為4.7mg/kg。從硝酸鹽含量變化來看，在施用相同肥料條件下，連作能夠明顯促進丹參中硝酸鹽的積累，連作常規施肥丹參中硝酸鹽含量是頭茬常規施肥的5倍；在相同的土壤條件下，生物有機肥能夠明顯降低丹參中硝酸鹽含量。

3 討論

根據《食品中亞硝酸鹽和硝酸鹽的測定方法》（GB5009.33-2010）中的試驗表明，當采用分光光度法測定中藥材亞硝酸鹽含量時，由于中藥材中酮類、酚酸類有機化合物易溶于水，水提取液加入顯色劑后顯色液呈深色，嚴重干擾比色結果，OD值為負值。硝酸鹽則采用鎘柱還原為亞硝酸鹽后測定，該方法需分步測定硝酸鹽和亞硝酸鹽，操作繁瑣，專屬性差，試驗過程中檢驗人員需要接觸具有致癌性的鎘。因此，分光光度法無法應用于中藥材中亞硝酸鹽和硝酸鹽含量的測定。本文建立的超聲提取，利用離子色譜法測定中藥材中亞硝酸鹽和硝酸鹽，具有取樣量少（1g），耗時短（約40min），前處理簡單，專屬性強，靈敏度、準確度高，適用于大批中藥材樣品的檢測。

參考文獻

龐小存.常用中藥材中亞硝酸鹽及硝酸鹽等六種陰離子含量分析及比較[D].北京中醫藥大學，2016.

李紫薇.食品中亞硝酸鹽含量測定方法研究[J].石化技術，2016，2306：107+126.endprint