高效液相色譜法測定羅紅霉素顆粒含量

李慧

哈藥集團制藥六廠 150000

高效液相色譜法測定羅紅霉素顆粒含量

李慧

哈藥集團制藥六廠 150000

目的：探討使用高效液相色譜法來測定羅紅霉素顆粒含量的可行性與可靠性，為羅紅霉素顆粒含量測定找尋最佳的測定方法。方法：通過高效液相色譜法進行測定，多次測定確定其穩定性和回收率。結果：通過測定試驗可以得知，當羅紅霉素顆粒濃度位于0.5-0.7mg·ml-1范圍時，其樣品會呈現很好的線性關系，回收率很高。結論：從試驗結果可以看出，在對羅紅霉素顆粒的含量進行測定時采用高效液相色譜法是十分可行的，并且測定方法簡單可靠，可以作為標準測定方法大力推廣。

高效液相色譜法；羅紅霉素顆粒；含量；測定

作為一種常見的西藥抗菌藥物，羅紅霉素的群眾基礎較大，市場需求自然也很大。而為了方便兒童服用，羅紅霉素除了片劑和膠囊劑以外，也開始生產顆粒制劑。與片劑和膠囊制劑相比，顆粒劑更容易被人體吸收，效果更佳。為了能夠進一步優化羅紅霉素顆粒的生產工藝，需要在生產中對其含量進行測定，以確定生產工藝的穩定性是否符合要求。而高效液相色譜法作為一種較為成熟的測定方法，在羅紅霉素顆粒的含量測定中也發揮了非常積極的作用。在此本文就將高效液相色譜法測定羅紅霉素顆粒含量的試驗過程和結果報道如下：

1、儀器與試藥

1.1 儀器

JASCO高效液相色譜儀，JASCO-875-UV檢測器，JASCO807IT積分儀，JASCOAS-950自動進樣器。

1.2 試藥

乙腈、甲醇為色譜純，醋酸銨為分析純；羅紅霉素對照品（96%，天津藥品檢定所），羅紅霉素顆粒劑（規格每袋為50mg，天津市兒童醫院批號970601，970602，970603）。

2、方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱LichrosorbRPC187μm（244mm×4.0mm），流動相為乙腈-0.083mol·L-1醋酸銨水溶液-甲醇（55∶23∶28）用醋酸調節pH值為6.8，流速1.0ml·min-1，柱溫40℃，檢測波長215nm。

2.2 標準曲線的制作

精密稱取羅紅霉素對照品約260mg，置25ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度；分別精密吸取上述溶液0.5，1，2，3，4，5，6，7ml置于10ml量瓶中，用流動相定容，使濃度分別為0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0mg·ml-1，分別吸取20μl進樣測定峰面積，每種濃度重復進樣 3次，以峰面積 Y對濃度 X回歸，得線性方程Y=444083X-7714.6，r=0.9995，說明在0.5～7mg·ml-1范圍內線性關系良好。

2.3 穩定性試驗

每隔1h測同一濃度對照品溶液1次，連續6h，結果峰面積基本不變，平均RSD為0.42%。

2.4 回收率試驗

精密稱取羅紅霉素對照品適量，按處方配制羅紅霉素顆粒劑，以下按“樣品測定”項下操作，精取溶液20μl進樣，測定峰面積，按外標峰面積法計算回收率，結果見表1。

表1 回收率實驗結果（n＝6）

2.5 樣品測定

取羅紅霉素顆粒劑混勻、研細，精密稱取適量（約相當于羅紅霉素100mg）置25ml量瓶中，加入流動相適量，經超聲波處理10min，使羅紅霉素溶解，加流動相稀釋至刻度，過濾，棄去初濾液，精密量取續濾液5ml，置10ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另精密稱取羅紅霉素對照品50mg，加流動相溶解并定容，制成每ml中含2mg的溶液作為對照品溶液。分別精密量取對照品溶液和樣品溶液各20μl注入液相色譜儀，測定峰面積，按外標法計算。結果見表2，色譜圖1。

表2 樣品含量測定結果

圖1 色譜圖

3、討論

從專業角度上講，高效液相色譜法也被稱之為高分離度液相色譜法。該方法是色譜法中一種，也是應用最為廣泛的一種。化學、醫學、工學領域都有涉及。高效液相色譜法與其他色譜法相比，擁有獨特的優勢：

第一，高壓。高效液相色譜法中的流動相是液體，該液體在經過色譜柱時，需要抵擋非常大的阻力，為此載液務必要加高壓；第二，高速。高效液相色譜法能夠進行快速分析，液體流速也非?？欤话闱闆r下，樣品在15min左右就能夠分析出來，最長時間不會超過半個小時，還有些樣品在5min之內就可以完成分析；第三，高效。高效液相色譜法分離效能非常高，應用固定相與流動相，樣品的分離效果非常好；第四，高靈敏度，高效液相色譜法中的紫外檢測器能夠達到0.01ng；第五，使用范圍非常廣，據統計現實生活中有接近70%的有機化合物可以利用此種方法，尤其是高沸點、強極性的樣品分析效果最佳。另外，高效液相色譜法還具有容易回收、樣品不容易損壞的特點。但是此種方法也存在著一定的劣勢，突出的就是“柱外效應”。如果在分離的過程中，流動相流行出現了變化，色譜峰會非常容易出現加寬情況，柱效率會因此大大降低。

而羅紅霉素顆粒屬于抗生素，主要用來治療敏感菌株引發的各類感染，比如皮膚軟組織感染、上下呼吸道感染等。顆粒顏色為白色或者與白色十分相近的顏色，擁有芳香，味道甜中帶苦。羅紅霉素顆粒服用會出現不良反應，比較常見的有惡心、腹痛等，如果患者對羅紅霉素過敏，或者存在著肝、腎不全，就要禁止復用。羅紅霉素顆粒口服之后，患者都會比較快的吸收，而且具有非常高的峰濃度，大量的實驗研究證明，患者如果空腹復用該藥品，會有良好的吸收效果。但是需要注意控制服用量。這也是為什么要在生產中控制羅紅霉素顆粒的含量并對其進行精密測定的原因。

通過本次試驗可以看出，運用高效液相色譜法，將羅紅霉素濃度控制在一定范圍內，就會擁有良好的線性關系，而且羅紅霉素的回收率非常高，沒有任何的輔助材料的干擾。因此高效液相色譜法可以用來進行測定羅紅霉素顆粒含量。高效液相色譜法與其他測定方法相比，簡單、快速、容易控制，將其用來進行羅紅霉素顆粒生產控制，可以確保產品質量。因此可以積極將高效液相色譜法推廣到羅紅霉素顆粒的含量測定中去。

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1672-5018（2017）02-281-1