乙型肝炎病毒DNA定量檢測與臨床的關系

洪淑丹林佩飛

1.樂清市第二人民醫院 浙江溫州 325600；2.樂清市人民醫院 浙江溫州 325600

乙型肝炎病毒DNA定量檢測與臨床的關系

洪淑丹1林佩飛2

1.樂清市第二人民醫院 浙江溫州 325600；2.樂清市人民醫院 浙江溫州 325600

目的：探討乙型肝炎病毒DNA定量檢測與臨床的關系。方法：選取我院2014年8月至 2016年8月收治的64例乙型肝炎患者的作為研究對象，所選取的患者均通過 ELISA（酶聯免疫吸附試驗）來檢測乙型肝炎的病毒血清標志物，聚合酶鏈式反應（PCR）來檢測 HBV-DNA的含量。結果：HBcAb、HBeAg、HBsAg的 HBV-DNA的陽性率為 96.6%，HBcAb、HBeAg、HBsAg為 14.3%，HBeAg、HBsAg為 100%，HBcAb、HBsAg為33.3%，HBeAb、HBcAb、HBsAb為 20%，HBcAb、HBeAb為 33.3%，HBsAb為12.5%。全陰的為0。結論：定量PCR可真實反映HBV感染、復制及病程變化，對乙型肝炎臨床診斷及治療均有較大的指導意義。

乙型肝炎病毒；DNA定量檢測；臨床關系

近年來隨著分子生物學技術的發展及其在臨床應用方面的推廣，應用實時熒光定量聚合酶鏈反應檢測 HBV 病毒載量已成為目前臨床診斷 HBV 感染的常用指標，進一步提高了檢測的質量【1】。同時采用酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測乙型肝炎病毒 HBV標志（HBV-M）簡便易行，一直為許多臨床科室使用。臨床上有必要把此兩種方法的檢測結果聯合起來進行分析，指導臨床應用。為了探討乙型肝炎病毒 DNA的定量檢測和臨床的關系，選取我院2014年8月至 2016年8月收治的64例乙型肝炎患者的作為研究對象，所選取的患者均通過 ELISA（酶聯免疫吸附試驗）來檢測乙型肝炎的病毒血清標志物，聚合酶鏈式反應（PCR）來檢測 HBV-DNA的含量。現將大致研究結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取我院2014年8月至 2016年8月收治的64例乙型肝炎患者的作為研究對象，其中男36例，女28例，年齡在 13～75歲之間，平均（33.9±15.1）歲，所選取的患者都符合病毒性肝炎的診斷標準。且各類型的肝炎患者之間的資料沒有明顯的差異，結果具有可比性。

1.2 檢測的儀器和試劑 HBV血清檢測標志物檢測試劑盒和HBV核酸擴增熒光檢測試劑盒；熒光定量聚合酶鏈反應（PCR）分析儀。

1.3 方法 在患者晨起空腹時抽取 5 ml靜脈血，將血清離心分裝在 -20℃下保存備用。然后通過 ELISA（酶聯免疫吸附試驗）來檢測乙型肝炎的病毒血清標志物，操作步驟按照試劑盒的規定進行。臨床方法采集患者的肘靜脈血，采取實時熒光定量PCR方式對乙肝DNA進行檢測。觀察對比熒光定量PCR方式對乙肝DNA檢測的準確率。陰性的標準為熒光定量PCR在1×103拷貝數/ml以下；陽性的標準為熒光定量PCR在1×103拷貝數/ml以上。對比觀察陰性與陽性結果的差異，并且分析影響檢測結果的因素[2]。

1.4 觀測的指標 觀測患者血清學的診斷指標和 HBV-DNA的陽性率以及定量檢測的結果情況；血清學的診斷分組：第一組為HBcAb、HBeAg、HBsAg，第二組為 HBcAb、HBeAg、HBsAg，第三組為HBeAg、HBsAg，第四組為HBcAb、HBsAg，第五組為HBeAb、HBcAb、HBsAb，第六組為HBcAb、HBeAb，第七組為 HBsAb以及全陰。

1.5 統計學方法 采用 SPSS16.0統計學軟件對數據進行統計學處理，以P＜0.05為差異具有統計學意義的基礎。

2 結果

64例患者血清學的診斷指標和 HBV-DNA的陽性率以及定量檢測的結果情況，詳見表1。

表1 患者血清學的診斷指標和HBV-DNA的陽性率以及定量檢測的結果情況【n（%）】

第三組 H B e A g、H B s A g 4 4（1 0 0%） 7.7 9±0.6 1第四組 H B c A b、H B s A g 3 1（3 3.3%） 6.1 9±0.5 1第五組 H B e A b、H B c A b、H B s A b 5 1（2 0%） 3.4 9±0.5 2第六組 H B e A b、H B c A b 3 1（3 3.3%） 3.6 6±0.5 1第七組 H B s A b 8 1（1 2.5%） 3.1 1±0.3 3全陰 5 0 0

3 討論

乙型肝炎是嚴重威脅人類健康的、發病率很高的傳染病，對乙肝病毒（HBV）的研究雖然取得了很大進展，但是目前仍然沒有非常有效的辦法，隨著HBV基因型概念的提出，乙肝的研究進入了一個新的階段。HBV的基因型存在一定的地區分布特征，并可能與疾病的進展有一定的關聯[3]。隨著分子生物技術的發展，病毒感染的臨床診斷技術已從定性檢測發展到定量檢測。從核酸雜交技術到定量PCR技術檢測HBVDNA，其靈敏度和特異性不斷提高，且在研究病毒感染量與臨床病毒的關系、評價和檢測抗病毒藥物療效等方面具有重要指導作用。我國現在屬于乙型肝炎大國，發病率在全世界排在前幾位。有研究表明，HBsAg的流行率大約為 9.75%，當人體感染了乙型肝炎病毒之后會出現不同的癥狀以及臨床表現。HBeAg呈陽性表示患者體內的乙型肝炎病毒在活躍的復制，表明其具有很強的傳染性[4]。HBcAb、HBeAg、HBsAg的 HBV-DNA的陽性率為96.6%，HBeAg、HBsAg為 100%，說明本組患者的 HBeAg陽性血清指標的模式組主要為第一組和第三組，而且其 HBV-DNA的陽性率以及 HBV-DNA的定量都比其他各組要高，說明 HBeAg有可能與HBV-DNA的含量之間存在一定的正相關性[3]。HBcAb、HBeAg、HBsAg為 14.3%，HBV-DNA 的對數的平均值為（5.01±1.79），HBcAb、HBsAg為 33.3%，HBV-DNA 的對數的平均值為（6.19±0.51），說明當 e系統的抗原陰轉時，HBV-DNA還是有可能被檢測到，雖然其含量比第一組和第三組低。HBeAb、HBcAb、HBsAb為33.3%，HBV-DNA 的對數的平均值為（3.66±0.51），說明 HBsAb是一種保護性的抗體。

綜上所述，各種類型的乙型肝炎患者都有一定程度 HBV-DNA復制，HBeAg的陽性患者其 HBV-DNA的水平最高，將 HBV-DNA和 HBeAg定量聯合進行診斷，可以為早期的乙型肝炎篩查以及治療提供可靠的依據。

[1]李金明.乙型肝炎病毒血清標志物測定及結果解釋的若干問題.中華檢驗醫學雜志，2006，29（5）：385.

[2]梅玉峰，黃敏，陳麗娟.HBV-DNA陽性乙肝感染者血清學標志物臨床分析[J].國際檢驗醫學雜志，2010，31（9）：1004-1005.

[3]Sadakazu U，Hiroaki O，Hiroko I，et al.Serological detection of hepatitis B virus genotypes by ELISA with monoclonal antibodies to typespecific epitopes in the preS2-region product[J].J of Virol Methods，1999，80：97ˉ112.

[4]潘春燕.溶血對乙型肝炎病毒 DNA 定量檢測的影響.左江醫學，2008，36（1）：53.

R373.2

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1672-5018（2017）01-214-01