不同產地巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量測定

吳凌鳳，謝華松

(嘉應學院醫學院，廣東 梅州 514000)

不同產地巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量測定

吳凌鳳，謝華松*

(嘉應學院醫學院，廣東 梅州 514000)

目的：對不同產地巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量進行比較研究。方法：采用HPLC測定不同產地巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量，色譜柱：Agilent(4.6 mm×250 mm,5μm)；以甲醇-0.1%磷酸水為流動相(78:22)；流速1.00 mL·min-1；柱溫30 ℃；檢測波長254 nm。結果：巴戟天藥材中大黃素甲醚的線性范圍為0.118-1.18 μg/mL，r2=0.9991,大黃素甲醚的平均回收率在87.12%。不同產地巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量有所不同。結論：所建立的分析方法可以測定巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量。

巴戟天；大黃素甲醚；高效液相色譜法；含量測定

巴戟天為茜草科巴戟天屬植物巴戟Morinda officinalis How．的干燥根莖，具補腎陽、強筋骨、祛風濕功效，臨床用于治療陽痿遺精、宮冷不孕、月經不調、少腹冷痛、風濕痹痛、筋骨痿軟等癥。巴戟天始載于《神農本草經》，列為上品，歷代本草均有記載，主要分布在廣東、福建、廣西、海南等省的熱帶和亞熱帶地區，其中以廣東德慶為道地產地。巴戟天含多種化學成分，如蒽醌、環烯醚萜、寡糖、多糖等成分。巴戟天中的蒽醌類成分有具有促進骨髓基質細胞增殖[1]等作用，而大黃素甲醚具有很強的抗炎、抗癌作用[2]，且有抗骨質疏松活性[3]。

1 材料

島津LC-10AT高效液相色譜儀(SPD-10A檢測器)。巴戟天藥材于2016年10月購于五華，德慶等地，經嘉應學院醫學院副教授丘明建鑒定為巴戟天M．officinalis．的干燥成熟根莖。大黃素甲醚(中國藥品生物制品檢定所，批號：110758-201013)，甲醇為色譜純(天津科密歐化學試劑有限公司)，純凈水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

AgilentC18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動相以甲醇-0.1%磷酸水(78：22)；流速1.00 mL·min-1；柱溫30 ℃；檢測波長254 nm。在此實驗條件下，供試品溶液中大黃素甲醚對照品與其他成分得到良好分離，其色譜峰保留時間與相應對照品一致(見圖1)。理論塔板數以大黃素甲醚峰計算應不低于4 000。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取2.36mg大黃素甲醚對照品，置100mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容，備用。

2.3 供試品溶液的制備取

巴戟天粉末1 g(過三號篩)，精密稱定，置100 mL圓底燒瓶中，加少量20%硫酸濕潤，靜置1h，精密加入三氯甲烷50mL，回流提取2 h，濾過，加硅膠(200-300目)0.2g拌勻，置水浴上蒸干，加于硅膠柱[200～300目，1g，內徑為1cm，干法裝柱]上，以三氯甲烷-石油醚(5：5)混合溶液20ml洗脫，棄去洗脫液，再用三氯甲烷-石油醚(8:2)混合溶液10ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，即得。

2.4 標準曲線的制備

分別取上述對照品溶液0.05，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mL至10 mL容量瓶中，稀釋至刻度，成系列對照品溶液。按“2.1”色譜條件，分別進樣20μL，測定峰面積。以大黃素甲醚濃度為橫坐標、峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程：y=1.8E+7X+1452.6,r2=0.9991。大黃素甲醚0.118～1.18μg/mL與峰面積的線性關系良好。

圖1 A為大黃素甲醚對照品的色譜圖 B為巴戟天樣品的色譜圖

2.5 精密度試驗

取“2.4”項對照品溶液按“2.1”色譜條件重復進樣6次，每次20 μL，峰面積的RSD為0.8%(n=6)。結果表明精密度良好。

2.6 穩定性試驗

在上述色譜條件下，精密吸取同一供試品溶液20μL，然后每隔4 h各考察1次。結果表明，供試品溶液在12h內測定結果穩，供試品溶液中大黃素甲醚色譜峰面積的RSD為1.6%說明樣品溶液在12h內穩定。

2.7 重復性試驗

對同一批巴戟天樣品按“2.3”項方法平行制備六份，按"2.1"項色譜條件進樣，峰面積RSD為2.1%(n=6)。結果表明本方法重復性良好。

2.8 加樣回收率試驗

精密稱取6份已知含量的樣品粉末，每份0.5 g，分別加入大黃素甲醚對照品溶液，按按“2.3”項方法平行制備六份，按“2.1”項色譜條件進樣，峰面積平均回收率為87.12%，說明該測定方法測定結果準確。

2.9 不同樣品的含量測定

取不同產地巴戟天藥材，按2.3項下制備成供試品溶液，并按2.1項下色譜條件進行含量測定，結果如下。

表1 不同產地巴戟天藥材中大黃素甲醚含量 μg/g

3 討論

本實驗樣品提取條件的選擇比較了氯仿，硫酸-氯仿，硫酸-石油醚，甲醇幾種提取方法，發現以硫酸-石油醚提取的樣品雖然雜質較少，但大黃素甲醚的提取較少。以硫酸-氯仿提取的樣品大黃素甲醚含量最高，但雜質也較多，故需對樣品進行純化。通過TLC篩選，發現氯仿-石油醚(8:2)能將大黃素甲醚與雜質分開。實驗結果表明，收集的樣品中不同產地的巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量是有一定差距的，以玉林產地的含量為最高，其次為欽州，而南靖的含量最低。本實驗為探求高質量的巴戟天產地，篩選優良品種和擴大藥源提供了參考依據，但單一成分并不能說明藥材總體質量，還需結合其他成分含量進一步研究。

[1] 凌 昆，郭素華，趙諧.閩產巴戟天中促進骨骼基質細胞增殖成分的初步研究[J].中國現代應用藥學雜志,2008,25(4):271.

[2] 唐 康.穗花大黃化學成分的研究[D]. 成都：西南交通大學,2009．

[3] 吳巖斌.巴戟天抗骨質疏松活性成分及品質評價[D]. 福州：福建中醫藥大學,2009.

(本文文獻格式：吳凌鳳，謝華松.不同產地巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量測定[J].山東化工，2017，46(14)：76-77，79.)

HPLC analysis of physcion in Morinda officinalis from different locations

WuLingfeng,XieHuasong*

(Medical College of Jiaying University,Meizhou 514000,China)

Objective :To establish a HPLC method to determine the quantitative of physcion in Morinda officinalis from different locations.Methods:Separation column was Agilent C18(4.6×250mm,5μm)with the column temperature of room temperature.The mobile phase composition was methonal-0.1% phosphoric acid (78：22) and the flow rate was 1.0ml/min.The UV detection wavelength was 254nm.Results :A good linearity was obtained in the range of 0.118-1.18μg/mL with r2=0.9991.The average recovery was87.12%.Conclusion : The content of physcion was vary with the producing area of Morinda officinalis.The method was good for determining physcion in Morinda officinalis.

morinda officinalis;HPLC;physcion;content determination

2017-05-05

吳凌鳳(1988—)，女，廣東梅州人，助教，主要從事藥物分析研究。

O657.7+2

A

1008-021X(2017)14-0076-02