植物油中鄰氨基苯甲二酰胺類農藥殘留檢測技術研究

張 云 陳俊玉 陳澤宇 張信仁

(三明出入境檢驗檢疫局1，三明 365000)(東山出入境檢驗檢疫局2，漳州 363401)

植物油中鄰氨基苯甲二酰胺類農藥殘留檢測技術研究

張 云1陳俊玉2陳澤宇1張信仁1

(三明出入境檢驗檢疫局1，三明 365000)
(東山出入境檢驗檢疫局2，漳州 363401)

建立了同時測定植物油中溴氰蟲酰胺、氟蟲雙酰胺、氯蟲苯甲酰胺3種鄰氨基苯甲二酰胺類農藥殘留的凝膠滲透色譜(GPC)-液相色譜檢測方法。植物油中殘留的鄰氨基苯甲二酰胺類農藥，經環已烷-乙酸乙酯混合溶液提取后，用凝膠滲透色譜系統凈化，以乙腈∶0.1mol/L的乙酸銨水溶液(58∶42)作為流動相，DAD檢測器測定，外標法定量。測定結果表明：采用本方法檢測植物油中3種鄰氨基苯甲二酰胺類農藥，方法檢出限均能達到0.1mg/kg，在標準曲線質量濃度0.1～2 mg/L之間線性相關系數均大于0.999 8，在0.1、0.2、1mg/kg水平添加回收，回收率在70.1%～99.1%范圍之間，準確度較高；相對標準偏差范圍在3.0%～9.7%之間，精密度較好。

植物油 鄰氨基苯甲二酰胺 凝膠滲透色譜 液相色譜

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑

Agilent1200高效液相色譜儀(配DAD檢測器)、Autoclean凝膠滲透色譜儀：美國LabTech公司。

菜籽油：市售。乙腈、甲醇、乙酸胺為色譜純，環已烷、乙酸乙酯為分析純。水：符合GB/T 6682—2008中一級水的規定。 溴氰蟲酰胺、氟蟲雙酰胺、氯蟲苯甲酰胺標準品，純度均≥97%：Dr.Ehrenstorfer公司。分別稱取適量標準品用甲醇配制成100 mg/L的標準儲備液，該溶液在2～8 ℃環境中可保存3個月。使用時根據需要以流動相配成標準工作液。

1.2 試驗方法

1.2.1 樣品前處理

稱取食用油樣品2 g(精確至0.1 g)于10mL容量瓶中，加入環已烷-乙酸乙酯(1∶1，體積比)混合溶液定容至刻度，取樣液2mL進樣，用凝膠滲透色譜儀進行分離凈化，收集9～15 min的組分，于氮吹儀中50 ℃條件下氮吹至干，用1 mL流動相漩渦混勻溶解殘渣，過0.22 μm微孔濾膜后，高效液相色譜測定。

1.2.2 凝膠滲透色譜條件

凈化柱：S-X3 Bio-Beads(粒徑38～75 μm，填料22 g)；流動相：環已烷-乙酸乙酯(1∶1，體積比)；等度洗脫；流速：5 mL/min；凈化程序：0～9 min棄去洗脫液，9～16 min收集洗脫液。

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1.2.3 色譜條件

色譜柱：Inertsil ODS-P柱，150 mm×4.6 mm(i.d.)，5 μm，或其它等效色譜柱；柱溫：40 ℃；進樣量：50 μL；流速：1.0 mL/min；檢測器：DAD 檢測器，波長：240 nm；流動相：乙腈∶0.1mol/L的乙酸銨水溶液=58∶42。

1.2.4 定量測定

用混合標準工作溶液對樣品溶液進行外標法定量，樣品溶液中待測物的響應值應與相應濃度的對照標準物質響應值相當。

2 結果與討論

2.1 凈化條件的選擇與優化

在植物油中檢測農藥殘留，高含量的油脂成分是最大的基體干擾要素，必須采用有效的前處理方法，否則不但回收率不高，而且會對分析儀器造成嚴重污染，降低使用壽命[16]。常見的針對植物油中農藥殘留檢測方法主要有浸泡振蕩、液-液分配、超聲提取等傳統方法[17]，但該方法存在回收率低，凈化不徹底等問題；也有報道采用固相萃取法[18]進行凈化，固相萃取柱可以去除植物油基質，有機酸等雜質，但存在選擇性不高，處理過程較為繁瑣等缺點。凝膠滲透色譜能將分子量較大的甘油三酯基質與目標農藥組分有效分離開來，凈化效果良好，且省去了大量的人工操作，近年來得到廣泛推廣使用[19]。植物油中農藥殘留檢測不同凈化方法對比見表1。

表1 植物油中農藥殘留檢測不同凈化方法對比

利用凝膠滲透色譜法對植物油中鄰氨基苯甲二酰胺類農藥進行凈化。為確定最佳的樣品收集時間，從6 min起，以1 min為步長，每分鐘收集1管洗脫液，共收集15管，收集液于氮吹儀中50 ℃條件下氮吹至干，流動相溶解后過濾，液相色譜測定。結果表明，前3管未檢出，后5管也均未檢出，檢測結果見圖1。因此，確定收集時間為9～15 min。

圖1 添加1 mg/kg目標物各時間段檢出結果

2.2 色譜條件的優化

乙腈和甲醇是檢測農藥殘留最常用的2種有機系流動相。亢曉冬等[13]曾采用(甲醇+水)作為氯蟲苯甲酰胺的流動相，也有報道采用(乙腈+水+磷酸)作為流動相[20]。為了獲取目標物較好的保留、分離和響應效果，本試驗對比了(甲醇+水)、(乙腈+水+磷酸)以及(乙腈+水)作為流動相的效果，發現采用乙腈為有機系流動相時分離效果較好，靈敏度較高，且柱壓較低。對比了乙腈為有機系流動相時，加酸與不加酸條件下的信號大小，結果基本一致，但添加一定濃度的乙酸銨，峰型較好，標準樣品譜圖見圖2。

注:a為溴氰蟲酰胺；b為氯蟲苯甲酰胺；c為氟蟲雙酰胺圖2 0.1 mg/L雙酰胺類標準品色譜圖

2.3 方法的線性相關性和測定低限

準確配制鄰氨基苯甲二酰胺類系列標準溶液，質量濃度分別為0.1、0.2、0.5、1、2 mg/L。按照1.2中的儀器條件進樣分析后，以峰面積y對質量濃度x繪制工作曲線。線性相關系數R均大于等于0.999 8，在0.1～2mg/L范圍內呈良好的線性關系，結果見表2。根據信噪比S/N≥10為定量限(limit of quantitation, LOQ)和S/N≥3為檢出限(limit of detection, LOD)的參考規定，結合樣品處理過程中的稀釋倍數，計算各組分的方法檢出限分別為0.008、0.027、0.016 mg/kg，定量限分別為0.03、0.09和0.06 mg/kg。

表2 鄰氨基苯甲二酰胺類農藥的線性回歸方程、 相關系數、檢出限和定量限

2.4 方法的準確度和精密度試驗

以不含溴氰蟲酰胺、氟蟲雙酰胺和氯蟲苯甲酰胺的植物油樣品為本底，分別添加系列濃度的待測藥物標準溶液，進行回收率試驗，重復測定6次，計算平均回收率和相對標準偏差。結果見表3。方法回收率在70.1%～99.1%之間，同一目標物的平均回收率隨著添加濃度的增加而逐漸提高；相對標準偏差在3.0～9.7之間，在高的添加水平上，相對標準偏差更小，結果重復性更好。

表3 植物油樣品中鄰氨基苯甲二酰胺類農藥 的回收率和精密度(n=6)

2.5 實際樣品測定

應用本研究所建立的方法對市場上購買的10批菜籽油樣品進行檢測，結果在一批樣品中檢出氯蟲苯甲酰胺，檢出值為0.41 mg/kg，超過GB 2763中規定的最大殘留限量0.3 mg/kg。由圖3可見，在目標物質出峰前后沒有雜質峰干擾。

圖3 實際樣品色譜圖

3 結論

本研究將GPC凈化技術和液相色譜檢測技術相結合測定植物油中溴氰蟲酰胺、氟蟲雙酰胺和氯蟲苯甲酰胺等3種鄰氨基苯甲二酰胺類農藥殘留。各化合物測定低限均可達到0.1mg/kg；在質量濃度0.1～2mg/L之間線性關系良好，相關系數R均大于0.999 8；對于0.1、0.2、1 mg/kg 3個水平添加回收，回收率在70.1%～99.1%之間，相對標準偏差在3.0%～9.7%之間。該方法快速簡便、靈敏度高、凈化效果好，顯著地縮短了檢測時間，可應用于植物油中鄰氨基苯甲二酰胺類農藥的快速分析。

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Detection Technology of O-Amino Benzoic Diamide Pesticide Residues in Vegetable Oil

Zhang Yun1Chen Junyu2Chen Zeyu1Zhang Xinren1

(Sanming Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau1, Sanming 365000) (Dongshan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau2, Zhangzhou 363401)

A gel permeation chromatography (GPC)-liquid chromatography method was developed for the simultaneous determination of 3 kinds of o-amino benzoic diamide pesticide residues (cyantraniliprole, flubendiamide and chlorantraniliprole) in vegetable oil. O-amino benzoic diamide pesticide residues in vegetable oil extracted with cyclohexane and ethyl acetate mixture solution was purified by gel permeation chromatography system; acetonitrile and 0.1 mol/L ammonium acetate aqueous solution (58∶42) was taken as mobile phase to determine by the DAD detector and quantify by external standard method. The results showed that by using this method to determine 3 kinds of o-amino benzoic diamide pesticides, the limit of detection could achieved 0.1 mg/kg; the relative modular were better than 0.9998 for the standard curve concentration between 0.1～2 mg/L; the recoveries were between 70.1%～99.1% for 0.1, 0.2, 1 mg/kg add level; the relatively standard deviations (RSDs) were between 3.0%～9.7% with a good degree of precision.

vegetable oil，O-amino benzoic diamide，GPC，HPLC

O657.7

：A

：1003-0174(2017)08-0118-05