鐵冬青芽誘導和增殖的試驗初探

嚴榮斌++龐永容??

摘要：以3 a生鐵冬青莖段為外植體，探討不同培養基對鐵冬青芽誘導和增殖效果。結果表明：鐵冬青采用MS+6BA 1 ml/L+IAA 02 ml/L誘導，增殖培養基采用1/2MS+6BA 15 ml/L+IAA 05 ml/L，增殖系數為33。

關鍵詞：鐵冬青；誘導；增殖

中圖分類號：S792文獻標識碼：A文章編號：1004-3020（2017）04-0023-02

A Preliminary Study on the Induction and Proliferation of the Bud of Ilex

Yan RongbinPang Yongrong

（Yulin Forestry Research InstituteYulin537501）

Abstract： Using 3 year old stem segments of pig iron as explants， the effects of different media on the induction and proliferation of the buds were studied. The results showed that 0.2 ml/L was induced by MS+6BA 1 ml/L+IAA， the proliferation medium was 1/2MS+6BA 1.5 ml/L+IAA 0.5 ml/L， and the proliferation coefficient was 3.3.

Key words：Ilex rotunda；inducing；propagating

鐵冬青（Ilex rotunda），別名熊膽木、羊不食、七星香、萬紫千紅等。可入藥，常用于清熱解毒，消腫止痛；用于感冒，扁桃體炎，咽喉腫痛，急性胃腸炎，風濕骨痛；外用治跌打損傷，癰癤瘡瘍，外傷出血，燒燙傷，具有較高的藥用價值[1]。因樹體形態優美，花多且密集，常用作行道樹和庭院綠化[2]。鐵冬青的育苗用一般采用種子播種為主[3]，也有研究表明可以用扦插的方法培育[4]。本試驗探索鐵冬青的組織培養的可行性，便于鐵冬青的育苗生產。

1材料與方法

1.1試驗材料

玉林市林科所3 a生鐵冬青綠化苗，選取剛進入木質化且無病蟲害的枝條作為外植體。常規清理外植體表面后，在超凈工作臺進行滅菌消毒。消毒方法采用：75%乙醇處理15～20 s和01%升汞處理9～10 min，無菌水洗滌5～6次。裁剪腋芽未萌發莖段作為進行誘導芽的材料。

1.2誘導鐵冬青芽的培養基

以MS為基本培養基[5]，內含30 g/L蔗糖、3 g/L瓊脂，pH值58～59。分別設置不同質量濃度的細胞分裂素與生長素等進行培養（表1），把處理好的莖段接種于以上的培養基中。接種后的培養基均先常溫暗室培養24 h，再轉溫室培養。溫室培養環境溫度為23～25 ℃，每天12 h光照，光照強度為1 500～2 000 Lux。記錄芽的萌發時間和分化數量。

1.3鐵冬青繼代增殖的培養基

芽的繼代增殖設置不同質量濃度的無機鹽、細胞分裂素和生長素。當誘導的芽生長到2～4 cm時，剪切接種到繼代增殖培養基上，接種30 d后記錄數據。接種后的培養基均先常溫暗室培養24 h，再轉溫室培養。溫室培養環境溫度為23～25 ℃，每天12 h光照，光照強度為1 500～2 000 Lux。

1.4數據處理分析

采用Excel和SPSS18.0進行數據方差分析。

2結果與分析

2.1不同質量濃度的細胞分裂素和生長素對鐵冬青芽誘導的影響

誘導出的芽有單芽也有叢芽。不同質量濃度的6BA對芽的誘導也存在顯著差異。表1可見，1 mg/L 的6BA相對于其他濃度，可以在芽的萌發時間有較顯著的縮短，萌芽條數也有一定量的增殖，且芽的生長也較好。IAA對萌芽的生長有一定的影響，并沒有6BA效果明顯。在含6BA濃度為05 mg/L的情況下，增量的IAA只對萌芽條數有影響。不同含量的IAA在1 mg/L6BA下均可誘導芽的增殖。根據萌芽的生長狀況，處理6中的激素比在誘導芽的生長狀況上效果最好。

2.2繼代培養基中無機鹽和激素質量濃度對鐵冬青芽增殖的影響

在含不同質量濃度的無機鹽處理中，均有叢生芽產生。表2可見，處理C和處理F的增殖系數最高。1/2MS培養基中，含高濃度細胞分裂素和生長素的增殖系數有明顯差異。說明在低濃度的無機鹽培養基中提高激素含量可以影響芽的增殖。在MS培養基中，激素影響增殖效果并不顯著。說明在充足的無機鹽培養基中，激素含量并不是影響增殖的主要因素。綜合增殖芽的生長狀況，處理C和處理F均可以作為鐵冬青較好的繼代培養基，考慮生產成本的情況下，處理C的為最優。

3小結與討論

通過莖段誘導芽的培養基情況比較，得出6BA對芽誘導有主導作用，添加量以1 mg/L最為合適，IAA對芽產生能起一定的促進，表現為促進了芽的增殖。但6BA和IAA所用配比不同，導致分化芽的生長情況不同，在添加1 mg/L的6BA，IAA添加到02 mg/L為最佳。

高濃度的無機鹽培養基相對于質量濃度減半的培養基有較高的增殖系數。但在加入高濃度的細胞分裂素和生長素后，1/2MS和MS培養基的增殖差異就不顯著了。說明在1/2MS培養基中加入足量的激素可以促進增殖，可以達到增加無機鹽的質量濃度的效果。處理C和處理F的激素濃度：6BA 15+IAA 05的效果對芽的增殖有較好作用。

綜合本實驗結果，可得出鐵冬青芽誘導增殖培養的方案：選用帶芽莖段經過消毒后，裁切轉入芽的誘導培養基（處理1）上。待產生足夠量的芽，以這些無菌芽作為中間繁殖體，轉入繼代培養基（處理C）再進一步擴繁。由于本試驗僅對鐵冬青的芽誘導和繼代階段進行初步研究，得出的也僅為誘導和繼代較好的方案，對運用到實際生產中擴繁過程、生根階段具體培養基配方的配比，需要待進一步的研究。

參考文獻

[1]藥用植物圖像數據庫[DB]. 香港浸會大學中醫藥學院.http：//libproject.hkbu.edu.hk/was40/detail？lang=cn&record=1&channelid=1288&searchword=%28%E9%93%81%E5%86%AC%E9%9D%92%29&extension=all.

[2]中國科學院中國植物志編委會.中國植物志：第 45卷第二分卷[M].北京：科學出版社，1999：13.

[3]劉濟祥，朱培林.優良觀果樹種鐵冬青播種育苗試驗研究[J].中國林副特產，2008（3）：2829.

[4]溫美霞，黃焱輝，胡松竹.鐵冬青扦插繁殖技術研究[J].安徽農業科學，2010，38（18）：94239425.

[5]陳正華.木本植物組織培養及應用[M].北京：高等教育出版社，1986.3755.

（責任編輯：夏劍萍）endprint