玉玲花高效快繁技術研究

陳甜甜，馬 銘，王鋒祥，鄭福山

（1.萊蕪職業技術學院，山東 萊蕪 271100；2.山東興水水利科技產業有限公司，山東 濟南 250013；3.山東江河濕地生態研究院，山東 萊蕪 271100）

玉玲花高效快繁技術研究

陳甜甜1，馬 銘2，王鋒祥1，鄭福山3

（1.萊蕪職業技術學院，山東 萊蕪 271100；2.山東興水水利科技產業有限公司，山東 濟南 250013；3.山東江河濕地生態研究院，山東 萊蕪 271100）

以玉玲花莖段作外植體進行組培快繁，研究外源激素6-BA和NAA對玉玲花高效快繁的影響，找出玉玲花不定芽誘導、腋芽增殖和生根培養的最佳培養基配方。結果表明：玉玲花腋芽增殖最佳培養基配方為MS+6-BA2mg· L-1+NAA0.1mg·L-1，腋芽增殖數及增殖系數分別為478和3.19。腋芽增殖最佳培養基配方為MS+6-BA2mg·L-1+ NAA0.1mg·L-1，腋芽增殖數及增殖系數分別為478和3.19。生根培養最佳培養基配方為MS+6-BA0.4mg·L-1+NAA1.2mg· L-1，生根數、生根率和平均根長分別為39、86.67%和1.25。

玉玲花；高效快繁；不定芽誘導；腋芽增殖；生根誘導

玉玲花屬野茉莉科，野茉莉屬灌木或小喬木，主要分布于山東、浙江、江蘇和安徽等地，是城市及庭院綠化的主要樹種之一，市場需求量不斷擴大，但該樹種子外殼致密堅硬不易發芽，育苗難度大，限制了苗木供應，滿足不了市場需求。但是當前國內有關玉玲花莖段做外植體進行高效快繁的技術研究尚未見報道，因此，本試驗通過配比不同濃度外源激素研究其對玉玲花帶節莖段不定芽誘導、腋芽增殖和生根培養的影響，重在探究不定芽誘導、腋芽增殖和生根培養的最佳培養基配方，以期為玉玲花的高效快繁提供數據參考，為玉玲花的規模化育苗和組織培養提供技術支持。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試材料取自萊蕪職業技術學院試驗基地健壯無病植株，選取1年生玉玲花植株莖段。

1.2 試驗方法

（1）外植體滅菌。將長勢健壯、無病蟲害的玉玲花枝條浸泡于加有幾滴濃度0.02%的洗潔精溶液中10min，用自來水沖洗枝條10min，無菌濾紙吸干表面水分，75%的醫用酒精中浸泡30s，無菌水沖洗2～3次。以莖節為中心剪下長月1cm的莖段，用0.1%的HgCl2溶液消毒2～3min，無菌水沖洗2～3次。在超凈臺上用75%酒精消毒30s，無菌水沖洗2～3次，無菌濾紙吸干表明水分后接種備用。

（2）不定芽分化誘導試驗設計。以MS作基本培養基，添加不同濃度的6-BA和NAA，研究外源激素對玉玲花不定芽分化誘導的影響。每瓶接種3個莖段，每處理接種30瓶。接種后放置于光照箱進行培養，培養條件為：光照時間12h/d，光照強度2000lx，溫度（25±2）℃，pH值5.5～5.8（如表1所示）。

表1 不同濃度6-BA和NAA對不定芽誘導分化影響的試驗設計

（3）腋芽增殖試驗設計。選取長勢健壯、高度基本一致的腋芽，接種到添加有不同濃度NAA和6-BA的MS培養基中，每瓶接種5個芽，每處理接種30瓶，60d后測定腋芽增殖數與增殖倍數，觀察生長勢。接種后放置于光照箱進行培養，培養條件同上（如表2所示）。

表2 不同濃度6-BA和NAA對腋芽增殖影響的試驗設計

（4）生根培養試驗設計。選取高2～3cm、長勢一致的小苗，將其接種在生根培養中進行生根培養，每瓶接種3棵小苗，每處理接種15瓶，培養40d后測定生根數、生根率和平均根長。接種后放置于光照箱進行培養，培養條件同上。生根率=（生根的苗數/接種苗數）×100%；平均根長=根長之和/根數（如表3所示）。

表3 不同濃度6-BA和 NAA對生根培養影響的試驗設計

1.3 結果觀察及統計分析

記錄觀察結果，并運用Microsoft excel 2003軟件對數據進行統計分析。

2 結果與分析

（1）不同培養基與激素處理對不定芽誘導分化的影響。接種后每天觀察記錄外植體生長情況，14d后每2d觀察記錄1次。在接種后發現隨時間的增加，部分培養基中玉玲花莖段葉腋位置有淺綠色突起，隨后各處理外植體均陸續誘導出腋芽。培養60d后，6個處理均能使外植體誘導產生不定芽，但芽數和誘導率差異顯著，說明不同濃度和配比的6-BA和NAA對玉玲花莖段出芽誘導影響存在差異。由表4可知，在NAA濃度不變時，不定芽數量和誘導率在6-BA濃度0.5-1.5mg·L-1范圍內，隨其濃度的增加而增加，且以6-BA1.5mg·L-1+NAA0. 5mg·L-1處理下最高，分別為78.59和87.33%。在6-BA濃度一定時，不定芽誘導效果以NAA濃度0.5mg·L-1好于1.0mg· L-1。可見，玉玲花莖段作外植體進行不定芽誘導的最佳培養基配方為MS+6-BA1.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1。

表4 不同培養基與激素配比對不定芽誘導分化的影響

（2）不同濃度激素配比玉玲花腋芽增殖的影響。由表5可以看出，6-BA與NAA的配比有利于玉玲花腋芽增殖。在6-BA濃度相同時，高濃度的NAA較低濃度的不利于腋芽增殖；在1-3mg·L-1范圍內，腋芽增殖數及增殖系數隨6-BA濃度的增加呈現逐漸增加的趨勢，在6-BA濃度3 mg·L-1時，NAA3mg·L-1+NAA0.1mg·L-1處理腋芽增殖數及增殖系數分別為646和4.31，NAA3mg·L-1+NAA0.5mg·L-1分別為 593和3.96，雖然此時兩處理腋芽增殖數及增殖系數高于其他處理，但此時兩處理的莖尖有一半以上發生玻璃化現象，可見高濃度的 6-BA（3mg·L-1） 并不是最佳的腋芽增殖濃度。MS+6-BA2mg·L-1+NAA0.1mg·L-1處理下，腋芽生長健壯，簇生致密。綜合比較可知，玉玲花腋芽增殖的最佳培養基配方為MS+6-BA2mg·L-1+NAA0.1mg·L-1，腋芽增殖數及增殖系數分別為478和3.19。

表5 不同濃度激素配比對玉玲花腋芽增殖的影響

（3）不同濃度6-BA和NAA配比對組培苗生根效果的影響。由表6可知，不同激素濃度配比對玉玲花組培苗生根誘導效果影響不同，根條數在33～39，生根率在73.33%～86.67%，平均根長在0.75～1.25cm。6-BA濃度0.4mg·L-1的3個處理根條數、生根率和平均根長均對應高于6-BA濃度0.2mg·L-1的3個處理，說明6-BA濃度0.2-0.4mg·L-1是適宜玉玲花生根培養的濃度范圍；隨NAA濃度由0.4增加1.2mg·L-1時，根條數、生根率和平均根長同樣呈現逐漸上升的趨勢，說明在NAA濃度0.4-1.2mg·L-1是適宜玉玲花生根培養的濃度范圍。綜合表現以處理下，生根培養效果最好，所以玉玲花生根培養最佳培養基配方為MS+6-BA0.4mg·L-1+NAA1.2mg·L-1，生根數、生根率和平均根長分別為39、86.67%和1.25。

表6 不同濃度激素對組培苗生根效果的影響

3 結論與討論

細胞分裂素與生長素的濃度及配比對培養基中外植體芽的誘導和分化起決定作用。本研究認為，玉玲花莖段作外植體進行不定芽誘導的最佳培養基配方為MS+6-BA1.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1。洪森榮等研究認為，可通過調控細胞分裂素和生長素的濃度及比值來調控分化為芽或根，細胞分裂素/生長素的比值大時有利于芽的形成，本試驗不定芽誘導最佳激素配比的6-BA/NAA值較其他處理大，證實了這一論斷。

腋芽增殖是短時間獲取大量組培苗的有效途徑，而影響其增殖效果的關鍵因素是培養基中外源激素的濃度和配比。本研究結果表明，玉玲花腋芽增殖的最佳培養基配方為MS+6-BA2mg·L-1+NAA0.1mg·L-1。

遺傳基因決定植株生根能力，但外源激素和外界環境刺激可以通過影響其控制系統對生根能力產生影響。生長素的種類和濃度對植株的生根效果影響顯著。陸飛等研究認為在羅漢果生根誘導方面IBA優于NAA，并認為二者組合會增強生根誘導的生理功效。蔣小滿等對矮生一品紅組培苗生根誘導時，得出IBA0.2mg·L-1+NAA0.05mg·L-1可使生根率達到100%，且發根質量好。本研究認為，玉玲花生根效果最好的培養基配方為MS+6-BA0.4mg·L-1+NAA1.2mg·L-1，在該配方下發生快，根系健壯。可見，外源激素可使不同植物產生不同的生根效果，這可能是因為外源激素刺激了植物體內與生根有關酶的活性，或者是直接刺激了生根基因的表達。

［1］洪森榮，肖波，江靜.KT和NAA對鐵皮石解帶芽草段生長發育的影響［J］.江蘇農業科學，2012，（1）：55-56.

［2］陸飛，唐燕梅，韋鵬宵，等.不同激素組合對羅漢果‘桂青1號’生根誘導的影響［J］.中國園藝文摘，2013，（7）：3-5.

［3］蔣小滿，柏新富，趙建萍，等.矮生一品紅組培苗的生根誘導研究［J］.北方園藝，2003，（6）：62-63.

Study on High Efficiency and Rapid Propagation Technology of Yuling Flowers

CHEN Tian-tian1，MA M ing2，WANG Feng-xiang1，ZHENG Fu-shan3
（1.Laiwu Vocational and Technical College，Laiwu，Shandong 271100，China；2.Shandong Xingshui Water Conservancy Technology Industry Co.，Ltd.，Jinan，Shandong 250013，China；3.Shandong Rivers and Wetlands Ecology Research Institute，Laiwu，Shandong 271100，China）

The effects of exogenous hormones 6-BA and NAA on the rapid propagation of Yuling flowers were studied by using theexplantsofYuling flowersasexplants，whichaimsto findouttheoptimummedium formulaofadventitiousbudsinduction，axillary budsand rooting cultureofYuling flowers.The resultsshowed thattheoptimal medium for the proliferation of axillary buds was MS+ 6-BA2mgo L-1+NAA0.1mgo L-1，thenumberofaxillarybudsand themultiplication coefficientswere478and 3.19 respectively.The optimummedium foraxillarybud proliferationwasMS+6-BA2mgo L-1+NAA0.1mgo L-1，and thenumberofaxillarybudsand proliferation were 478 and 3.19 respectively.The optimum medium for rooting culture was MS+6-BA0.4 mg o L-1+NAA1.2 mg o L-1，rooting rate，rootingrateandaverage rootlengthwere39，86.67%and1.25 respectively.

Yuling flowers；efficient and rapid propagation；adventitious bud induction；axillary bud proliferation；rooting induction

S685.99

A

2095-980X（2017）06-0109-02

2016-05-14

萊蕪職業技術學院博士基金，萊蕪市現代農業發展資金2015-96號。

陳甜甜（1982-），女，博士，講師，主要從事分析化學研究工作。