深部熱療對(duì)AD離體細(xì)胞治療模式的探索及療效

陳劍虹 王小璞 農(nóng)海寧 鮑 晉 盧宜民

廣州中醫(yī)藥大學(xué)祈福醫(yī)院, 廣東 廣州 511495

深部熱療對(duì)AD離體細(xì)胞治療模式的探索及療效

陳劍虹 王小璞 農(nóng)海寧 鮑 晉 盧宜民*

廣州中醫(yī)藥大學(xué)祈福醫(yī)院, 廣東 廣州 511495

目的：探索深部熱療對(duì)AD離體細(xì)胞的最佳治療模式并評(píng)估治療效果。方法：制備離體AD細(xì)胞模型，隨機(jī)分成對(duì)照組、對(duì)照組熱療組、AD模型組、AD模型熱療組，分別置于41.5℃加熱30、45、60、75、90min，于600nm處測(cè)吸光度(A)值，計(jì)算最佳熱療時(shí)間。造模成AD細(xì)胞后置于41.5℃加熱60min，加熱后繼續(xù)置于37℃恒溫孵育24h，分別于加熱后2、4、8、12、24、72h取出，使用流式細(xì)胞儀行活細(xì)胞膜HSP70表達(dá)量，計(jì)算最佳熱療間隔時(shí)間。4組細(xì)胞熱療后分別加入20μmol/L的Aβ25-35溶液培養(yǎng)24h，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞活力，評(píng)估熱療治療AD效果。結(jié)果：對(duì)照組和AD模型組分別給予不同時(shí)間41.5℃熱療，兩組細(xì)胞從加熱60min開始細(xì)胞增殖趨勢(shì)與非加熱細(xì)胞相比開始下降(P<0.05)，這種下降趨勢(shì)在75min達(dá)到最大，確定細(xì)胞加熱的安全有效時(shí)間為60min，同時(shí)對(duì)照熱療組與AD模型熱療組對(duì)比，兩組細(xì)胞隨溫度變化的細(xì)胞增殖趨勢(shì)基本相同，兩者比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，表明兩組細(xì)胞的最佳熱療時(shí)間均為60min。AD模型組細(xì)胞在熱療后2、4、8、12、24及72h各時(shí)間段監(jiān)測(cè)的HSP70表達(dá)量均不同，AD細(xì)胞在24hHSP70表達(dá)量均達(dá)到最大值(P<0.05)，其后HSP70表達(dá)量開始下降，表明24h是最佳的熱療間隔時(shí)間。4組細(xì)胞與Aβ作用后加熱，MTT檢測(cè)表明4組細(xì)胞活力呈溫度依賴性上升趨勢(shì)(P<0.05)，表明熱療可有效的減少Aβ的聚集，促進(jìn)Aβ的清除，保護(hù)AD細(xì)胞。結(jié)論：深部熱療對(duì)AD離體細(xì)胞的最佳熱療時(shí)間為60min，最佳熱療間隔時(shí)間為24h，深部熱療可以有效的清除Aβ，促進(jìn)神經(jīng)元細(xì)胞修復(fù)。

深部熱療; AD; 離體細(xì)胞; 治療模式

阿爾茨海默病(Alzheimer Disease，AD)，是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性病，起病隱匿，以進(jìn)行性記憶力障礙、認(rèn)知障礙和精神異常為主要臨床特征的一種老年癡呆性疾病[1]。AD病理特征是神經(jīng)元細(xì)胞外液β蛋白(β-amyloid，Aβ)沉積形成神經(jīng)炎性斑，神經(jīng)元內(nèi)神經(jīng)纖維沉結(jié)以及海馬皮層區(qū)域神經(jīng)元的大量丟失[2]。近年來(lái)大量研究發(fā)現(xiàn)，AD患者顱腦內(nèi)神經(jīng)元中熱休克蛋白(Heat Shock Protein，HSP)表達(dá)較正常人明顯減少。神經(jīng)元細(xì)胞在加熱或其他損傷性刺激時(shí)會(huì)產(chǎn)生保護(hù)性的HSP，其中HSP70是中樞神經(jīng)系統(tǒng)含量最豐富的HSP，其具有抑制Aβ聚集，從而保護(hù)神經(jīng)元的作用[3]。……