漢中市豬口蹄疫定點監測結果分析

張智鵬孫世鐸

（1西北農林科技大學動物科技學院，陜西楊凌 712100；2漢中市動物疾病預防控制中心，陜西漢中 723000）

漢中市豬口蹄疫定點監測結果分析

張智鵬1,2孫世鐸1*

（1西北農林科技大學動物科技學院，陜西楊凌 712100；2漢中市動物疾病預防控制中心，陜西漢中 723000）

為了全面掌握陜西省漢中市生豬口蹄疫感染和免疫狀況，采用非結構蛋白ELISA和正向間接血凝試驗，對漢中市豬口蹄疫固定監測點的35個規模豬場和15個散養戶開展了感染抗體和免疫抗體的檢測。結果顯示，豬口蹄疫非結構蛋白抗體陽性率為0，O型豬口蹄疫個體合格率為89.9%，群體合格率為77.1%。結果表明，未發現豬口蹄疫病毒感染及帶毒情況，疫情形勢穩定；規模場的O型豬口蹄疫個體合格率和群體合格率均高于散養戶，差異極顯著 （＜0.01）；種豬的O型豬口蹄疫個體合格率及群體合格率最高，育肥豬最低，個體合格率差異極顯著 （＜0.01），群體合格率差異顯著 （＜0.05）；不同縣區的豬口蹄疫個體合格率差異顯著，個別豬場對口蹄疫免疫不夠重視，存在漏免、不及時補免、免疫劑量不足等問題，成為口蹄疫疫情發生的潛在風險。

口蹄疫；定點監測；分析

口蹄疫（Foot-and-mouth disease,FMD）是當前危害養豬業最嚴重的傳染病之一[1]，具有病毒血清型多、易變異、傳染性強、傳播快等特點[2]，給該病的防控及消滅造成了很大困難。口蹄疫病毒在全球分布范圍廣泛，許多國家時有發生[3]。據我國農業部官方發布統計，全國2011—2015年有13個省份共發生口蹄疫疫情42起，其中豬口蹄疫14起，O型和A型分別為11起和3起。每起疫情的發生都給當地養殖業造成巨大損失，并且對國際貿易和社會穩定影響巨大。因此世界動物衛生組織（OIE）將其列為必須報告的動物疫病，我國政府也將該病排在一類動物疫病的第一位[4]，充分顯示了國內外對口蹄疫的高度重視。

生豬養殖是陜西省漢中市農業主導產業，其飼養量和產值均占全省30%以上。隨著產業的發展，生豬引種、交易、流動頻繁，導致漢中市豬口蹄疫疫情形勢不容樂觀。為了全面掌握漢中市生豬口蹄疫感染和免疫狀況，漢中市動物疾病預防控制中心在全市選取有代表性的35個規模豬場和15個散養戶作為豬口蹄疫固定監測點，開展豬口蹄疫免疫抗體和感染抗體的檢測，以便準確了解全市生豬口蹄疫流行動態，科學評估疫情發生及傳播風險，為防控豬口蹄疫提供技術支撐。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

按照隨機抽樣的方式，在口蹄疫滅活苗免疫后30天左右，按照10%的可接受誤差、90%的置信度對規模豬場采集血液樣品，對散養戶則全部采樣。采集的血樣在室溫下自然凝固，數小時或過夜后，2 000轉/分鐘離心10分鐘，吸取上層血清于塑料離心管中，并按要求進行編號，-20℃保存待檢。共抽檢血清792份，其中規模場748份、散養戶44份。

1.2 檢測試劑

口蹄疫病毒NS抗體單抗阻斷ELISA試劑盒，批號為FMD20150825E，由北京世紀元亨動物防疫技術有限公司提供。

口蹄疫O型間接血凝抗體檢測試劑盒，批號為20160505201，由中國農科院蘭州獸醫研究所提供。

1.3 儀器設備

酶標儀，Multiskan FC，賽默飛世爾（上海）儀器有限公司；全自動洗板機，DNX-96，北京普朗新技術有限公司；電熱恒溫培養箱，DHP-9162，上海一恒科學儀器有限公司；超純水機，UPH-II-20T，成都超純水科技有限公司；移液器，20～200 μL，德國普蘭德公司；微量振蕩器，WZ-2A，北京海淀電子醫療器械廠；一次性吸頭、96孔110°V型血凝板等耗材均為國產。

1.4 檢測方法

免疫抗體檢測采用正向間接血凝試驗，感染抗體檢測采用非結構蛋白抗體ELISA方法，操作步驟按試劑盒使用說明書進行。

1.5 判定標準

正向間接血凝試驗：對照成立的情況下，血清抗體效價≥25判定為免疫合格。免疫合格個體數量占群體總數的70%（含）以上為免疫合格群體。

非結構蛋白抗體ELISA：對照成立的情況下，被檢血清的阻斷率Inh%≥30%，判為FMDV-NS抗體陽性；被檢血清的阻斷率20%≤Inh%＜30%，判為FMDV-NS抗體可疑；被檢血清的阻斷率Inh%＜20%，判為FMDV-NS抗體陰性。

1.6 數據處理

采用SPSS 20.0軟件對檢測數據進行統計分析，通過卡方檢驗（X2）分析差異顯著性， ＜0.05為差異顯著， ＜0.01為差異極顯著。

2 檢測結果

2.1 O型豬口蹄疫感染抗體檢測結果

檢測豬血清792份，其中35個規模豬場748份，15個散養戶44份，檢出口蹄疫病毒非結構蛋白抗體0份，陽性率為0，見表1。

2.2 O型豬口蹄疫免疫抗體檢測結果

2.2.1 不同飼養方式O型豬口蹄疫免疫抗體檢測結果

共檢測豬血清749份，合格抗體數673份，個體合格率和群體合格率分別為89.9%和77.1%。規模場的個體合格率和群體合格率均高于散養戶，分別高出46.3和52.9個百分點。散養戶的個體合格率遠低于國家規定的70%的標準。對兩種飼養方式的檢測結果進行卡方檢驗分析，差異極顯著（＜0.01），見表2。

2.2.2 不同生長階段O型豬口蹄疫免疫抗體檢測結果

表1 O型豬口蹄疫感染抗體檢測結果統計表

表2 不同飼養方式O型豬口蹄疫免疫抗體檢測結果統計表

種豬的個體合格率及群體合格率最高，育肥豬最低。不同生長階段的生豬個體合格率都超過國家規定70%的標準，但育肥豬的群體合格率較低，只有58.5%。不同生長階段的個體合格率差異極顯著（＜0.01），群體合格率差異顯著（＜0.05），見表3。

2.2.3 不同縣區O型豬口蹄疫免疫抗體檢測結果

7 個縣區中，城固縣的個體合格率和群體合格率最高，分別達到95.6%和100%；南鄭縣的個體合格率最低，為80.0%；洋縣的群體合格率最低，只有60.0%。檢測結果經卡方檢驗，各縣區間個體合格率差異極顯著（＜0.01），而群體合格率差異不顯著（＞0.05），見表4。

3 分析與討論

⑴檢測口蹄疫感染抗體時，采用的是非結構蛋白抗體ELISA方法。該方法具有操作簡便、靈敏度高等特點，但在實際應用中，由于口蹄疫滅活苗中存在極少量的非結構蛋白，家畜特別是種畜經多次免疫滅活苗后，可產生少量針對非結構蛋白的抗體，影響檢測結果，因此該試驗不能作為確診的方法[5]，僅可作為口蹄疫感染狀況監測的初篩試驗，陽性病例還需用RT-PCR方法進一步確診。本次檢測過程中，未檢出非結構蛋白陽性樣品，說明漢中市豬口蹄疫防控措施得力、效果明顯，疫情暴發的可能性較小。

⑵通過免疫抗體檢測結果可以看出，規模場的個體合格率比散養戶高46.3個百分點。主要原因是：規模場有嚴格的管理制度，并能根據本場及周邊的疫情狀況制定科學的免疫程序，實施程序化免疫，保證了豬群較高的抗體水平，降低了口蹄疫感染的風險。散養戶的飼養環境條件差，無消毒滅菌意識，僅免疫一次口蹄疫疫苗，以春秋兩季集中免疫為主，免疫抗體持續時間短、抗體水平差，點狀疫情風險較大。

從不同生長階段免疫抗體檢測分析結果看，種豬的個體合格率明顯高于保育仔豬和育肥豬，這是由于規模場非常重視種豬的飼養管理，加之飼養周期長，每年免疫3～4次，使種豬口蹄疫免疫抗體效價高、持續時間長。保育仔豬和育肥豬的個體合格率相差不大。據調查，除散養戶外，規模場的保育仔豬和育肥豬均經過了兩次免疫，個體合格率也超過了國家70%的標準，對防止口蹄疫大面積暴發起到了重要的作用。

從不同縣區免疫抗體檢測分析結果看，7個縣區的

表3 不同生長階段O型豬口蹄疫免疫抗體檢測結果統計表

表4 不同縣區O型豬口蹄疫免疫抗體檢測結果統計表

個體合格率均超過國家70%的標準，但縣區之間差異顯著，個體合格率最大相差15.6個百分點。洋縣、南鄭兩縣的個別規模場對口蹄疫免疫不夠重視，存在漏免、不及時補免、免疫劑量不足等問題，造成了免疫死角和免疫失敗，增大了口蹄疫感染的風險。

⑶本次監測中首次將群體合格率納入口蹄疫免疫效果評價指標。群體合格率是指在一定區域范圍內，個體合格率≥70%的養殖場數量占全部監測場數的百分比。與個體合格率相比，群體合格率更能代表某一地區養殖場的總體免疫情況，受監測場數和樣品大小的影響較小。由表4可以看出，個體合格率高的縣區其群體合格率不一定高，但群體合格率高的縣區大多數養殖場的合格率都能達到國家規定的標準。兩個評價指標是點與面的關系。因此，在開展口蹄疫免疫效果監測評價時，應將群體合格率作為一個重要指標，促進更多的養殖場重視口蹄疫免疫，提升口蹄疫整體免疫效果，防止豬口蹄疫疫情的發生。

[1]孫龍,齊海濤,粟碩,等.當前規模化豬場口蹄疫的防控[J].廣東飼料,2013,22(6):43-46.

[2]周錦萍,葛杰,鞠龔訥.口蹄疫的流行概況及防控策略[J].畜牧獸醫科技信息,2009(4):5-7.

[3]宋建德,袁麗萍,秦建國,等.全球口蹄疫流行和防控狀況[J].中國動物檢疫,2015,32(8):13-18.

[4]劉在新.全球口蹄疫防控技術及病原特性研究概觀[J].中國農業科學,2015,48(17):3547-3564.

[5]趙建東,衛陸梅,孟春萍,等.3ABC-ELISA檢測口蹄疫野毒抗體時效性研究[J].中獸醫醫藥雜志,2013(5):21-23.

S851.3

：A

：1673-4645(2017)08-0064-03

2017-04-18

陜西省農業科技創新轉化資金項目（陜農業計財〔2015〕155號）

張智鵬（1977-），男，陜西城固人，碩士，高級獸醫師，執業獸醫師，主要從事動物疫病防控及畜牧技術推廣工作，E-mail：275813255@qq.com

*通訊作者：孫世鐸（1960-），男，陜西大荔人，博士，教授，博士生導師，主要從事動物遺傳育種與繁殖研究，E-mail：ssdsm@tom.com