超高效液相色譜串聯質譜法測定雞肉中噻節因殘留

田 海，馮玉潔，張艷玲，王明月，李 瓊，羅金輝

（1.中國熱帶農業科學院 分析測試中心/海南省熱帶果蔬產品質量安全重點實驗室，?？?571101；2.海南省農業科學院 植物保護研究所，?？?571101）

◆環境與殘留◆

超高效液相色譜串聯質譜法測定雞肉中噻節因殘留

田 海1，馮玉潔2，張艷玲1，王明月1，李 瓊1，羅金輝1

（1.中國熱帶農業科學院 分析測試中心/海南省熱帶果蔬產品質量安全重點實驗室，海口 571101；2.海南省農業科學院 植物保護研究所，?？?571101）

建立雞肉中噻節因的超高效液相色譜串聯質譜（UPLC-MS/MS）殘留測定方法。雞肉樣品選用乙腈提取，采用UPLC-MS/MS多反應模式（MRM）進行分析測定。噻節因添加質量在0.2～10 μg范圍內，方法平均回收率為87.6%～101.6%，相對標準偏差為2.44%～5.90%。方法的最小檢出量為0.005 mg/L，最低檢測濃度為0.01 mg/kg。該方法簡單、準確，重復性較好，適用于禽蛋中噻節因的殘留檢測。

噻節因；雞肉；超高效液相色譜串聯質譜；殘留；檢測

噻節因（dimethipin），化學名稱2,3-二氫-5,6-二甲基-1,4-二噻因-1,1,4,4-四氧化物，分子式C6H10O4S2，相對分子質量210.3，ADI值為0.02 mg/kg（JMPR，2014）。噻節因屬于植物生長調節劑，可使玉米、苗木、橡膠樹和葡萄落葉，促進植物成熟并能降低收獲后水稻和向日葵種子的含水量。施用后，其能夠抑制植物蛋白質合成，對蛋白質合成的抑制作用比放線菌酮的活性高10倍。噻節因加速植株自然衰老過程，而不是誘導衰老[1]。

噻節因具有中等毒性，長期使用可能會對生態和食品安全產生較大風險[2]。美國環保署（EPA）將噻節因歸為可能的人類致癌物[3]；目前歐盟禁止噻節因在農作物上使用。國際食品法典委員會（CAC）、美國、日本等國家或組織制定了食品中噻節因的最大殘留限量（MRLs）[4]。其中，CAC規定雞肉中噻節因的最大殘留限量為0.01 mg/kg。我國食品安全國家標準（GB 2763—2014）也制定了噻節因在馬鈴薯、葵花籽、棉籽油等農產品中的最大殘留限量，雞肉中噻節因最大殘留限量值正在制定中。

關于噻節因的檢測方法，目前主要有氣相色譜法、氣質聯用法、液質聯用法等[2,5-9]。本研究采用超高效液相色譜串聯質譜法檢測雞肉中噻節因殘留，方法具有操作簡便、快捷，靈敏度、準確度和精密度高的特點，可用于食品安全、環境監測等領域。本研究可為農產品質量安全監測及評價提供支持。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

超高效液相色譜儀（Acquity H-CLASS），美國Waters公司；質譜系統（API 4000），美國AB SCIEX公司；Acquity UPLC BEH C18色譜柱（50 mm×2.1 mm，1.7 μm），美國Waters公司；高速離心機（Anke GL-10C），上海安亭科學儀器廠；XW-80旋渦混合器，美國Scientific Industries公司；Milli-Q超純水機，德國Millipore公司。

噻節因標準品（99.0%），德國Dr.Ehrenstorfer公司；甲醇、乙腈（色譜純），美國Fisher公司；水為超純水。

1.3 前處理方法

稱取雞肉樣品20 g于100 mL離心管中，加入乙腈40 mL，搖勻后振蕩提取30 min，5 000 r/min離心5 min，轉移上清液至裝有5 g氯化鈉的離心管中，劇烈振蕩2 min后靜置30 min，取有機相20 mL旋轉蒸發近干，用甲醇＋水（體積比3∶2）定容至2 mL，過0.22 μm濾膜，進行UPLC-MS/MS分析。

1.4 色譜條件

色譜柱：Acquity UPLC BEH C18色譜柱（50 mm×2.1 mm，1.7 μm）；柱溫：35℃；流動相：乙腈＋5 mmol乙酸銨水溶液，梯度洗脫（見表1）；流速：0.15 mL/min；進樣量：10.0 μL。

表1 梯度洗脫表

1.2 基質標樣溶液的配制

稱取適量噻節因標準品用甲醇溶解配制成母液，移取適量母液至容量瓶，氮氣吹干，用空白樣品提取液定容成質量濃度分別為0.005,0.01,0.05, 0.1,0.5 mg/L系列標樣溶液，混勻后放入4℃冰箱保存備用。

1.5 質譜條件

離子源：電噴霧離子源ESI；掃描方式：負離子源；檢測方式：多重反應監測（MRM）；碰撞氣：0.04 MPa；氣簾氣：0.137 MPa；霧化器Gas 1：0.345 MPa；霧化器Gas 2：0.345 MPa；離子噴霧電壓：-4 500 V；離子源溫度：600℃。噻節因母離子（m/z）209、子離子（m/z）91（定量離子）、子離子（m/z）161（定性離子），碰撞能量分別為14.34 V、28.91 V、22.83 V，錐孔電壓為66.80V。噻節因保留時間為1.74min，色譜圖見圖1。

圖1 標準品、CK樣品、樣品添加色譜圖

2 結果與分析

2.1 噻節因標準曲線

在質量濃度為0.005～0.5 mg/L范圍內，采用上述色譜操作條件，對1.2中配制的系列標樣溶液進行測定，并以噻節因標樣溶液質量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標作標準曲線。噻節因線性方程為y=4.77×105x-2.66×103，相關系數（R2）為0.999 9。

2.2 回收率、精密度與檢出限

在空白樣品中分別加入0.2 μg、1.0 μg、10.0 μg噻節因標準品，每個添加濃度重復測定5次取平均值，得到噻節因的添加回收率、最小檢出量（LOD）、最低檢測濃度（LOQ）、相對標準偏差（RSD）值，見表2。

表2 噻節因在雞肉中的添加回收率、相對標準偏差

3 結論

本文研究建立了雞肉中噻節因殘留的UPLCMS/MS方法。噻節因在雞肉中的平均回收率為87.6%～101.6%，相對標準偏差為2.44%～5.90%，LOD值為0.005 mg/L，LOQ值為0.01 mg/kg。研究結果表明，方法的靈敏度、準確度、精密度均能滿足農藥殘留分析要求，該方法雜質干擾小，有良好的線性，可廣泛用于禽蛋中噻節因的殘留檢測。

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[9]董靜,潘玉香,秦亞萍,等.程序升溫大體積進樣氣相色譜-負化學離子源質譜法測定白菜和蘋果中103種農藥殘留 [J].色譜, 2010,28(7):1186-1195.

（責任編輯：顧林玲）

Determination of Dimethipin Residues in Chicken by Ultra-High Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

TIAN Hai1,FENG Yu-jie2,ZHANG Yan-ling1,WANG Ming-yue1,LI Qiong1,LUO Jin-hui1
(1.Analysis and Test Center,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences/Hainan Provincial Key Laboratory of Quality and Safety for Tropical Fruits and Vegetables,Haikou 571101,China;2.Institute of Plant Protection,Hainan Academy of Agricultural Science,Haikou 571101,China）

A method for determination of dimethipin residues in chicken by ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS)was established.The chicken samples were extracted by acetonitrile,then analyzed by UPLC-MS/MS under the multiple reaction monitoring(MRM)mode.The average recoveries ranged from 87.6%to 101.6%with the relative standard deviations(RSD)of 2.44%-5.90%when the fortified concentrations were 0.2-10 μg.The limit of detection was 0.005 mg/L,and the limit of quantification was 0.01 mg/kg.This method was simple,accurate,and was suitable for determination of dimethipin residues in chicken samples．

dimethipin;chicken;UPLC-MS/MS;residue;determination

TQ 450.2＋63

A

10.3969/j.issn.1671-5284.2017.04.012

2017-04-18

田海（1986—），男，助理研究員。研究方向：農藥殘留與農產品質量安全。E-mail：tianhai666@163.com