P16和Ki—67在宮頸鱗癌癌前病變中的表達及其診斷價值分析構架

王曉平

[摘要] 目的 探討Ki-67與P16這兩項免疫組化細胞增殖標志指數在宮頸鱗癌癌前病變中的具體表達，分析其架構，并驗證其所具有的診斷價值。 方法 擇取2011年11月～2016年11月期間于筆者所在醫院行宮頸癌篩查的90例受檢對象，其中包括30例健康受檢者，30例宮頸鱗狀上皮內瘤變患者以及30例宮頸鱗癌患者，分別命名為A組、B組與C組。為三組受檢者給予免疫組化檢測，分析各組的Ki-67與P16表達。 結果 就Ki-67與P16的陽性表達率而言，C組>B組>A組，CIN（Cervical Intraepithelial Neoplasia，宮頸上皮內瘤變）Ⅲ>CIN Ⅱ >CIN Ⅰ，病變越嚴重，陽性表達率越高，且C組、B組分別與A組比較，差異有統計學意義（P<0.05）。 結論 Ki-67與P16陽性表達率與患者宮頸組織病變程度輕重有較為密切的聯系，臨床可以根據Ki-67與P16的表達結果來鑒別患者宮頸組織的病變程度，給予患者準確的診斷。

[關鍵詞] P16；Ki-67；宮頸鱗癌癌前病變；表達；診斷價值

[中圖分類號] R737.33 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2017）14-203-03

Expression of P16 And Ki-67 in precancerous lesions and its diagnostic value in cervical squamous cell carcinoma

WANG Xiaoping

Department of Gynaecology，Dongguan Huangjiang Hospital，Dongguan 523400，China

[Abstract] Objective To investigate the expression of Ki-67 and P16 immunohistochemical markers in precancerous lesions of cervical squamous cell carcinoma，and to analyze their structure and verify their diagnostic value. Methods 90 patients with cervical cancer screening in the hospital from November 2011 to November 2016 were enrolled，including 30 healthy subjects 30 patients with cervical squamous intraepithelial neoplasia，and 30 patients with cervical squamous cell carcinoma，they were named group A，group B and group C，respectively.The expression of Ki-67 and P16 in each group was analyzed by immunohistochemistry. Results The order of positive rate of Ki-67 and P16 was group C>B>A group，CIN Ⅲ>CIN Ⅱ>CIN Ⅰ，and the more serious the lesion，the higher the positive expression rate.Compared group B and group C with group A，the differences were statistically significant （P<0.05）. Conclusion Ki-67 and P16 positive expression rate has a more closely link with the severity of cervical lesions in patients.The expression of Ki-67 and P16 can be used to identify the degree of cervical tissue and provide accurate diagnosis.

[Key words] P16；Ki-67；Precancerous lesions of cervical squamous cell carcinoma；Expression；Diagnostic value

宮頸癌從發生到發展都呈現出漸進性的演變過程，所耗費的時間少則數年，多則數十年，常規檢測難以得到準確診斷結果，臨床需要選用Ki-67與P16等作為免疫組化指標，借此對患者宮頸組織的病變程度給予明確鑒別，以實現對宮頸癌的有效預防[1-2]。本文選擇2011年11月～2016年11月期間于本院接受宮頸癌篩查的90例受檢者，試分析Ki-67與P16的表達以及其所具有的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

擇取2011年11月～2016年11月期間于筆者所在醫院行宮頸癌篩查的90例受檢對象，其中包括30例健康受檢者，30例宮頸鱗狀上皮內瘤變患者以及30例宮頸鱗癌患者，分別命名為A組、B組與C組。對比三組受檢者的基本資料：（1）A組：年齡22～58歲，平均（40.1±8.4）歲；B組：年齡23～57歲，平均（40.3±8.4）歲；CIN Ⅲ患者11例、CIN Ⅱ患者10例、CIN Ⅰ患者9例；C組年齡22～57歲，平均（40.2±8.4）歲；淋巴結轉移患者16例，淋巴結無轉移患者14例；組織學分級：Ⅰ級13例，Ⅱ級9例，Ⅲ級8例。三組受檢者的一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究已獲得倫理委員會批準。

1.2 方法

使用SP法為所有受檢對象進行免疫組化檢測，按照試劑盒說明書進行嚴格操作，將取自受檢者體內的宮頸上皮標本先浸入10%甲醛溶液中，隨后依次給予如下操作：脫水→透明→浸臘→石蠟包埋→切片（厚度為4?m）→HE染色，在光鏡下觀察標本的細胞形態，給予病理診斷并按照診斷結果分組。為標本染色，選擇陽性片，對其進行Ki-67與P16的陽性對照；使用磷酸鹽緩沖液作為一抗的代替，繼續作陰性對照。注：試驗所用材料-Ki-67、P16鼠抗人單克隆抗體與SP超敏試劑盒均購自福州邁新生物公司，產品標準編號為YZB/閩榕0071-2013。

1.3 觀察指標

對比三組受檢者的Ki-67、P16陽性表達率，尤其是B組中CIN Ⅰ～Ⅲ患者Ki-67、P16陽性表達率。Ki-67的陽性表達判定標準為：細胞核與細胞質均呈棕黃色，或是在細胞核與細胞質中發現棕黃色的顆粒，使用光鏡進行高倍視野觀察，可發現4區計數約在200個左右。若是細胞未著色，則為陰性（-）；若是陽性細胞染色率不足10%，則為弱表達（+）；若是陽性細胞染色率在10%～30%之間，則為中陽性（++）；若是陽性細胞染色率高于30%，則為強陽性（+++）[3-4]。

P16的陽性表達率判定標準為：在細胞核與細胞質中發現有黃棕色或棕褐色的顆粒。若為單個細胞染色且陽性細胞數不足5%，則為陰性（-）；若為分散狀細胞團染色且陽性細胞數在5%～24%之間，則為弱陽性（+）；若為片狀細胞染色且陽性細胞數在25%～50%之間，則為中陽性（++）；若為彌散狀細胞染色且陽性細胞數多于50%，則為強陽性（+++）[5-6]。

1.4 統計學方法

參與實驗的患者其臨床檢測所得數據均行統計學軟件包SPSS進行檢驗。陽性表達率等計數資料采用百分數表示，采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 P16的陽性表達率

P16陰性表達率從高到低分別為：A組>B組CIN Ⅰ患者>B組CIN Ⅱ患者>B組CIN Ⅲ患者>C組；陽性表達率則與之相反，A組與其他幾組之間比較差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 Ki-67的陽性表達率

Ki-67陰性表達率從高到低分別為：A組>B組CIN Ⅰ患者>B組CIN Ⅱ患者>B組CIN Ⅲ患者>C組；陽性表達率則與之相反，A組與其他幾組比較，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

宮頸癌是一種常見女性生殖系統惡性腫瘤，鱗狀細胞癌是其組織學類型中最為常見的一種，患者通常起病于宮頸鱗狀上皮內部出現瘤變，隨后持續不斷地發展，最終形成浸潤性癌[7-8]。宮頸癌按照不同病理表現可以分為鱗癌、腺癌、鱗腺癌。其中腺癌可分為黏液腺癌與惡性腺瘤；鱗癌按照組織分化程度可以分為高分化鱗癌、中分化鱗癌以及低分化鱗癌；鱗腺癌則包括上述兩種表現。宮頸鱗癌癌前病變是指鱗癌發生前在宮頸處發生的病變，由此而引發的宮頸癌前病變即為CIN Ⅲ。由于宮頸癌與其他一般性惡性腫瘤一樣，在發展上較為較為緩慢，初期表現并不明顯，大多數患者無法在癌前病變階段得到準確的診斷結果，因此許多患者錯失最佳治療時機，無法治愈疾病，只能在中晚期接受化療或放療，以延長生存期限。對此，臨床嘗試從基因蛋白等其他角度進行探尋新的道路，以提高宮頸癌的早期篩選率。

從惡性腫瘤的發生來看，細胞增殖失控是最為主要的原因，而P16作為細胞增殖指數之一，同時也是調控細胞增生狀況的主要基因，調控細胞是其固有的功能；Ki-67則可以反映出細胞群的增殖活性，決定了正常細胞周期中抗原決定簇是被迅速降解還是徹底失去，同樣是重要的癌癥標志物[9-10]。關于P16、Ki-67與宮頸癌變、癌前病變的關系，叢玲華、左云海等人均在各自的研究中有所提及，即：宮頸上皮腫瘤在發生與發展上源于P16、Ki-67等基因蛋白發生了變化，其表皮生長因子受體在蛋白酪氨酸激酶的影響下傳導原癌基因的信號、調控細胞周期，這種基因蛋白的表達一般會隨著宮頸病變的不斷加重而持續增加，其陽性率會隨著CIN等級的增加而增加[11-15]。而本研究結果中健康受檢者、CIN Ⅰ～Ⅲ患者以及宮頸癌患者的陽性表達率分布特點恰好與上述研究結論相符，即宮頸癌前病變越嚴重的患者，其P16、Ki-67基因蛋白改變越明顯，陽性率也就越高。因此臨床可以將P16與Ki-67作為診斷宮頸組織是否發生癌變的主要指標，在宮頸鱗癌癌前病變的診斷中，更是可以借由這兩項指標陽性率的高低來鑒別患者的病變處于CIN Ⅰ～Ⅲ的具體哪一階段，也由此可見這兩項指標在宮頸癌癌前病變中所具有的顯著臨床診斷價值。

鱗癌乃宮頸癌常見組織類型，CIN Ⅲ乃是鱗癌發生前最為嚴重的癌前病變階段，也是治愈患者最后的治療時機，臨床可以借由檢驗患者在P16、Ki-67上的不同陽性表達率來鑒別與診斷患者的病變程度，以實現對宮頸癌的有效篩查。

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（收稿日期：2017-03-06）