微柱凝膠技術用于新生兒溶血病檢測中的價值分析

任俊

[摘要] 目的 對微柱凝膠技術用于新生兒溶血病（HDN）檢測中的價值進行探討分析。方法 選取本中心2013年1月～2017年1月期間收集的80份HDN患兒血液標本，以此作為本次研究的觀察對象，使用傳統試管法和微柱凝膠技術分別進行抗體放散試驗、抗體游離試驗及直接抗人球蛋白試驗，對所取得了檢測結果進行對比。結果 通過對80份HDN患兒血液標本的檢測，采用試管法進行抗體放散試驗檢測出67份（83.75%）呈陽性，進行抗體游離試驗檢測出62份（77.50%）呈陽性，進行直接抗人球蛋白試驗檢測出54份（67.50%）呈陽性，而采用微柱凝膠技術進行抗體放散試驗檢測出76份（95.00%）呈陽性，進行抗體游離試驗檢測出72份（90.00%）呈陽性，進行直接抗人球蛋白試驗檢測出70份（87.50%）呈陽性，試管法和微柱凝膠技術在三種試驗中的檢測陽性率差異具有統計學意義（P<0.05）。結論 臨床針對新生兒溶血病可采用微柱凝膠技術進行檢測，其具有較高的敏感性，結果穩定、操作簡單，能為臨床治療提供有利依據，具有較高的臨床應用價值，值得推廣使用。

[關鍵詞]新生兒溶血病；微柱凝膠技術；檢測價值

[中圖分類號] R722.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2017）14-49-03

Value analysis of microcolumn gel technique in detection of hemolytic disease of the newborn

REN Jun

Machine Generated Branch， Guangzhou Blood Center， Guangzhou 510095， China

[Abstract] Objective To explore the value of microcolumn gel technique for hemolytic disease of the newborn （HDN）. Methods 80 HDN children with blood samples from January 2013 to January 2017 in our center were collected as the research object of the observation. The traditional tube method and microcolumn gel technique were used to perform antibody elution test， free antibody test and direct antiglobulin test respectively. The test results were compared. Results Among the HDN of 80 children with blood samples for antibody detection， elution test detected 67 samples by test tube method （83.75%）. Positive antibody free test showed 62 （77.50%） were positive. For direct antiglobulin test， 54 samples （67.50%） were positive， while using microcolumn gel technique for antibody elution test，76 samples （95%） were positive. For antibody free test detected 72 copies （90%） positive. Direct antiglobulin test detected 70 samples （87.50%） were positive in the test tube method and microcolumn gel technique in three test in the detection positive rate difference （P<0.05）. Conclusion The clinical for hemolytic disease of the newborn can be used Micro column gel technology for detection. It has high sensitivity， stable results， and simple operation. It can provide a favorable basis for clinical treatment. It has high clinical value. It is worthy of popularization and application

[Key words] Hemolytic disease of the newborn； Microcolumn gel technique； Detection value

新生兒溶血病是指由于母嬰血型不合，母親體內產生與胎兒血型抗原不配的血型抗體，這種抗體通過胎盤進入到胎兒體內引起同族免疫性溶血，母嬰Rh血型系統和ABO血型系統的血型不合是導致新生兒溶血病的主要原因[1-2]。其臨床常表現為黃疸、貧血及核黃疸等，嚴重影響到患兒的生活質量及生長發育，甚至危及患兒生命安全，因此臨床及早診斷治療十分關鍵[3]。臨床對HDN的診斷主要是通過血型血清學實驗進行，而傳統的檢測方法主要是采用試管法，但其檢測時間長、步驟繁雜等缺點會對患兒病情檢測造成不利影響[4]。微柱凝膠技術是近年來開展的新型檢測技術，諸多研究證實其比傳統試管法更具優勢，在新生兒溶血病檢測中逐漸應用廣泛[5]。本研究亦對微柱凝膠技術在新生兒溶血病中的檢測價值進行探討分析，現將具體情況報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用隨機抽選法從本中心2013年1月～2017年1月期間收集的80份HDN患兒血液標本，以此作為本次研究的觀察對象，使用傳統試管法和微柱凝膠技術分別進行抗體放散試驗、抗體游離試驗及直接抗人球蛋白試驗。其中80份血液標本分別來自80例患兒，其中包括男43例，女37例；年齡0.5～7d，平均（3.8±1.2）d；病程8～76h，平均（42±14）h；患兒血型A型和B型均為40例，母親均為O型血，Rh均為陽性。患兒主要表現為黃疸、貧血等癥狀。所有患兒均符合HDN診斷標準確診為HDN患兒。

1.2 檢測方法

使用儀器為FYQ免疫微柱孵育器、TD-3A型血型血清學多用離心機（長春博研科學儀器有限責任公司）、日本久保離心機及恒溫水浴箱。在鑒定新生兒及其母親ABO和Rh血型后，分別采用試管法和微柱凝膠技術進行抗體放散試驗、抗體游離試驗及直接抗人球蛋白試驗三種試驗。

試管法：將患兒的血液樣本的血清和紅細胞進行離心分離，采用0.9%氯化鈉溶液將紅細胞進行3次清洗并配成5%濃度的懸液。取2滴廣譜抗人球蛋白試劑加1滴懸液進行離心處理，對直接抗人球蛋白試驗的結果進行觀察。取3支試管標記A、B、O血型，在每支試管中放入2滴放散液和患兒的血清，并對應血型放入1滴相應的紅細胞，在37℃的溫度中孵育1h后采用0.9%氯化鈉溶液將紅細胞進行3次清洗，然后放入2滴抗人球蛋白試劑進行離心處理，對抗體放散試驗、抗體游離試驗的結果進行觀察。

微柱凝膠技術：采用0.8%氯化鈉溶液將紅細胞進行3次清洗，取50μL加入凝膠卡中并進行離心處理，對直接抗人球蛋白試驗的結果進行觀察。取放散液和患兒血清50μL分別加入凝膠卡中，并按照標記血型對應加入紅細胞懸液，在37℃的溫度中孵育15min后離心處理10min，對抗體放散試驗、抗體游離試驗的結果進行觀察。

1.3 統計學處理

本研究數據采用SPSS19.0進行統計學處理，計量資料以（）表示，采用t檢驗，計數資料采用百分比（%）表示，采用χ2檢驗。P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

通過對80份HDN患兒血液標本的檢測，采用試管法進行抗體放散試驗檢測出67份（83.75%）呈陽性，進行抗體游離試驗檢測出62份（77.50%）呈陽性，進行直接抗人球蛋白試驗檢測出54份（67.50%）呈陽性，而采用微柱凝膠技術進行抗體放散試驗檢測出76份（95.00%）呈陽性，進行抗體游離試驗檢測出72份（90.00%）呈陽性，進行直接抗人球蛋白試驗檢測出70份（87.50%）呈陽性，試管法和微柱凝膠技術在三種試驗中的檢測陽性率差異明顯（P<0.05）。

詳見表1。

3 討論

HDN是指由于母嬰血型不合，母親體內產生與胎兒血型抗原不配的血型抗體，這種抗體通過胎盤進入到胎兒體內引起同族免疫性溶血，母嬰Rh血型系統和ABO血型系統的血型不合是導致新生兒溶血病的主要原因，而在這兩種血型系統中以ABO血型系統的血型不合引起HDN最為常見[6-7]。

臨床對HDN的診斷主要是通過血型血清學實驗進行，傳統檢測HDN的方法主要是采用試管法進行檢測，但由于試管法操作步驟繁多，耗時較長，重復性較差且靈敏度低，使其不利于對結果的判斷，容易出現漏檢情況，導致試管法在臨床應用性不高[8-10]。

近年來隨著微柱凝膠技術的開展，引起了臨床學者們的重視，在經過諸多研究之后其檢測效果受到廣泛認同，并逐漸在臨床開始推廣[11-12]。相關研究顯示，微柱凝膠技術在HDN的檢測中具有靈敏度高、操作簡單、重復性好的特點，其檢測穩定，能夠準確的對結果進行判斷，對患兒血液中免疫性IgG抗體和效價能夠更準確的檢測[13-15]。

本研究通過對本中心2013年1月～2017年1月期間收集的80份HDN患兒血液標本進行研討，使用傳統試管法和微柱凝膠技術分別進行抗體放散試驗、抗體游離試驗及直接抗人球蛋白試驗，結果顯示，對80例HDN患兒血液樣本的檢測后，采用試管法進行抗體放散試驗檢測出67份（83.75%）呈陽性，進行抗體游離試驗檢測出62份（77.50%）呈陽性，進行直接抗人球蛋白試驗檢測出54份（67.50%）呈陽性，而采用微柱凝膠技術進行抗體放散試驗檢測出76份（95.00%）呈陽性，進行抗體游離試驗檢測出72份（90.00%）呈陽性，進行直接抗人球蛋白試驗檢測出70份（87.50%）呈陽性，試管法和微柱凝膠技術在三種試驗中的檢測陽性率差異明顯。

可看出微柱凝膠技術的三種試驗檢測出陽性率顯著高于試管法，充分證明了其臨床檢測效果。結果還顯示，抗體放散試驗是敏感度最高的試驗，可用于HDN檢測中的確診。而直接抗人球蛋白試驗靈敏度最低，可能是由于新生兒ABO抗原的發育還不完全，抗原位點少，不能與抗人球蛋白產生明顯凝集反應，有足夠IgG抗體分子的紅細胞又大部分被溶解。

綜上所述，臨床在新生兒溶血病的檢測中可采用微柱凝膠技術進行檢測，其敏感度高，操作簡單方便，能有效為溶血病患兒的治療提供準確、有利的依據，具有較高的臨床應用價值，值得推廣使用。

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（收稿日期：2017-04-14）