飼料霉菌毒素脫霉劑產品有效性評價

王金全劉杰楊凡呂宗浩

（1中國農業科學院飼料研究所，2生物飼料開發國家工程研究中心，3中國—歐盟飼料霉菌毒素脫毒技術聯合實驗室，北京100081）

飼料霉菌毒素脫霉劑產品有效性評價

王金全1,2,3劉杰1楊凡1呂宗浩1

（1中國農業科學院飼料研究所，2生物飼料開發國家工程研究中心，3中國—歐盟飼料霉菌毒素脫毒技術聯合實驗室，北京100081）

分別介紹了飼料霉菌毒素吸附劑對黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮以及嘔吐毒素三種霉菌毒素的吸附有效性評價方法。認為評價霉菌毒素吸附劑產品有效性時，檢測方法應因毒素而異，體內、體外相結合。

霉菌毒素；吸附劑（脫霉劑）；有效性；評價

由于飼料中霉菌毒素污染情況復雜，不同的霉菌毒素其化學結構和生物學特性完全不一樣，造成霉菌毒素吸附劑對飼料中毒素的吸附能力差異很大。另外，在評價脫霉劑產品在動物體內對毒素的吸附效果時，除了觀測生產、繁殖性能之外，生物標記物（Biomarker）是主要的評價指標。因此，在探討霉菌毒素吸附劑產品有效性評價方法的時候，應該按照毒素不同而檢測方法不同的原則，采取體內、體外相結合的方法，制定相對應的評價體系。

表1 反應體系設置

1 飼料霉菌毒素吸附劑對黃曲霉毒素B1（AFB1）的吸附有效性評價方法

附率在90%以上，才是合格的AFB1脫霉劑產品。同時，對蒙脫石產品中蒙脫石含量（X-光衍射測定）、長石和蛋白石含量以及方解石含量進行了規定，分別為大于70%、小于10%和小于4%，見表2。

1.1 對黃曲霉毒素吸附能力評價

吸附率%=1.0-[（吸附樣品峰面積-無毒素對照峰面積）/霉菌毒素標準液峰面積]×100%。

參考：如表1所述條件下，篩選吸附劑原料時，被檢測吸附劑對AFB1吸附率在pH 3.0條件下應該達到95%以上，在pH 6.5條件下達到80%以上。

歐盟方法（供參考）：AFB1濃度4 000 ppb，脫霉劑用量0.02%，在pH 5.0緩沖溶液體系中，37℃搖床震蕩反應1 h，高效液相色譜測定毒素峰面積，要求吸

1.2 動物試驗驗證方法

1.2.1 試驗動物和試驗設計

泌乳奶牛（或肉鴨），試驗動物奶牛頭數不低于18頭，試驗設立三個處理組，每處理6頭，吸附劑添加量0.2%，試驗期3周，見表3。

1.2.2 檢測項目

牛奶指標和牛奶中黃曲霉毒素M 1（AFM 1）含量；血液生化指標和免疫指標；生物標記物（Biomarker）牛奶中AFM1的含量。

表2 黃曲霉菌毒素吸附劑（水合硅鋁酸鹽類）質量標準和衛生指標

1.2.3 結果要求

霉菌毒素吸附劑對黃曲霉毒素的吸附有明顯效果，表現在顯著提高負對照組奶牛的生產性能（產奶量、乳品質等）；顯著降低牛奶中的Biomarker AFM1的含量；顯著改善血液生化指標和免疫指標水平，明顯改善或者消除試驗動物因黃曲霉毒素引起的中毒癥狀等方面。

2 飼料霉菌毒素吸附劑對玉米赤霉烯酮吸附有效性評價方法

2.1 對玉米赤霉烯酮吸附能力評價

反應體系設置參考黃曲霉毒素吸附劑。作為參考，篩選原料時，被檢測吸附劑對玉米赤霉烯酮吸附率應達到60%以上。玉米赤霉烯酮吸附劑產品質量標準和衛生指標參考黃曲霉毒素吸附劑產品標準。

2.2 動物試驗方法

2.2.1 試驗動物和試驗設計：

體重30 kg以上后備母豬或經產母豬，體重和胎次接近的后備母豬不低于18頭，隨機分三個處理組，每處理6頭，試驗期3周，見表4。

2.2.2 檢測項目

觀察生長性能、繁殖器官病變，檢測尿液Biomarker（玉米赤霉烯酮、α-玉米赤霉烯醇、肌酐等）指標（采用LC-MS/HPLC/ELISA試劑盒檢測）。

2.2.3 結果要求

玉米赤霉烯酮脫霉劑產品對玉米赤霉烯酮的吸附有明顯效果，表現在能夠消除試驗動物因玉米赤霉烯酮引起的繁殖器官中毒癥狀，顯著降低血液中玉米赤霉烯酮和尿液中玉米赤霉烯酮當量/肌酐的比值等。

3 飼料霉菌毒素吸附劑對嘔吐毒素吸附有效性評價方法

3.1 對嘔吐毒素吸附能力評價

反應體系設置參考黃曲霉毒素吸附劑。作為參考，篩選原料時，被檢測吸附劑對嘔吐毒素吸附率應該達到60%以上。嘔吐毒素吸附劑產品質量標準和衛生指標參考黃曲霉毒素吸附劑。

表3 脫霉劑吸附AFB1試驗設計與日糧組成

表4 脫霉劑吸附玉米赤霉烯酮試驗設計與日糧組成

表5 脫霉劑吸附嘔吐毒素試驗設計與日糧組成

3.2 嘔吐毒素吸附劑產品有效性動物試驗驗證方法

3.2.1 試驗動物和試驗設計

體重30 kg以上生長豬，體重和胎次接近的生長豬頭數不低于24頭，分三個處理組，每處理8頭，試驗期4周，見表5。

3.2.2 檢測指標

生長性能、血液指標、免疫指標、生物標記物（DON、DOM-1）等，生物標記物要綜合考慮血液、尿液和排泄糞便中的參數進行評定。

3.2.3 結果要求

嘔吐毒素脫霉劑產品對嘔吐毒素的吸附有效表現在對試驗動物生長性能有明顯改善，能夠消除試驗動物因嘔吐毒素引起的中毒癥狀，顯著降低血液中生物標記物DON的含量。

4 飼料霉菌毒素吸附劑對營養物質的吸附及對其他霉菌毒素吸附有效性評價方法

霉菌毒素吸附劑吸附霉菌毒素的同時，對飼料和飼料原料中營養物質也會有一定的吸附，降低了飼料和飼料原料的營養水平，降低使用價值。因此，在霉菌毒素吸附劑評價體系中，加入霉菌毒素吸附劑對營養物質的吸附影響非常必要。同樣可以考慮模擬動物胃腸道環境條件開展體外吸附營養水平評定。

目前研究比較多的是霉菌毒素吸附劑產品對以上三種霉菌毒素的吸附，對于其他霉菌毒素的吸附效果了解的還比較少。但是隨著研究進程的逐步深入，會涉及到更多的霉菌毒素吸附劑產品評價。建立和完善有效統一的霉菌毒素吸附劑評價體系，意義重大，任重而道遠。

S816

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1673-4645(2017)06-0048-03

2017-06-23

農產品質量安全監管專項，國家重點研發計劃政府間科技合作專項

王金全（1973-），男，博士，副研究員，主要從事動物營養與飼料科學研究，E-mail：wang jinquan@caas.cn