超高效液相串聯質譜儀檢測蔬菜中涕滅威及其代謝物的方法研究與探討

李敏 尹浩 伊淑平 孫甜 張忠一 施文浩 王愛卿

超高效液相串聯質譜儀檢測蔬菜中涕滅威及其代謝物的方法研究與探討

李敏 尹浩 伊淑平 孫甜 張忠一 施文浩 王愛卿

涕滅威又名神農丹，是一種氨基甲酸酯類殺蟲劑、殺螨、殺線蟲劑，屬于高毒農藥，禁止蔬菜、果樹、茶葉、中草藥材上使用。涕滅威施用后能夠很快氧化成為仍具生物活性的涕滅威亞砜和涕滅威砜。

目前農業檢測部門主要使用《NY/T761-2008蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》中液相色譜儀和柱后衍生設備檢測涕滅威、涕滅威砜、涕滅威亞砜，使用《GB/T20769-2008水果和蔬菜中450種農藥及相關化學品殘留量的測定液相色譜-串聯質譜法》可以檢測涕滅威砜。本試驗研究了使用液相色譜-串聯質譜實現快速簡便檢測涕滅威、涕滅威砜、涕滅威亞砜，并以此為例探討農殘多殘留檢測的注意事項。

一、材料與方法

1、儀器與試劑

儀器：Waters UPLC Xevo TQ超高效液相串聯質譜儀、冷凍離心機、T18均質機

試劑：乙腈（色譜純）、甲醇（色譜純）、甲酸（色譜純）、水（應符合GB/T6682一級水指標）、冰乙酸、氯化鈉、分散固相萃取凈化管（內含25毫克PSA，7.5毫克GCB，150毫克MgSO4）。

標準品：涕滅威(農業部環境質量測試中心,1毫克/毫升)、涕滅威砜(農業部環境質量測試中心, 1毫克/毫升)、涕滅威亞砜(農業部環境質量測試中心,1毫克/毫升)

2、樣品處理

⑴提取

稱取已粉碎10.00克試樣至50毫升離心管中。加入15毫升酸化乙腈（即0.1%乙酸乙腈），10000rpm/分鐘勻漿1分鐘。加入3克NaCl后，劇烈振蕩1分鐘，讓塊狀試樣分散開來，然后10000rpm離心5分鐘。

⑵凈化

取1毫升上清液轉移至2毫升分散固相萃取凈化管中，劇烈振蕩1分鐘，5000rpm離心5分鐘，取上清液300微升，加入超純水定容至1毫升，混勻，過0.22微米濾膜，上機。

3、儀器條件

液相部分設置：色譜柱：BEH C18（50毫米×內徑2.1，粒徑1.7微米）；流動相：A相0.1%甲酸甲醇；B相5mM乙酸銨0.1%甲酸水；流速0.3毫升/分鐘；進樣量：5微升，柱溫30℃。液相梯度設置：見表1。

質譜設置：電離模式：ESI+；掃描方式：MRM；離子源溫度150℃；脫溶劑溫度500℃；毛細管電壓3200V。

4、質譜調諧參數設置

通過比較相應強度，確定母離子后，進行調諧，確定多反應監測參數，見表2。

5、計算公式

式中：W-蔬菜中農藥殘留量（毫克/千克）

C-標準曲線查得樣品上機濃度（納克/毫升）

V1-最終定容體積（毫升）

V2-乙腈提取液體積（毫升）

m–稱樣質量（克）

二、結果與討論

1、線性關系和定量限

配制2、5、10、20、50納克/毫升濃度基質標準溶液，上機，標準曲線見圖1，涕滅威、涕滅威砜、涕滅威亞砜線性相關系數r分別為，0.9997、0.9992、0.9997；三種目標物質譜出峰時間為，5.42分鐘，2.04分鐘，1.71分鐘。根據三種目標物2納克/毫升出峰情況和信噪比，定量限為0.01毫克/千克，出峰情況見圖2。

2、樣品分析及加標回收率試驗

按照前處理步驟和儀器設置條件進行標準添加檢測，在10微克/千克加標量下，從表3可以看出，試驗重復性好，三種目標物平均回收率為93.8%、91.8%、90.2%，4次檢測RSD分別為6.2%、1.9%、3.3%。

表1 液相梯度設置表

表2 多反應監測參數設置表

表3 回收試驗情況表

圖1 涕滅威、涕滅威砜、涕滅威亞砜標準曲線

圖2 2納克/毫升涕滅威砜、涕滅威、涕滅威亞砜選擇離子質量色譜圖

三、結論

該方法使用的簡便、快速，重復試驗數據穩定，線性關系良好，涕滅威、涕滅威砜、涕滅威亞砜線性方程分別是Y=22.81x-2.56，Y=814.36x+ 8.72，Y=169.63X+8.32。在做蔬菜中農藥多殘留檢測時應注意以下幾點：一是選擇響應高的離子對，例如涕滅威母離子可以選擇加NH4+峰分子量208，也可以選擇加Na+峰分子量213，通過實際調諧比較加Na+峰響應高并且較穩定。二是注意溶劑效應，由于流動相初始為10%甲醇水體系，上機樣品為30%乙腈水體系，本試驗顯示如果目標物出峰在1.5分鐘以內，溶劑效應較為明顯，所以需要合理調整流動相梯度和進樣量，抑制溶劑響應。三是基質效應干擾，本試驗采用基質加標作為定量依據，防止基質效應干擾。四是本試驗液相梯度設置同樣適用于超高效液相質譜測定蔬菜中農藥多殘留檢測。

(作者單位：滄州市農產品質量檢驗監測中心)